芍藥甘草湯對梗阻輸尿管平滑肌電活動頻率影響的實驗研究

楊曉溪 趙舒 常青

(華北煤炭醫學院中醫學系 河北 唐山 063000;①貴陽中醫學院第一附屬醫院泌尿外科)

芍藥甘草湯出自東漢張仲景《傷寒論》,該方配伍嚴謹,用藥精簡,為中醫臨床常用的柔肝緩急、疏攣止痛方劑[1]。后世臨床實踐中其應用范圍日趨廣泛,常作為緩痙止痛之主方用于治療多種痛證,如筋脈、經絡、肌肉之痛等每有效驗。現代藥理研究表明,芍藥、甘草均有鎮靜、鎮痛、抗炎、抗過敏等作用[2],二藥合用諸藥理作用增強,對身體的攣急有效。而對于深在輸尿管平滑肌,如胃腸、膽囊、子宮等亦有實驗報道,證實本方具有緩解平滑肌痙攣及鎮痛的作用。本文繼續從解痙角度觀察芍藥甘草湯對家兔梗阻前后各期的輸尿管平滑肌電活動頻率的影響,探討其作用機制。

1 材料與方法

1.1 動物及分組 健康成年實驗白家兔 40只,雌雄各半,兔齡6～8月,體質量 2.0～3.0kg,由貴陽醫學院實驗動物所提供。將實驗動物在實驗室條件下飼養 3天后,隨機分為 A、B、C、D、E 5組:A為絞痛模型組,B為芍藥甘草湯大劑量治療組,C為芍藥甘草湯中劑量治療組,D為芍藥甘草湯小劑量治療組,E為陽性對照組,每組8只。術前 12h禁食、6h禁飲。麻醉前各組均下胃管,以備灌注藥液。所有動物均制做病理模型。

1.2 藥物

1.2.1 芍藥甘草湯(由白芍藥、炙甘草組成)。處方中藥材購自貴陽中醫學院第一附屬醫院門診中藥房,經鑒定為正品。根據原著對該方組方規律研究的文獻及現代臨床用藥習慣確定本方白芍藥、炙甘草之比為 2:1,即白芍藥 55.68g、炙甘草 27.84g。按此量(83.52g)為 60kg成人每次臨床用藥量計算,家兔等效劑量為:3.3(折算系數)×83.52g/60kg≈5g/kg[3]。以水煎煮,分別濃縮成含生藥量為 0.375g、0.75g、1.5g/mL3種濃度的藥液,即芍藥甘草湯小、中、大劑量組,供家兔灌胃頓服,各組灌胃體積均為 20mL/次。

1.2.2 阿托品注射液。購自貴陽中醫學院第一附屬醫院門診中藥房。按 60kg成人每次臨床推薦口服用量為 0.5mg/次,3kg家兔等效量為:3kg×3.3(折算系數)×0.5mg/60kg≈0.08mg[3]。取 0.08mg阿托品,用無菌注射用水配制成濃度為 0.004mg/mL的液體,供家兔灌胃用,灌胃體積為 20mL/次,頓服。

1.3 儀器 MS4000U生物信號定量記錄分析系統,廣州市龍飛達科技有限公司研制,具有強大的生物信號顯示與數據處理功能。Ag/Agcl電極。

1.4 實驗方法 實驗在室溫 23～25℃中進行,25%烏拉坦(1g/kg)腹腔注射,麻醉起效后,將實驗家兔背位固定于兔臺上。頸部手術:插好氣管插管。5%葡萄糖鹽水耳緣靜脈緩慢靜滴,15滴/分鐘左右。取下腹部正中切口,經腹相當于髂血管水平仔細分離兩側輸尿管,盡量保持血運。在該側輸尿管下段預定結扎部位之上 0.5cm處安放一對 Ag/Agcl記錄電極,兩電極相距 0.5cm,兩電極平行安放于輸尿管下面,使電極與輸尿管緊密接觸。Ag/Agcl記錄電極接相應的MS4000U生物電信號輸入系統,肌電信號通過電信號定量分析系統作實時的顯示、記錄與儲存。本實驗利用實驗室的自身屏蔽作用,通過MS4000U生物信號定量記錄分析系統接地及其濾波、增益等功能將噪音減小,改善波形質量,使得電信號反應更容易,更準確,排除無關電信號的干擾。5組結扎給藥前均記錄 10min正常輸尿管平滑肌動作電位頻率。于輸尿管下段靠近膀胱部位行輸尿管結扎,造成梗阻模型。結扎后分組灌胃給藥,頓服 20mL。A組給予無菌注射用水灌胃,B組給予大劑量芍藥甘草湯灌胃,C組給予中劑量芍藥甘草湯灌胃,D組給予小劑量芍藥甘草湯灌胃,E組給予阿托品灌胃。分別記錄給藥后 1、5、30、45、60、90min的輸尿管平滑肌動作電位頻率變化。

1.5 觀察指標 實驗家兔正常、梗阻給藥后各時期的輸尿管平滑肌動作電位頻率。

1.6 統計學方法 數據采用 SPSS13.0版統計軟件進行分析,計量資料以均數 ±標準差()表示,采用 t檢驗、重復測量數據的方差分析進行統計檢驗。

2 結果

表1 各組家兔正常、梗阻后各期的輸尿管平滑肌電活動頻率比較(, 次/min)

表1 各組家兔正常、梗阻后各期的輸尿管平滑肌電活動頻率比較(, 次/min)

注:與結扎給藥前比較,△P＜0.01;與絞痛模型組比較,●P＜0.05

組別 n 結扎給藥前 結扎給藥后不同時間(min)即刻 5 30 45 60 90絞痛模型組 8 5.4±0.2 8.4±0.6△ 9.2±4.0△ 9.5±1.1△ 9.6±4.2△ 9.7±3.4△ 9.9±2.7△芍甘湯大劑組 8 5.3±0.2 8.4±0.6△ 9.0±4.3△ 8.4±3.4△ 7.6±3.4△ 7.3±3.5△ 6.5±1.9△●芍甘湯中劑組 8 5.2±0.2 8.5±0.7△ 9.1±3.3△ 9.0±2.4△ 8.6±2.6△ 8.1±3.3△ 7.9±3.3△芍甘湯小劑組 8 5.5±0.3 8.5±0.6△ 9.3±4.2△ 9.4±2.1△ 9.2±4.0△ 9.5±3.3△ 9.5±4.0△陽性對照組 8 5.3±0.2 8.4±0.7△ 8.8±3.1△ 7.8±3.9△ 7.4±3.3△ 7.2±2.9△ 6.6±2.1△●

各組輸尿管平滑肌電頻活動頻率見表 1、圖 1。由表 1可見,結扎給藥后各時間點與結扎給藥前比較,輸尿管平滑肌電活動頻率均顯著增高(P＜0.01)。與絞痛模型組比較:芍藥甘草湯大劑量組、阿托品陽性對照組輸尿管平滑肌電活動頻率顯著降低,并且差別具有統計學意義(P＜0.05);結扎給藥后 90min芍藥甘草湯中、小劑量組輸尿管平滑肌電活動頻率值也較絞痛模型組低,但差別不具有統計學意義(P＞0.05)。芍藥甘草湯大劑量組與阿托品陽性對照組比較:大劑量組輸尿管平滑肌電活動頻率值略低于陽性對照組,但二者差異無統計學意義(P＞0.05)。

圖1 頻率交互效應輪廓圖

3 討論

輸尿管急性梗阻是泌尿外科常見急癥。其主要病理特點為,梗阻后尿液下行排泄受阻,尿液在集合系統內積聚,輸尿管內靜息壓力升高,輸尿管平滑肌蠕動頻率和幅度也暫時升高,引起輸尿管平滑肌痙攣,最終往往誘發腎絞痛的出現。臨床表現多有陣發性絞痛,患者往往難以忍受,治療上主要采用解痙、鎮痛等方法。基于以上認識,本實驗主要針對各時間段輸尿管平滑肌電活動頻率的變化進行探討,以觀察芍藥甘草湯的解痙療效。根據本病發生的病因病機并結合相關文獻研究,實驗采用周水生、朱喜山等人[4～6]結扎家兔單側輸尿管的方法復制輸尿管急性梗阻的動物模型。

研究結果顯示,各組家兔輸尿管結扎給藥后各時間點與結扎給藥前相比,輸尿管平滑肌電活動頻率均顯著升高(P＜0.01),證明模型較好地復制了本病的一些主要病理過程,具有可重復性。

與絞痛模型組比較,大劑量芍藥甘草湯輸尿管平滑肌電活動頻率升高緩慢,其值較低(P＜0.05);中劑量芍藥甘草湯輸尿管平滑肌電活動頻率也隨時間的延長而升高緩慢,但二者差異無統計學意義(P＞0.05);小劑量芍藥甘草湯輸尿管平滑肌電活動頻率值亦略低于絞痛模型組(P＞0.05)。實驗結果證實大劑量芍藥甘草湯具有明顯解痙作用,而中、小劑量芍藥甘草湯解痙療效不顯著。

與陽性對照組比較,芍藥甘草湯大劑量組,其電活動頻率值略低,但二者差異無統計學意義(P＞0.05)。說明大劑量芍藥甘草湯可與口服阿托品解痙療效相當,甚至更好。由結果知,中、小劑量芍藥甘草湯則較口服阿托品解痙療效差。且阿托品作用還具有出現快,但維持時間較短的弊端。芍藥甘草湯作用盡管出現慢,但解痙療效鞏固持久。

結果表明,芍藥甘草湯能明顯降低輸尿管平滑肌電活動頻率,對痙攣輸尿管平滑肌具有明顯地解痙作用。而此作用與芍藥甘草湯劑量有一定依賴性。

[1]沈祥春,陶 玲,方泰惠.芍藥甘草湯臨床及藥理進展[J].新疆中醫藥,2001,2(19):59

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