氯胺酮連續應用對犬的安全性研究

2010-06-15 01:45:44邱邦東余光開

重慶醫學 2010年12期

邱邦東,余光開

(1.四川省宜賓市第二人民醫院感染科 644000;2.瀘州醫學院附屬醫院感染科 646000)

狂犬病(rabies)是由狂犬病病毒(rabies virus)引起的以侵犯中樞神經系統為主的人獸共患性急性傳染病。多年來人類對狂犬病病毒、發病機制、病理改變以及疫苗的研究已取得一定的成果,但對該病治療的研究成效不大,病死率幾乎仍是100%;而且,近年來中國狂犬病疫情呈快速增長趨勢[1],因此在進一步加強犬只管理、暴露前后預防工作的實施和研究的同時,探尋一種有效可行的治療手段已是目前值得關注的問題。研究發現氯胺酮除具有良好的鎮痛、鎮靜作用外,還有抑制狂犬病病毒、抗炎、腦保護等作用。但氯胺酮治療狂犬病需較長時間、連續的應用。目前,長時間、連續應用氯胺酮對人或動物的安全性如何尚不甚清楚,本文將展開這方面的研究,為加深其在狂犬病臨床應用奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 實驗動物家犬40只,2～3月齡,體質量4.5～5.5 kg。

1.2 實驗材料鹽酸氯胺酮注射液(江蘇恒瑞醫藥股份有限公司生產,劑型2 mL∶0.1 g)、真空采血抗凝管、10%中性甲醛溶液等。

1.3 實驗方法

1.3.1 動物分組將40只犬分為兩組,A組為空白對照組,共10只;B組為實驗組,共 30只。B組再分為B.1、B.2、B.3組;B.1組為不同劑量實驗組,共10只,并將其分為 5組,分別為B.1.a,B.1.b,B.1.c,B.1.d,B.1.e組,每組 2只;B.2組為不同維持劑量實驗組,共10只,同樣將其分為5組,分別為B.2.a,B.2.b,B.2.c,B.2.d,B.2.e組,每組2只;B.3組為持續維持實驗組,共10只。所有分組均隨機進行。

1.3.2 實驗操作本文把麻醉深度分為淺麻醉期、手術麻醉期和深麻醉期。B.1組實驗時,自B.1.a～B.1.e組分別給予10、20、40、60、80 mg/kg 5種不同劑量的氯胺酮肌注后觀察能否達到手術麻醉期效果,并記錄其臨床反應。B.2組實驗時,使用20 mg/kg的氯胺酮肌注,當麻醉深度減為淺麻醉期時再分別給予 B.2.a～ B.2.e 組 5、7.5、10、12.5、15 mg/kg 5 種不同劑量的氯胺酮肌注,觀察其能否維持在手術麻醉期水平。B.3組實驗應用B.1、B.2組實驗得出的能夠達到手術麻醉期的氯胺酮劑量(20 mg/kg)及其維持劑量(10 mg/kg)給予10只實驗犬肌注,而且維持手術麻醉期約12 h/d,持續1周,并密切觀察其臨床表現,夜間蘇醒后不再繼續維持,給以動物正常食物,并觀察其進食情況及精神狀況;1周后取A組和B.3組實驗犬的靜脈血查肝腎功能;并將B.3組實驗犬處死后取出其腦、肝、腎、肺、心肌等重要臟器組織,用 10%中性甲醛溶液固定,并經脫水、透明、石蠟包埋和3 μ m切片,HE染色后用光學顯微鏡觀察其組織、細胞結構上的改變。

1.4 統計學方法使用SPSS14.0軟件進行統計學分析,數據都以表示,采用兩個隨機樣本均數比較的t檢驗。

表1 兩組犬肝功能的比較

組別 ALT(u/L)ASL(u/L)TBIL(μ mol/L)CHE(u/L)ALP(u/L)A 組 19.89±5.58 31.31±9.47 0.88±0.613 4 148.1±974.78 133.54±54.86 B.3組 18.71±4.48 36.53±8.59 1.19±0.80 3 360.2±1041.18 154.09±72.99 t 0.521 1.292 0.973 1.747 0.712 P 0.609 0.213 0.344 0.098 0.486

2 結果

2.1 B.1組實驗肌注氯胺酮10 mg/kg不能達到手術麻醉期效果;而20、40、60 mg/kg可以達到手術麻醉期效果;80 mg/kg則出現了一些不良反應如:尖叫、異常興奮、明顯躁動不安、嘔吐、肢體顫抖甚至抽搐等,并逐漸出現了一定程度的呼吸抑制、昏睡以至昏迷。

2.2 B.2組實驗肌注氯胺酮20 mg/kg達到手術麻醉期后,密切觀察犬的呼吸狀況、眼球活動、眼瞼反射、瞳孔、肌張力和對刺激的反應等情況,當麻醉深度減為淺麻醉期時給予5、7.5 mg/kg氯胺酮不能維持手術麻醉期效果,而給予10、12.5、15 mg/kg氯胺酮均可以維持手術麻醉期。

2.3 B.3組實驗使用氯胺酮20 mg/kg使實驗犬達到手術麻醉期,并以10 mg/kg維持手術麻醉期,每日維持約12 h,持續1周后,實驗犬意識及健康狀態良好,生命體征平穩,精神、飲食、睡眠、行為等均未見明顯異常。肝腎功能與空白對照組比較差異無統計學意義(P＞0.05),見表 1和表 2;腦、肝、腎、肺、心肌等組織切片未見明顯異常,組織、細胞的結構完整、清晰,見彩插Ⅰ圖1～5。

表2 兩組犬腎功能的比較

組別 UR(mmol/L)CR(μ mol/L)A 組 3.34±1.55 29.94±16.67 B.3組 3.97±1.53 39.35±24.19 t 0.915 1.013 P 0.372 0.325

3 討論

狂犬病是迄今為止人類病死率最高的急性傳染病之一,目前尚無有效的特異性治療手段,一旦發病,死亡率幾乎達100%。因此,全世界狂犬病研究者一直致力于探尋一種安全、高效、實用的防治措施。

研究發現氯胺酮除具有傳統的麻醉、鎮痛作用外,還具有抗炎、腦保護以及抑制狂犬病病毒的作用。氯胺酮具有良好的麻醉、鎮痛作用,將其用于狂犬病暴露后傷口的處理,有利于對傷口進行徹底地清洗和清創。國內有不少研究發現氯胺酮有抑制炎癥反應的作用[2-3]。Desouza等[4]通過研究也認為氯胺酮能夠明顯抑制脂多糖引起的自由基的升高,其機制可能與氯胺酮能抑制炎癥細胞的呼吸爆發有關。氯胺酮具有較高的脂溶性,易通過血腦屏障而發揮腦保護作用。謝才姣等[5]在顱腦手術患者中使用小劑量的氯胺酮并檢測血漿TNF-α、IL-6及腦脊液星狀細胞膠質蛋白(S-100)濃度,發現小劑量氯胺酮對顱腦手術患者腦具有一定的保護作用。Lockhart等[6]研究發現氯胺酮對狂犬病病毒有抑制作用。Jackson等[7]給予受狂犬病病毒感染的鼠較大劑量的氯胺酮(60 mg/kg,ip,q12h),可使不同腦組織中病毒的擴散受抑制,包括海馬區、大腦皮質和丘腦。2005年,Willoughoy等[8]報道在常規的支持監護治療一名15歲狂犬病患者的同時使用氯胺酮等藥物誘導昏迷。彭穎和余光開[9]使用氯胺酮、重組人干擾素以及人狂犬病免疫球蛋白治療帶毒犬后,檢測唾液中狂犬病病毒抗原轉陰率,得出氯胺酮組轉陰率明顯高于其他兩組的結論。

氯胺酮的不良反應具有劑量相關的特點,使用劑量愈大,不良反應愈顯著。精神、神經系統反應是最常見的不良反應之一,主要表現為幻覺、錯覺、分離狀態或分裂癥,也可有尖叫、興奮、煩躁不安、定向力障礙、認知障礙、易激惹行為、譫妄、顫抖甚至驚厥等表現。產生這些不良反應的分子基礎仍不清楚,可能與氯胺酮能直接興奮邊緣系統,促進腦代謝和增加腦血流,并使中樞神經系統遞質失衡等有關。研究表明,腦組織中糖代謝的活躍與該組織活性增強相關,觀察氯胺酮麻醉動物的腦組織發現雙側海馬溝的糖代謝增加,并可持續48 h左右[10]。說明氯胺酮對邊緣系統的興奮活動與其不良反應在區域上有一致性,有可能氯胺酮對邊緣系統的興奮作用就是導致其神經系統不良反應的直接原因。氯胺酮對心血管系統具有間接興奮和直接抑制的雙重作用。一般情況下興奮勝于抑制,表現為血壓升高、心率增快等,這種作用可能同交感神經興奮和外周兒茶酚胺再攝取受到抑制有關,但在體弱、病情危重或處于強應激反應狀態下,則顯示對心功能的抑制作用。氯胺酮劑量過大、速度過快或聯合應用安定類鎮痛藥物時容易發生呼吸抑制甚至停止。氯胺酮還可增加腦血流和顱內壓以及眼壓,可導致失明、幻覺、復視和過敏反應。

本實驗發現給犬肌注氯胺酮10、20、40、60 mg/kg后無不良反應發生,并且肌注氯胺酮20 mg/kg后再給予10 mg/kg以維持手術麻醉期,每日維持約12 h,1周后,犬的肝功能、腎功能無明顯損害,其重要器官腦、肝、腎、肺、心肌等組織切片亦未見明顯異常,說明了氯胺酮對各個重要器官具有良好的安全性。

總之,氯胺酮在狂犬病的臨床應用上有較大的潛力,為治療狂犬病提供了新的思路,但是氯胺酮在狂犬病臨床應用中如何達到最佳使用效果,其不良反應、劑量、給藥方法、時機以及麻醉深度和維持時間等都還需進一步探討。

[1]崔化彥,王萬民.14例狂犬病流行病學分析[J].醫藥論壇雜志,2005,26(9):5.

[2]張小寶,朱敏敏,黃海慧,等.氯胺酮對脂多糖誘發的大鼠肺泡巨噬細胞一氧化氮及氧自由基生成的影響[J].南京醫科大學學報(自然科學版),2007,27(10):1115.

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[4]Desouza LF,Barreto F,Da Silva EG,et a1.Regulation of LPS stimulated ROS production in peritoneal macrophages from alloxan-induced diabetic rats:Involvement of high glucose and PPARgamma[J].Life Sci,2007,8l(2):153.

[5]謝才姣,徐軍美,熊國強,等.小劑量氯胺酮對顱腦手術患者的腦保護作用[J].中華麻醉學雜志,2006,26(9):818.

[6]Lockhart BP,Tordo N,Tsiang H.Inhibition of rabies virus transcription in rat cortical neurons with the dissociative anesthetic ketamine[J].Antimicrob Agents Chemother,1992,36(8):1750.

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[10]Nelson SR,Howard RB,Cross RS,et a1.Ketamine-induced changes in regional glucose utilization in the rat brain[J].Anesthesiology,1980,52(4):330.