流行性乙型腦炎患兒白介素1β、神經元特異性烯醇酶的變化及臨床意義

石海礬，李偉，陳益平，汪洪姣，張桂蓮，金勝鑫

(溫州醫學院附屬第二醫院，浙江 溫州 325027，1.兒科；2.檢驗科)

白介素1β(IL-1β)與神經元特異性烯醇酶(NSE)是敏感、特異性反映腦損傷的量化指標，在腦損傷中反映病情嚴重程度、判斷預后的作用已越來越受到人們的關注[1-2]。但關于流行性乙型腦炎(乙腦)患兒腦脊液及血清IL-1β、NSE含量變化、與病情及預后的關系及兩者相關性，國內外尚鮮見報道，我們對此進行研究，報告如下。

1 材料和方法

1.1 對象 我院兒童感染科2005年6月-2007年10月住院乙腦患兒，男31例，女19例；年齡1～13歲，平均年齡5.6歲。均符合彭文偉主編的《傳染病學》（第六版）診斷標準[3]，血清乙腦病毒特異性IgM抗體均為陽性。根據患兒入院時神志情況，按Glasgow評分標準，15分為正常，共17例；14～12分為輕度，共20例；11～8分為重度，共13例。所有患兒均無乙腦疫苗接種史。對照組為兒外科20例非神經系統疾病手術患兒，男13例，女7例；年齡2～11.5歲，平均年齡5.3歲。兩組性別、年齡差異無顯著性(P均>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 標本采集：50例患兒于極期（入院當天）、47例（重度組有3例放棄治療）于恢復期（入院后2到3周）采集腦脊液（CSF）。腰穿采取CSF標本后立即送檢常規、生化，另留取1 mL于無熱源和內毒素試管中，-70 ℃冰箱內保存待檢。同時采血2 mL置于無熱源和內毒素的試管中，剔除溶血標本，靜置5～10 min后，3000 r/min離心10 min，分離血清，置于Eppendorf管中，-20 ℃冰箱內保存待檢。

1.2.2 標本檢測：IL-1β采用雙抗體夾心ELISA法檢測，試劑由上海晶美公司提供。NSE采用電化學發光法，試劑盒購自羅氏公司，按說明書由專人負責統一檢測。

1.3 統計學處理方法 組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較方差齊者采用LSD法，方差不齊采用Dunnett’s T3法，相關分析采用Pearson積差相關分析法。

2 結果

2.1 乙腦患兒極期和恢復期（不同分組）CSF、血清中IL-1β、NSE檢測結果，見表1。

表1 乙腦患兒極期和恢復期（不同分組）CSF、血清中IL-1β、NSE檢測結果±s，μg/L)

表1 乙腦患兒極期和恢復期（不同分組）CSF、血清中IL-1β、NSE檢測結果±s，μg/L)

任意兩組間兩兩比較：均P<0.01

?

CSF、血清中IL-1β、NSE各組含量極期>恢復期>對照組，均P<0.01。

2.2 各型乙腦患兒CSF、血清中IL-1β含量，見表2。

表2 各型乙腦患兒CSF、血清中IL-1β含量(±s，μg/L)

表2 各型乙腦患兒CSF、血清中IL-1β含量(±s，μg/L)

任意兩組間兩兩比較：均P<0.01

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極期和恢復期CSF、血清中IL-1β含量隨病情的嚴重程度而增高，差異有顯著性（均P<0.01）。

2.3 各型乙腦患兒CSF、血清中NSE含量，見表3。

表3 各型乙腦患兒CSF、血清中NSE含量±s，μg/L)

表3 各型乙腦患兒CSF、血清中NSE含量±s，μg/L)

任意兩組間兩兩比較：均P<0.01

?

極期和恢復期CSF、血清中NSE含量隨病情的嚴重程度而增高，差異有顯著性（均P<0.01）。2.4 乙腦患兒腦脊液、血清中IL-1β、NSE含量相關性 乙腦極期患兒CSF IL-1β、NSE水平與血清IL-1β、NSE水平呈正相關(r=0.706，0.747，均P<0.01)，CSF、血清IL-1β水平與CSF、血清NSE水平呈正相關(r=0.611，0.708，均P<0.01)。

3 討論

流行性乙型腦炎是乙腦病毒引起的以腦實質炎癥為主的急性中樞神經系統傳染病，可引起神經細胞變性、腫脹及壞死，嚴重者在腦實質形成壞死軟化灶，留有嚴重的后遺癥。因此，早期判斷腦損傷程度，評估預后有重要作用。

近年來，白介素1（interleukin-1，IL-1）家族在顱腦損傷中的致炎作用越來越受關注。其中IL-1β為IL-1的主要分泌形式，與顱腦損傷關系最為密切。中樞神經系統自身可產生IL-1β，正常情況下，腦組織中的IL-1β活性極低，但在顱腦創傷、顱內感染等情況時，IL-1β水平及活性則明顯增高[4]，加重腦損傷。本研究發現乙腦極期患兒CSF中IL-1β含量比對照組明顯升高，與乙腦病變特征相一致。本研究乙腦患兒腦損傷程度根據Glasgow評分，分為正常組、輕度組和重度組（標本采集時間段中未收治極重型乙腦），極期時CSF中IL-1β含量隨Glasgow評分分值減少而升高，說明CSF中IL-1β含量反映乙腦患兒的病情輕重及腦損傷程度。IL-1β加重腦損傷的機制可能為：IL-1β升高導致大腦脈管系統白細胞的聚集，增加黏附分子的表達，破壞血腦屏障，導致單核細胞、中性粒細胞的入侵，對腦實質細胞造成損傷[5]。同時IL-1β增加鈣離子進入細胞，直接導致神經細胞死亡[6]，還可通過調節腦血流量，加重腦缺血損傷[7]。刪（敲）除鼠的IL-1β的編碼基因可顯著減輕腦的缺血損傷[8]，間接表明IL-1β具有加重腦損傷的作用。研究還發現，血中IL-1β含量亦隨病情的嚴重程度升高而增加，與CSF呈正相關。正常條件下，外周血中IL-1β含量極微。當腦損傷時，血CSF屏障通透性升高，使IL-1β跨過血腦脊液屏障進入血管內，因此，檢測血中IL-1 β亦有助于判斷腦損傷的程度。

NSE是參與醣酵解的關鍵酶，存在于神經元及神經來源的細胞中。正常條件下，正常體液中含量甚微。在腦損傷情況下，神經元細胞膜完整性被破壞，使NSE從細胞內漏到細胞外，進入CSF中，同時血腦脊液屏障通透性升高，NSE可跨過血腦脊液屏障進入血管內，從而進入外周循環[9]。因此，CSF及血中NSE被認為是膠質細胞和神經元損害時的標志物。研究表明，腦損害患者膠質細胞和神經元的損害及其嚴重程度，可以通過NSE含量來反映[10]。本研究發現，乙腦患兒CSF、血中NSE含量極期大于恢復期，且乙腦重度組>輕度組>正常組，皆有顯著差異，并且CSF與血的NSE含量呈正相關，提示隨腦實質損害加重，NSE升高。證明NSE能反映乙腦患兒腦實質損害的嚴重程度，與文獻[11]報道一致。

根據研究，我們還發現，隨著IL-1β的升高，NSE亦升高，呈正相關，其機制可能是乙腦病毒侵害腦實質時，IL-1β分泌增多，導致神經細胞不同程度破壞，細胞內NSE釋放增多。IL-1β變化提示腦實質炎癥情況，而NSE反映了神經細胞的損傷程度，兩者聯合檢測，從不同方面反映了腦損傷，但兩者是否有協同作用，國內外文獻鮮見報道，尚待進一步研究明確。

本研究發現，乙腦患兒病程2到3周，CSF常規恢復正常時，IL-1β及NSE雖然有所下降，但仍高于對照組患兒，是否提示乙腦患兒腦損傷持續時間較長，有待進一步探討。

[1]Oh SH, Lee JG, Na SJ, et al . The effect of initial serum neuron-specific enolase level on clinical outcome in acute carotid artery territory infarction[J]. Yonsei Med J, 2002,43(3):357-362.

[2]Lu KT, Wang YW, Yang JT, et al. Effect of interleukin-1 on traumatic brain injury-induced damage to hippocampal neurons[J]. Neurotrauma,2005,22(8):885-895.

[3]彭文偉.傳染病學[M].6版.北京:人民衛生出版社,2004:247-252.

[4]Felderhoff-Mueser U, Sifringer M, Polley O, et al. Caspase-1-processed interleukins in hyperoxia-induced cell death in the developing brain[J]. Ann Neurol, 2005, 57(1):50-59.

[5]Ching S, He L, Lai W, et al. IL-1 type I receptor plays a key role in mediating the recruitment of leukocytes into the central nervous system[J]. Brain Behav Immun,2005,19(2):127-137.

[6]Viviani B, Bartesaghi S, Gardoni F, et al. Interleukin-1betaenhances NMDA receptor-mediated intracellular calcium increase through activation of the Src family of kinases[J].Neurosci, 2003, 23(25):8692-8700.

[7]Maher CO,Anderson RE,Martin HS, et al. Interleukin-1beta and adverse effects on cerebral blood flow during long-term global hypoperfusion[J]. Neurosurg, 2003, 99(5):907-912.

[8]Boutin H, LeFeuvre RA, Horai R,et al. Role of IL-1alpha and IL-1beta in ischemic brain damage[J]. Neurosci, 2001,21(15):5528-5534.

[9]Barone FC, Clark RK, Price WJ, et al . Neuron-specific enolase increases in cerebral and systemic circulation following focal ischemia[J].Brain Res,1993,623(1):77-82.

[10]Herrmann M, Curio N, Jost S, et al. Release of biochemical markers of damage to neuronal and glial brain tissue is associated with short and long term neuropsycholigical outcome after traumaticbrain injury[J]. J Neurol Neurosurg psychiatry,2000,70(1):95-100.

[11]陳耀凱,卜瑛,王宇明,等. 流行性乙型腦炎患者腦脊液中神經元特異性烯醇酶含量的變化[J]. 第三軍醫大學學報,2001,23(10):10-11.