馬志遠
(甘肅省家畜繁育中心,甘肅 武威733000)
牛的胚胎移植技術是加快良種繁育的有效途徑[1]。長期以來,如何提高受體牛的利用率、受胎率一直是廣大技術人員努力的方向:我們通過對不同品種受體牛進行胚胎移植對比試驗,尋找最佳的胚胎移植受體牛品種,以此來提高牛胚胎移植的效果。
2005年4月~2006年6月在甘肅地區農戶和部分養殖場進行。
1.1.1 冷凍胚胎的來源 冷凍荷斯坦胚胎來源于新疆金牛生物股份有限公司,采用乙二醇為冷凍液。
1.1.2 受體牛選擇[2]受體牛根據當地的實際情況,選用西雜牛和秦川牛,符合以下條件的牛作為受體:①年齡在2~8歲之間,經產牛分娩在90 d以上,恢復較好、發育正常、體格較大;②擁有正常的發情周期、無繁殖疾病、經檢疫無傳染病、無流產史、健康、膘情六成以上。③易于飼養、適應性強。④產犢性能好、哺乳能力良好、乳量多。⑤人工受精超過兩次不孕的牛不能選用。
1.2.1 受體牛的同期發情處理與發情觀察 同期處理用PGF2α(氯前列烯醇;上海)2次注射法即根據牛體格大小間隔11天2次肌肉注射,每次0.4~0.5 mg,第二次注射48 h后觀察發情。對同期處理發情牛群每天6∶00~22∶00進行不少于5次的發情觀察,每次至少30 min以上,以穩定站立接受其他牛的爬跨為發情標準,并準確記錄開始穩定接受爬跨時間和基本結束時間(以小時為單位記錄)。
1.2.2 子宮、卵巢的檢查及黃體等級的判定[3]用直腸檢查法依次檢查子宮頸、左右兩側子宮角、卵巢的發育情況,對符合條件的受體牛同時要檢查卵巢的黃體,根據黃體大小、質地軟硬、卵巢基礎和有無排卵點分為A、B、C三級。A級為正常,卵巢基礎好黃體直徑在1.5 cm以上,質地軟硬適中,觸摸感覺如豬肝;B級為黃體直徑在1~1.5 cm之間,質地稍軟或稍硬,與卵巢連接痕跡隱性黃體與排卵點不明顯,卵巢基礎薄弱;C級為黃體過小,與卵巢連接痕跡明顯,有小卵泡或卵巢基礎過差。C級不能作為黃體移植,視為放棄,A、B級分別進行胚胎移植。
1.2.3 胚胎移植 根據發情穩定時間,以發情天為0 d,第6~8 d實施胚胎移植,先作好受體牛消毒工作;再將胚胎投入33~35℃的溫水中10 s左右解凍,取出擦干,裝入移植槍(FHK,日本)外裝專用硬外套(FHK,日本)及近無菌軟外套(FHK,日本),最后用非手術法將胚胎移入有黃體一側的子宮角的上1/2~1/3處,5~8 min完成。
1.2.4 妊娠檢查及妊娠母牛的飼養管理 認真做好胚胎移植記錄,在60 d后用直檢法進行妊檢,經直檢確診妊娠的受體母牛,分群飼養管理,供給充足的飼料以保證滿足胎兒和母牛的營養需要。防止頂撞、滑到等預防流產;保持舍內和牛體的清潔衛生。
以受體牛同期率、黃體合格率和受胎率為技術指標,用生物統計學方法進行分析,得出結果[4]。
用PGF2α(氯前列烯醇;上海)2次注射法,西雜牛同期發情率為90.4%(76/84),秦川牛同期發情率為83.1%(64/77),西雜牛比秦川牛的同期發情率高7.3%,差異顯著(P<0.05),黃體合格率為64.5%(49/76)、53.1%(34/64),西雜牛比秦川牛的黃體合格率高10.4%,二者之間差異顯著(P<0.05)見表1。

表1 不同品種受體牛同期發情的效果比較
對黃體合格的49頭西雜牛和34頭秦川牛進行胚胎移植,移植60 d后受胎頭數分別為31頭和18頭,受胎率分別為63.3%、52.9%,二者之間差異顯著(P﹤0.05)見表2。

表2 受體牛重復使用對受胎率的影響結果比較
采用PGF2α按照同一程序對西雜牛和秦川牛進行同期發情處理,西雜牛比秦川牛的同期發情率高7.3%,西雜牛比秦川牛的黃體合格率高10.4%,同期率和黃體合格率均差異顯著。受體牛雖然不受品種限制,但是選擇合適的品種做為受體,可以起到良好的效果。
對西雜牛和秦川牛進行胚胎移植,受胎率分別為63.3%、52.9%,二者之間差異顯著(P<0.05)。因此選擇合適的受體,這對降低生產成本,提高胚胎移植經濟效益具有一定的實際意義。
[1]楊國義.牛胚胎生物技術研究與應用[J].中國畜牧獸醫,2004,31(9):31-34.
[2]郭志勤.家畜胚胎工程[M].中國科學技術出版社,1998,12.
[3]馬志遠,張靈芝.受體牛重復使用對同期發情效果和胚胎移植受胎率的影響[J].黑龍江動物繁殖,2006,14(1):20-21.
[4]俞渭江主編.生物統計附實驗設計[M].貴州農學院,1986.