GC -MS 法檢測包裝材料中的三聚氰酸殘留

董穎超 高木珍 李 俊 李軍國

三聚氰胺在一般情況下較穩定,但在強酸、強堿條件下能發生水解，氨基逐步被羥基取代，生成三聚氰酸二酰胺（ammeline）、三聚氰酸一酰胺（ammelide）和三聚氰酸（cyanuric acid）。美國環?？偸穑║S EPA）認為這4種物質具有同等的毒性效應，將這4種物質統稱為三聚氰胺相關物質（簡稱MARCs），并對它們進行總體毒理學評價。研究人員試驗了大鼠單獨攝入三聚氰胺、三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺或三聚氰酸以及這4種化合物的混合物。三聚氰酸二酰胺或三聚氰酸一酰胺單獨使用均未對腎產生任何作用，但混合物則產生了明顯的腎損傷。Roberto報道，在某些檢出三聚氰胺陽性的食品中，也能檢出不同含量的三聚氰胺衍生物。歐洲食品安全機構公布了臨時聲明，并提出三聚氰胺及其類似物（三聚氰酸、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸二酰胺）總量的每日耐受攝入量為每千克體重0.5 mg。

飼料安全是動物性食品安全的源頭，只有飼料安全了才能有效徹底的排除三聚氰胺及其衍生物對動物性食品安全帶來的隱患。三聚氰酸及三聚氰胺等可以通過遷移的方式進入到食品或飼料中，因此也有必要監控產品或原料包裝材料的三聚氰酸的殘留。目前尚無用于包裝材料中三聚氰酸殘留的檢測方法。

1 試驗部分

1.1 儀器和試劑

氣相色譜7890-質譜聯用儀5975，Agilent公司；色譜柱 DB-5MS，30 m×0.25 mm×0.25 μm；三聚氰酸（>99%）購自Aldrich-Sigma公司；甲醇，色譜純，購自Fisher；硅烷化試劑：Sylon BFT（99%，N,O-雙三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）+1%三甲基氯硅烷（TMCS））購自Supelco公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 樣品處理

稱取0.5 g樣品于15 ml離心管中，加入5 ml甲醇，超聲10 min，4000 r/min離心10 min，將甲醇提取液用0.45 μm過濾頭過濾，取40 μl提取液至樣品瓶中，70℃烘箱中揮干，約 15 min，加入 50 μl吡啶和 50 μl硅烷化試劑，渦旋混合均勻，70℃烘箱下反應30 min，上機測定。

1.2.2 GC-MS測定條件

載氣為99.99%的高純氦氣；進樣口溫度250℃，不分流進樣，恒流模式，流速 1 ml/min；上樣量 1 μl；程序溫度：75℃（1 min），15℃/min升至300℃，保持10 min。電子轟擊（EI）離子源，電離能量70 eV，四級桿溫度150℃，傳輸線溫度280℃，溶劑延遲時間4 min，全掃描確定定量及定性離子，采用SIM定量。

2 結果和討論

2.1 定量及定性離子的確定

配制一定濃度的三聚氰酸的標準工作溶液，先對其進行全掃描，根據全掃描的結果，確定目標化合物衍生物的監測離子為345.2、330.1、188.1 m/z，定量離子為 345.2 m/z，見圖 1、圖 2、圖 3。

2.2 檢測限及定量限的確定

配制三聚氰酸系列濃度的標準工作溶液，按所建立的方法進行處理及測定，以目標化合物定量離子的峰面積Y對目標化合物的質量濃度進行線性回歸，得三聚氰酸的線性范圍，相關系數；線性方程：Y=-28064.672+620432.087X，R2=0.9927，結果表明，在0.05～1.0 mg/kg的范圍內線性關系良好（見圖4）。

2.3 方法的檢測限

以S/N=3為檢測限（LOD）的確定依據，三聚氰酸的檢測限為0.01 mg/kg，以S/N=10為定量限（LOQ）的確定依據，三聚氰酸的定量限為0.05 mg/kg。

2.4 回收率和精密度

為了驗證方法的準確性和重現性，選取飼料原料及產品的包裝材料進行加標回收試驗，經過試驗驗證加標的樣品為未檢出化合物的本底樣品，進行加標回收試驗，同一濃度做6次平行試驗，回收率及精密度結果見表1，樣品加標后總離子流圖見圖5。

圖4 三聚氰酸衍生物峰面積-三聚氰酸濃度工作曲線

表1 包裝材料中三聚氰酸的回收率及精密度

圖5 實際樣品總離子流圖

2.5 樣品測定

運用本文中所建立方法對40個飼料產品包裝袋進行了檢測，樣品中均未檢出三聚氰酸。

3 結論

本文建立的氣相色譜-質譜測定包裝材料中三聚氰酸的方法，具有前處理簡單，重復性好等特點。由于在本方法中沒有引入混合型陽離子固相萃取柱，即通過乙腈-水溶液提取后，無需凈化，過膜后直接衍生，能夠跟三聚氰胺同時測定，提高了檢測的效率，節省了分析時間。在試驗過程中發現在部分樣品中還出現了3個峰，有可能是三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺3種化合物，對于它們的確證工作在進一步進行中。

[1]FDA.GC-MS Screen for the Presence of Melamine and Cyanuric Acid.[2007-05-07].http://www.fda.gov/cvm/GC-MS Melamine.htm.

[2]徐英江，宮向紅，張秀珍，等.超高效液相色譜-串聯質譜測定海水及沉淀物中三聚氰胺[J].質譜學報,2009,30(2):70-73.

[3]Xiao-min Xua,Yi-ping Ren,Yun Zhuc,et al.Direct determination of melamine in dairy products by gas chromatography/mass spectrometry with coupled column separation[J].Analytica Chimica Acta.2009,650:39-43.

[4]Davidson M B,Thakkar S,Hix J K,et al.Pathophysiology,clinical consequences,and treatment of tumor lysis syndrome[J].Am.J.Med.,2004，116:546-554.