凡納濱對蝦對7種蛋白原料的蛋白質(zhì)和氨基酸的消化率

楊志強 曹俊明 朱 選 胡俊茹 趙紅霞 陳水春 藍漢冰

消化率是指動物從食物中所消化吸收的營養(yǎng)物質(zhì)占總攝入食物總量的百分比，是評價飼料營養(yǎng)價值的重要指標之一[1]，它也是配制全價高效人工飼料的基礎。在掌握動物對飼料原料消化率的基礎上，才有可能最大限度地充分利用各種飼料原料，從而達到降低飼料成本，提高動物的生長性能以及降低對環(huán)境的破壞。

近年來由于世界魚粉市場供需不平衡，魚粉價格不斷上揚，使養(yǎng)殖成本上升，從而嚴重制約了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，減少魚粉的使用成為亟待解決的問題。而利用廉價的蛋白源替代魚粉是當前飼料研究的熱點之一。

凡納濱對蝦（Penaeus vannamei）是世界對蝦養(yǎng)殖的三大品種之一。關(guān)于其營養(yǎng)需要的研究相對較多[2-3]，但是，有關(guān)凡納濱對蝦對飼料原料消化率的研究則迄今為止極少，至今只見Akiyama等（1989）[4]對酪蛋白、面筋、大豆蛋白、白明膠、玉米淀粉、烏賊粉、魚粉、蝦粉和大豆粉做了相關(guān)報道。本研究采用腸膜蛋白粉、進口肉骨粉、雞肉粉、干燥噴霧血粉、羽毛粉、玉米蛋白粉和花生粕7種飼料蛋白原料。為研究適于凡納濱對蝦營養(yǎng)需要的全價高效人工配合飼料提供參考和依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

腸膜蛋白粉、肉骨粉、雞肉粉、干燥噴霧血粉、羽毛粉、玉米蛋白粉和花生粕共7種飼料蛋白原料的粗蛋白含量見表1。試驗飼料分別由基礎飼料和各種待測飼料原料組成，前者占69.50%（不含Cr2O3指示劑），后者占30%。基礎飼料配方及營養(yǎng)水平見表2。

表1 待測原料的粗蛋白含量（%）

各組飼料中所用原料全部粉碎過60目篩，均勻混合，然后按逐級放大的原則加入0.5%的Cr2O3指示劑和其他含量較少的成分，充分混合均勻后擠壓制粒，制成直徑為1.5 mm的顆粒，55℃烘干后，于-20℃的冰箱中密封保存，備用。飼料粗蛋白含量見表3。

表2 基礎飼料配方及營養(yǎng)水平（%）

表3 試驗飼料的粗蛋白含量（%）

1.2 試驗管理與糞便收集

試驗取體重（2.08±0.01）g的健康活潑的凡納濱對蝦720尾隨機分為8組，每組3個重復，每個重復30尾，用添加指示劑的基礎飼料馴養(yǎng)1周。在試驗期間，每天投喂2次，時間分別為9：00和16：00，日投喂量為凡納濱對蝦體重的6%（根據(jù)對蝦的攝食情況來調(diào)節(jié)投喂量）。用各試驗飼料組飼養(yǎng)1周后，開始收集糞便。每次投喂30 min后開始收集糞便，用虹吸方法將糞便收集到培養(yǎng)皿內(nèi)，70℃烘干后低溫保存，連續(xù)收集約18 d，直至收集到足夠的樣品用于分析。

試驗持續(xù)采用循環(huán)過濾水系統(tǒng)，保持充氧。水深約0.6 m，水溫約為30℃，鹽度為5.1‰左右，試驗的飼養(yǎng)周期為35 d，養(yǎng)殖用水是采用天然的海水注入淡水配制而成。

1.3 樣品采集

把蝦糞烘干并研磨，全部過40目篩。

1.4 分析測定與計算

飼料和糞便烘干后，測定其中相應的營養(yǎng)成分和鉻含量。鉻含量用火焰原子吸收法測定，蛋白質(zhì)含量用半微量凱氏定氮法測定，氨基酸含量采用日立公司的L-8900型全自動氨基酸分析儀測定。

①基礎飼料和試驗飼料蛋白質(zhì)的表觀消化率計算公式[5]：

表觀消化率（%）=〔1－(糞便中蛋白質(zhì)含量×飼料中鉻含量)/(飼料中蛋白質(zhì)含量×糞便中鉻含量〕×100。

②基礎飼料和試驗飼料氨基酸的表觀消化率計算公式[6]：

氨基酸表觀消化率（%）=〔1－（飼料中 Cr2O3含量×糞便中氨基酸含量）/（糞便中Cr2O3含量×飼料中氨基酸含量）〕×100。

③待測原料氨基酸的表觀消化率計算公式[6]：

待測原料氨基酸表觀消化率（%）=（試驗飼料氨基酸的表觀消化率－0.7×基礎飼料氨基酸的表觀消化率）/0.3×100。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗結(jié)果采用平均值±標準差（Mean±SE）表示，用SAS 8.01分析軟件經(jīng)單因素方差分析（ANOVA）后，若存在顯著性差異，則采用Duncan's法進行多重比較。顯著性差異的水平P值設為0.05。

2 結(jié)果

2.1 蛋白質(zhì)的表觀消化率（見表4）

表4 不同試驗飼料蛋白質(zhì)的表觀消化率（M±SE，n=3）（%）

從表4中可以看出，腸膜蛋白粉的粗蛋白表觀消化率最高，且顯著高于雞肉粉、肉骨粉、玉米蛋白粉、羽毛粉（P＜0.05），但與噴霧干燥血粉、花生粕無顯著性差異（P＞0.05）；羽毛粉的粗蛋白表觀消化率最低，且明顯低于其他各組（P＜0.05）。

不同飼料原料的粗蛋白表觀消化率大小順序為：腸膜蛋白粉（86.38%）＞花生粕（79.82%）＞噴霧干燥血粉（79.62%）＞雞肉粉（72.55%）＞肉骨粉（71.29%）＞玉米蛋白粉（63.46%）＞羽毛粉（53.04%）。

2.2 氨基酸的表觀消化率（見表5）

從表5中的數(shù)據(jù)可以看出，7種原料氨基酸表觀消化率是不一樣的，但是主要變化趨勢與對蛋白質(zhì)表觀消化率的變化基本一致。其中，14種氨基酸的平均表觀消化率最高是腸膜蛋白粉為88.81%，其次是噴霧干燥噴霧血粉為84.76%，而玉米蛋白粉和羽毛粉氨基酸的平均表觀消化率最低分別為59.46%和44.71%。

表5 凡納濱對蝦對待測原料中氨基酸的表觀消化率（%）

3 討論

本試驗的飼料配方采用“70%基礎飼料+30%待測原料[7-8]”的方法，既保證了飼料營養(yǎng)成分的均衡，適口性好，還能充分供給凡納濱對蝦正常生長所需的各種營養(yǎng)素，并且可確保消化吸收率測定的客觀性和準確性。

腸膜蛋白粉（Dried Porcine Solubles，DPS）是以豬小腸為單一來源，經(jīng)一系列蛋白酶長時間水解與特殊酶解處理，而后經(jīng)高溫滅菌和特殊條件下干燥等過程制造出來的新型動物蛋白質(zhì)原料[9]。DPS含有大量的小肽和游離氨基酸，經(jīng)小肽和游離氨基酸的形式供給蛋白質(zhì)，有利于被動物消化吸收。腸膜蛋白粉在畜禽方面研究比較多，特別是對斷奶仔豬生產(chǎn)性能方面，研究表明，在斷奶仔豬日糧中添加腸膜蛋白粉3%～6%，可提高斷奶仔豬的生產(chǎn)性能，降低其腹瀉發(fā)生率以及提高消化道酶活性[10-12]。曾禮華等（2009）[13]研究發(fā)現(xiàn)，腸膜蛋白粉和血漿蛋白粉對早期斷奶仔豬的飼喂效果均優(yōu)于魚粉，且腸膜蛋白粉對仔豬日增重的改善幅度大于噴霧干燥血漿蛋白粉（P＜0.05）；但在水產(chǎn)上應用迄今還未見報道。雖然凡納濱對蝦對腸膜蛋白粉的蛋白質(zhì)和氨基酸的表觀消化率都達到80%以上，但是腸膜蛋白粉極易吸潮，在試驗過程中發(fā)現(xiàn)，添加腸膜蛋白粉的飼料在水中的穩(wěn)定性不是太好，溶失率較大，投喂30 min后，水質(zhì)變混濁，透明度下降，這也導致水質(zhì)惡化加劇。基于本試驗結(jié)果，腸膜蛋白粉可作為凡納濱對蝦的優(yōu)質(zhì)飼料原料，但是在對蝦飼料里腸膜蛋白粉的添加量不宜過高，否則會影響對蝦的正常生長。

羽毛粉主要是角蛋白質(zhì)，具有極其穩(wěn)定堅固的空間結(jié)構(gòu)，不易被動物直接消化吸收。雖然凡納濱對蝦對羽毛粉的蛋白質(zhì)和平均氨基酸表觀消化率分別為53.04%、44.71%都顯著低于中國對蝦[5]和尼羅羅非魚[14]，但是羽毛粉中10種必需氨基酸組成極不平衡，纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸的含量分別為6.91%、7.30%、4.58%，高于其他動物性蛋白，但組氨酸、蛋氨酸、賴氨酸含量相對較低，再加上適口性差，所以很難被對蝦所利用，魚飼料中推薦量一般為3%～10%[15]。從本試驗中可以看出，凡納濱對蝦對羽毛粉氨基酸的消化率中，組氨酸的表觀消化率最高，達79.30%，但羽毛粉中所含組氨酸是很低的，僅占蛋白質(zhì)的0.71%。組氨酸是羽毛粉中的第一限制性氨基酸[16]，這可能是影響其它氨基酸消化吸收率較低的原因。羽毛粉并不是凡納濱對蝦飼料的理想蛋白源，但少量添加，并和血粉合理配伍，會有營養(yǎng)互補效果。

噴霧干燥血粉、肉骨粉和雞肉粉的蛋白質(zhì)表觀消化率都達到70%以上，其中噴霧干燥血粉的氨基酸表觀消化率高于肉骨粉和雞肉粉；而肉骨粉和雞肉粉的蛋白質(zhì)和氨基酸的表觀消化率以及對凡納濱對蝦的生長性能的影響也基本相似。在飼養(yǎng)過程中添加噴霧干燥血粉組養(yǎng)殖中后期的攝食量下降，死亡率增加，這可能是由于噴霧干燥血粉的適口性差所引起。關(guān)于噴霧干燥血粉的研究多集中在其對早期斷奶仔豬生長的影響。噴霧干燥血粉蛋白質(zhì)中氨基酸組成較為理想，比例較為平衡，賴氨酸、亮氨酸等必需氨基酸的含量較高，并且具有蛋白質(zhì)含量高、含有豐富的免疫球蛋白的特點，以及可能有某種促生長因子[17]，是凡納濱對蝦比較理想的飼料蛋白源，但是要控制好添加量，在中華鱉稚鱉飼料中添加4%左右的噴霧干燥血粉對攝食率、特定生長率無顯著影響，與花生粕、棉粕配伍，可改善飼養(yǎng)效果[18]。

試驗中花生粕和玉米蛋白粉兩種植物性蛋白源。凡納濱對蝦對花生粕的蛋白質(zhì)消化率高于肉骨粉和雞肉粉，這與中國對蝦[5]和大黃魚[7]一致。這可能是肉骨粉和雞肉粉中含有較高的類脂質(zhì)，影響了蛋白質(zhì)的消化吸收率。花生粕的各種氨基酸的表觀消化率都很均衡，并且含有較高的黃酮類化合物，這類化合物具有抗菌及抗病毒、抗氧化自由基、抗炎和保肝等作用[19]，因此，花生粕在凡納濱對蝦飼料中替代部分魚粉是可行的。但是，花生粕極易感染黃曲霉素。已有的研究表明，黃曲霉毒素可嚴重影響對蝦生長，用含黃曲霉毒素 B（14.72×10-7、7.87×10-8）的飼料喂蝦，其增重率僅為對照組的43.9%、45.4%，而且消化率、成活率均明顯降低[20]。因此，在使用花生粕時一定要注意氨基酸的平衡和花生粕的新鮮度。凡納濱對蝦對玉米蛋白粉的消化率較低，其中亮氨酸的表觀消化率最低，為17.53%，與中華絨螯蟹[21]只有23.73%相似。而玉米蛋白粉中亮氨酸的含量為3.91%，僅次于噴霧干燥血粉。因此，玉米蛋白粉不是凡納濱對蝦飼料理想的蛋白源。

4 結(jié)論

每種飼料原料蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價值都不盡相同，所以在進行凡納濱對蝦飼料配制時，應充分考慮飼料原料的營養(yǎng)價值和有效氨基酸含量，使各種飼料原料合理搭配，發(fā)揮蛋白質(zhì)的互補作用，達到有效必需氨基酸平衡，以保證凡納濱對蝦配合飼料蛋白質(zhì)具有較高的營養(yǎng)價值。

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