杜仲壯骨膠囊的薄層色譜鑒別

李玉蘭，李春花，汪 霞

（1.湖南省漣源市第二人民醫院，湖南 漣源 417124；2.湖南省漣源市人民醫院，湖南 漣源 417124；3.湖南省婁底市藥品檢驗所，湖南 婁底 417000）

杜仲壯骨膠囊由杜仲、人參、三七、淫羊藿、川芎、當歸等組方，具有益氣健脾、養肝壯腰、活血通絡、強健筋骨、祛風除濕之功效，臨床用于治療風濕痹痛、筋骨無力、屈伸不利、步履艱難、腰膝疼痛、畏寒喜溫等癥。該藥品收載于《衛生部藥品標準·中藥成方制劑（第十二冊）》，原標準中僅有化學鑒別反應及制劑通則項下檢測內容，專屬性不強，難以控制藥品質量。為保證藥品質量，確保療效，參照有關文獻[1-2]，筆者對其質量控制方法進行了研究，現將其定性鑒別方法報道如下。

1 儀器與試藥

紫外光燈（上海顧村電光儀器廠）；定量點樣毛細管（上海東名玻璃儀器有限公司）。硅膠G（青島海浪硅膠干燥劑廠）；人參對照藥材（批號為 917-9905）、三七對照藥材（批號為 120941-200405）、人參皂苷 Rb1對照品（批 號為 110704-200318）、人參皂苷 Rg1對照品（批號為110703-200424）、人參皂苷 Re對照品（批號為 110754-200421）、三七皂苷 R1對照品（批號為 110745-200312）、川芎對照藥材（批號為120918-200608）、當歸對照藥材（批號為120927-200613）、淫羊藿苷對照品（批號為110737-200413），均購自中國藥品生物制品檢定所；杜仲壯骨膠囊（甘肅岷海制藥有限責任公司，批號為080601）；所用試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 三七、人參

取樣品3.6 g，加甲醇50 mL，加熱回流提取30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水15 mL，用三氯甲烷振搖提取2次，每次10 mL，棄去三氯甲烷液，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次10 mL，合并正丁醇提取液，用1%氫氧化鈉溶液洗滌2次，每次15 mL，再用正丁醇飽和的水洗至中性，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液；取三七對照藥材1.0 g及人參對照藥材1.0 g，分別同法制成對照藥材溶液；取人參皂苷Rb1對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷Rg1對照品、三七皂苷R1對照品，加甲醇制成每1 mL各含0.5 mg的混合溶液，作為對照品溶液；另取按相同制備工藝制成的缺三七、人參的陰性樣品，再同法制成陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2005年版《中國藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗，吸取上述6種溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰，分別置日光和紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜和對照品溶液色譜相應位置上，日光下顯相同顏色的斑點，紫外光下顯相同顏色的熒光斑點，而陰性對照品溶液色譜則無此斑點（見圖1）。

2.2 當歸、川芎

取樣品4.5 g，加乙醚30 mL，加熱回流提取30 min，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作為供試品溶液；取當歸、川芎對照藥材各0.5 g，分別加乙醚25 mL同法制成對照藥材溶液；再取按相同制備工藝制成的缺當歸、川芎的陰性樣品，再同法制成陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2005年版《中國藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗，吸取上述4種溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（9 ∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照品溶液色譜則無此斑點（見圖2）。

2.3 淫羊藿

取樣品5 g，加甲醇50 mL超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10 mL使溶解，用乙酸乙酯20 mL分2次提取，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液；取淫羊藿苷對照品加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液；另取按相同制備工藝制成的缺淫羊藿的陰性樣品，再同法制成陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2005年版《中國藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗，吸取上述3種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（7∶2.5∶0.25）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鋁乙醇溶液，于105℃烘約10 min，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，而陰性對照品溶液色譜則無此斑點（見圖 3）。

3 討論

該藥品所含藥味多、成分復雜。本試驗通過層析條件如吸附劑、展開劑、顯色方法的選擇，同時反復試驗，對供試品溶液進行有效的前處理，可有效去除大部分雜質，避免了雜質成分的干擾，薄層色譜中各成分分離好，有效成分斑點清晰，方法專屬性較強，尤其是可同時鑒別三七、人參及當歸、川芎。

方法學研究表明，該法操作簡便、快速，靈敏度高，重現性好，可作為該產品的定性鑒別方法。為進一步提高、完善該藥品質量標準，確保藥品質量穩定可控，尚需開展定量測定的方法學研究工作，建立有效成分的定量測定方法。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：化學工業出版社，2005：482.

[2]劉訓紅，王玉璽，房克慧，等.中藥材薄層色譜鑒別[M].天津：天津科學技術出版社，1989：486.