乳腺癌組織中NF-κ B和HER-2的表達及意義

張 莉,顧建建

(江蘇省南通市通州人民醫院腫瘤科,江蘇南通,226300)

核轉錄因子NF-κ B是一種具有多向調節功能的轉錄因子,可調控細胞增殖,分化,凋亡及惡性轉化[1-2]。研究發現,人上皮細胞生長因子受體-2(HER-2)過表達與乳腺癌細胞中NF-κ B活化密切相關[3]。本研究采用免疫組化法檢測乳腺癌組織中NF-κ B和HER-2基因的表達,探討兩者表達狀態之間的相互關系及意義。

1 材料與方法

1.1 材料

收集我院2006年1月～2007年12月的乳腺癌存檔蠟塊40例。患者年齡27～80歲,中位年齡51歲。腫瘤直徑1 cm～8 cm,腋淋巴結陽性者17例,陰性23例。按照中國抗癌協會《常見惡性腫瘤診治規范——乳腺癌分冊》的診斷標準進行診斷和病理學分期,其中Ⅰ期5例,Ⅱ期26例,Ⅲ期9例。所有患者術前均未行化療,放療及內分泌治療。

1.2 試劑和方法

鼠抗人NF-κ B p65單克隆抗體,HER-2單克隆抗體均購自北京中杉金橋生物技術公司。采用免疫組化SP法進行染色,操作按試劑盒說明書進行,抗原修復均采用高壓熱修復,DAB顯色,蘇木精復染細胞核,二甲苯透明,中性樹膠封片。用PBS取代一抗作為陰性對照。

1.3 結果判定

每張切片選取染色良好區域,隨機觀察10個高倍視野,每個視野觀察 100個細胞。NF-κ B P65定位于胞漿,亦可見于胞核。HER-2定位于細胞膜,亦可見于胞漿。NF-κ B以細胞漿著色為準,HER-2以細胞膜著色為準,著色陽性細胞數 >10%為陽性。(圖1-2)。

圖1 NF-κ B在乳腺癌中的陽性表達 (SP法×400)

圖2 HER-2在乳腺癌中的陽性表達 (SP法×200)

1.4 統計學方法

所有數據資料均經SPSS 10.0統計軟件處理,采用檢驗,四格表確切概率法及Spearman相關分析,以P<0.05判為具有顯著性差異。

2 結 果

2.1 NF-κ B和HER-2在乳腺癌中的表達情況

乳腺癌組織中,NF-κ B和HER-2的陽性表達率分別為 65%(26/40),50%(20/20)。NF-κ B,HER-2表達與乳腺癌臨床病理特征間的關系見表1。

2.2 NF-κ B活化與HER-2蛋白間的相關性

乳腺癌組織中NF-κ B活化與HER-2蛋白表達存在明顯相關(χ2=7.033,P<0.01)。

表1 NF-κ B,HER-2表達與乳腺癌臨床病理特征間的關系 [n(%)]

3 討 論

NF-κ B是從B細胞的核抽提物中發現的一種能與免疫球蛋白κ輕鏈基因增強子的B位點結合的核蛋白因子,幾乎存在于所有類型細胞的細胞質。NF-κ B在受到適宜刺激或存在組成型表達時,在胞漿中與其抑制劑IKB分離,p65/50轉位至胞核,調控其下游基因的表達。健康人乳腺上皮細胞核提取物中NF-κ B的表達非常低,而乳腺癌細胞核提取物中NF-κ B呈顯著的高表達,提示NF-κ B的異常核內表達和乳腺癌的發生、發展和轉移密切相關。本研究發現NF-κ B在乳腺癌組織中受到激活,呈高度表達,與患者年齡,腫瘤大小,病理類型無關,但與乳腺癌發生淋巴轉移相關。隨著臨床分期的增加,NF-κ B表達陽性率有增加趨勢,但分期間差異無顯著性意義(P>0.05)。有研究表明,在雌激素或其它物質的長期刺激下,乳腺上皮細胞釋放了NF-κ B,使其由胞漿開始轉入胞核,并啟動一系列調控機制,促進乳腺導管、腺泡上皮細胞增殖,并逐漸促進細胞發生分化,向惡性轉化,直至癌變。Brantley等[4]在小鼠身上移植Iκ Bα缺失的乳腺上皮細胞,觀察發現小鼠乳腺細胞外基質明顯減少,一定程度上揭示了NF-κ B在促進乳腺癌轉移中的作用。本研究中觀察發現,NF-κ B在胞核中有一定程度的表達,這可能與乳腺癌細胞分化程度有關。HER-2基因是人類表皮生長因子受體家族的第2個成員,其編碼的蛋白是一種跨膜糖蛋白,具有酪氨酸激酶活性。HER-2基因主要在胚胎發育時表達,而在乳腺癌、卵巢癌等多種腫瘤中存在異常表達,并且可以通過多條信號傳導通路發揮促進腫瘤增殖、侵襲、轉移及腫瘤血管生成作用。本研究結果顯示,乳腺癌中HER-2的陽性表達率為50%,且在伴有淋巴結轉移的病例中表達存在差異,這與臨床見到的HER-2陽性的病人易早期復發且生存期較短的現象一致,證實HER-2與乳腺癌浸潤、轉移等惡性生物學行為有關。本研究中,盡管臨床分期越高,HER-2陽性表達率越高,但不同分期的腫瘤組織中表達沒有差異,這可能與研究所取的樣本例數不大有關,有待于行大樣本進行深入研究。

本研究顯示,乳腺癌中 NF-κ B與 HER-2具有不同程度的表達,且兩者的表達具有相關性,與目前文獻報道一致[5],從而證實NF-κ B可激活HER-2基因的表達,在乳腺癌的發生和發展過程中發揮了重要作用。

[1]Nagai S,Washiyama K,Kurimoto M,et al.Aberrant nuclear factorκ appa B activity and is paticipation in the growth of human maligant astrocytoma[J].Neurosurg,2002,96(5):909.

[2]Hayden M S,Ghosh S.Signaling to NF-κ B[J].Genes Dev,2004,18(18):2195.

[3]Makino K,Day C P,Wang S C,et al.Upregulation of IKKa/IKKb by integrin-linked kinase is required for HER2/neuinduced NF-kB antiapoptoticpathway[J].Oncogene,2004,23(21):3883.

[4]Brantley D M,Chen C L,Muraoka R S,et al.Nuclearfactor-κ appaB(NF-κ appaB)regulates proliferation and branching in mouse mammary epithelium[J].Mol Biol Cell,2001,12:1445.

[5]Biswas D K,Shi Q,Baily S,et al.NF-κ B activation in human breast cancer specimens and its role in cell proliferation and apoptosis[J].PNAS,2004,101(27):10137.