原 皓,李時光,崔慎茹
(濰坊醫學院臨床學院,山東濰坊261031)
潰瘍性結腸炎(UC)是一種主要累及直腸、結腸黏膜的慢性非特異性炎癥,目前其確切發病機制仍不清楚且無特異性根治措施。甘草酸二銨(DG)是甘草活性成分甘草次酸的左旋構型,具有與皮質類固醇類似的非特異性抗炎作用[1,2]。單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)是趨化因子CC類亞家族成員之一,可促進多種細胞因子和炎癥介質分泌。2009年7月,我們觀察了DG對UC大鼠結腸炎癥及結腸組織MCP-1表達的影響,旨在進一步探討其抗炎機制。
1.1 材料 雌性SD大鼠30只,體質量(230±10)g,4~5周齡,由山東中醫藥大學實驗動物中心提供;2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS),RT-PCR 檢測試劑盒,DG (商品名甘利欣,水針劑,批號H10940190)。
1.2 動物分組及處理 將30只雌性SD大鼠適應性喂養1周后隨機分為觀察組、模型組和對照組各10只,均禁食、不禁水 24 h,10%水合氯醛 4.5 ml/kg腹腔注射麻醉,觀察組、模型組參照文獻方法[3]制作UC模型:大鼠取頭低尾高體位,將聚乙烯導管經肛門緩慢插入結腸8 cm并經其注入TNBS(與無水乙醇以1∶1混勻)50~60 mg/kg,倒提大鼠30 s后使其平躺,自然清醒、常規飼養。其后觀察組和模型組于造模第1~10天分別腹腔注射DG 40 mg/(kg·d)及生理鹽水2 ml;對照組操作同模型組,但以生理鹽水代替TNBS。造模第10天時處死動物,取距肛門約8 cm處結腸,沿腸系膜縱軸剪開,冷生理鹽水沖洗干凈,濾紙吸干稱重,將結腸沿長徑切成相等兩份,一份以4%多聚甲醛固定,每段結腸自距肛門1、3 cm處取2塊組織標本,另于炎癥嚴重或潰瘍處取1塊組織標本,石蠟包埋、切片(厚4 μm),HE染色觀察組織學改變;另一部分稱重后置-80℃冰箱備用。……