STAT4基因多態性與類風濕關節炎病情活動的關系

龐紅梅,崔劉福,陳 紅,賈育紅,楊文浩

(1唐山市工人醫院分院,河北唐山 063000；2華北煤炭醫學院附屬開灤醫院；3唐山市工人醫院)

類風濕關節炎(RA)是以慢性進行性關節病變為主的全身性自身免疫性疾病,在世界范圍內成年人 RA患病率約 1%,我國為 0.26%～0.50%。目前,對 RA的病因不十分清楚,其可能相關因素包括遺傳、細菌與病毒感染、免疫、環境及激素等[1]。一項對北美白色人種的研究證明[2],定位于染色體 2q的 STAT4單倍型與 RA和系統性紅斑狼瘡相關,且其結果在韓國、日本及歐洲 3國 RA人群中得到證實。這些證據表明,STAT4基因多態性在不同種族人群 RA發病中均有明顯作用。為探討 RA病情活動度及疾病嚴重度與 STAT4rs7574865基因多態性的關系,我們進行了相關研究。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇 2008年 4月 ～2009年 10月在華北煤炭醫學院附屬開灤醫院確診 RA患者 139例 ,男 39例 、女 100例,年齡 21 ～82歲 ,平均 51.96歲,病程 6個月 ～20 a、平均 6.12 a,均為唐山地區漢族人群,符合 1987年美國風濕病協會制定的 RA診斷標準[3]。排除其他結締組織病、感染性疾病或惡性腫瘤等患者。

1.2 方法

1.2.1 STAT4rs7574865基因多態性檢測 以酚—氯仿法提取患者外周血基因組 DNA,用 PCR擴增目的基因片段在 LDR儀下行 PCR產物連接酶檢測,對LDR產物進行測序分析,用 Genemapper軟件對單核苷酸多態性位點基因型行數據分析和基因分型。

1.2.2 實驗室檢查 采集患者空腹靜脈血,用魏氏法檢測血沉(ESR),男 ＞15 mm/h、女 ＞20 mm/h為陽性。

1.2.3 DAS28評分 參照文獻[4]方法計算 DAS28評分。28個關節包括雙手近指關節、雙手掌指關節、雙腕關節、雙肘關節、雙肩關節、雙膝關節。DAS28評分 ＜2.6分示疾病緩解；2.6～3.2分示活動度低度；3.3～5.1分示活動度中度；＞5.1分示活動度高度。

1.2.4 雙手/雙腕關節 X線分期 依據美國風濕病協會標準分期:Ⅰ期:關節正常或關節面下骨質疏松。Ⅱ期:關節面下骨質疏松,關節周圍軟組織腫脹,關節間隙正常或輕微關節面骨質侵蝕或破壞；無關節畸形。Ⅲ期:明顯的關節面下骨質侵蝕和破壞,關節間隙狹窄或消失；無纖維性或骨性強直、關節半脫位畸形。Ⅳ期:除Ⅱ、Ⅲ期表現外,合并關節纖維性或骨性強直。

1.3 統計學方法 采用 SPSS13.0統計軟件,計量資料用±s表示,組間比較用t檢驗,計數資料用百分率表示。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 STAT4rs7574865基因多態性 本組 STAT4rs-7574865基因型分布頻率為 40.3%,T/G、TT基因型頻率分別為 46.0%、13.7%,T等位基因頻率為36.7%。

2.2 ESR與是否攜帶 T等位基因的關系 本組ESR正常36例,攜帶與不攜帶 T等位基因者分別為19、17例；ESR升高 103例,分別為 64、39例；是否攜帶T等位基因與ESR水平無相關性(P=0.324)。

2.3 DAS28評分與是否攜帶 T等位基因的關系本組 DAS28評分 2.3～8.0分,疾病緩解、活動度低度、活動度中度、活動度重度者分別為 2、2、33、102例。患者是否攜帶 T等位基因與 DAS28評分無相關性(P=0.759)。

2.4 雙手/雙腕關節 X線分期與是否攜帶 T等位基因的關系 本組雙手/雙腕關節 X線分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期者分別為 37、37、27、38例。患者是否攜帶T等位基因與 X線分期無相關性(P=0.366)。

2.5 STAT4rs7574865基因多態性與 RA患者性別、年齡、病程的關系 見表1。

表1 STAT 4rs7574865基因多態性與RA患者性別、年齡、病程的關系

3 討論

RA的基本病理特征是滑膜血管增生、炎性細胞浸潤、血管翼形成,導致滑膜、軟骨乃至軟骨下骨組織破壞。RA可累及心、肺、腎、動脈、神經及眼等臟器組織,其病變呈持續性、反復發作過程,致殘率明顯,可縮短患者的預期壽命。目前認為,RA可能是攜帶 RA易感基因者被某種病原體感染后引起的機體免疫系統功能紊亂。

STAT4編碼一種存在于多種重要細胞因子通路上的轉錄蛋白,在 IL-12介導的 T細胞向 Th1細胞分化中發揮主要作用,并參與 Th17分泌 IL-17。因此,STAT4在調節 Th1、Th17細胞應答中發揮重要作用。因兩個譜系在 RA發病中均起主要作用,故有學者[5]推測 STAT4可能通過不完全信號傳導在RA中發揮作用。國外研究證實,STAT4基因多態性在亞洲及歐洲人群中均與 RA發病相關。本研究也證明,STAT4rs7574865T等位基因與 RA發病相關,與國外研究一致。

RA發生于任何年齡,以育齡女性多發,更年期發病率明顯高于同齡男性及老年女性。本研究發現,STAT4rs7574865位點各基因型與 RA患者的性別、年齡及病程無相關性,與國外研究一致。ESR是操作簡便、重復性好的急性時相反應指標,RA加重時 ESR增快,緩解時恢復正常。本研究顯示 RA患者是否攜帶 T等位基因與 ESR無相關性。

DAS28評分是評價 RA疾病活動程度的指標,已廣泛用于臨床對 RA疾病活動及藥物療效的評價。因臨床較易獲得 DAS28評分要求的各項信息,故許多研究認為,DAS28評分是一種可靠、客觀評價 RA疾病活動的指標。研究表明,較低的 DAS28評分是 RA患者長期疾病緩解的重要預示因子。RA的病理學改變是 X線特征性表現的基礎,其骨關節病變可侵犯四肢關節,以手和足的小關節,腕、肘、膝、踝關節多見,且病變呈對稱性分布。本研究發現,是否攜帶 T等位基因與 RA患者雙手/雙腕 X線分期及 DAS28評分均無相關性。

雖然本研究未發現 STAT4基因多態性與RA活動有關,但發現攜帶危險基因者 ESR升高的比例高于正常(作用不顯著)。因此,對 STAT4基因多態性與 RA臨床及預后的相關性,以及基因單倍型檢驗與細胞因子間的相關性,有待于進一步研究。

[1]Firestein GS.Evolving conceptsof rheumatoid arthritis[J].Nature,2003,423(6937):356-361.

[2]Remmers EF,Plenge RM,Lee AT,et al.STAT4 and risk of rheumatoid arthritis and systemic lupus erythe-matosus[J].N Engl J Med,2007,357(10):977-986.

[3]Arnett FC,Edworthy SM,Bloch DA,et al.The american rheumatism association 1987revised criteria for the classification of rheumatoid arthritis[J].Arthritis Rheum,1988,31(3):315-324.

[4]Prevoo ML,vant Hof MA,Kuper HH,et al.Modified disease activity scores that include twenty-eight-joint counts,development and vali-dation in a prospective longitudinal study of patients with rheumatoid arthritis[J].Arthritis Rheum,1995,38(1):315-324.

[5]Walker JG,Smith MD.The Jak-STAT pathway in rheumatoid arthritis[J].Rheumatol,2005,32(9):1650-1653.