董春林,暢志堅,張曉軍,閻曉濤
(山西省農業科學院作物遺傳研究所,山西太原030031)
DH系為單倍體植株經自然或人工加倍處理而產生的加倍單倍體(doubled haploid)群體。應用花藥培養技術可快速獲得基因位點純合的DH系,這種DH系不僅可獲得常規育種難以或無法得到的新類型,加快育種進程,更廣泛用于基因圖譜構建、分子標記等遺傳學研究[1],而且較通常的F2和回交(BC)等群體具有多方面的優越性。目前,水稻、大麥、玉米、煙草等作物都構建了DH群體,并得到了廣泛應用。但是由于DH群體較難獲得,目前在國內利用DH群體研究小麥數量性狀的遺傳規律的相關報道還較少[2]。
本試驗以早熟品種遼春10號和晚熟品系CH275為親本進行雜交,對其F1花藥進行離體培養并獲得DH系,并對這個早熟DH群體的性狀表現進行調查與分析,旨在為以后進行數量性狀的遺傳分析和QTL定位及小麥單倍體育種選擇奠定材料基礎。
供試材料為早熟品種遼春10號和晚熟品系CH275。其中,遼春10號是由遼寧省農業科學院選育的強筋小麥新品種;CH275為優質高產晚熟品系,來源于山西省農業科學院作物遺傳研究所。
1.2.1 DH群體的構建 取處于單核中、晚期的F1(遼春10號×CH275)植株幼穗,在無菌操作室內,用70%酒精對穗子進行表面消毒10 s。在超凈工作臺上取二核早期花藥,接種于培養基表面,置于無菌培養室內進行脫分化避光暗培養,培養溫度為28~30℃[3]。
所用培養基為C17和癸培養基(表1),附加2mg/L 2,4-D和0.5mg/LKT。約20 d后陸續長出愈傷組織。

表1 培養基配方 mg/L……p>