益氣化痰祛瘀方對冠心病大鼠的保護作用*

河北醫科大學中醫學院 （石家莊 050091）

李 昌 胡巍巍△ 高 瑋 韓 雪 趙淑明 陳小玉△△ 張一昕

益氣化痰祛瘀方為治療冠心病 （CHD）的效方,經多年臨床應用療效顯著,為研究其藥理作用機制,筆者通過觀察冠心病大鼠心電圖和血清 TC、TG的含量以及心肌和主動脈組織形態學的改變,對該方進行了藥效學研究。

1 材料與方法

1.1 動物 健康雄性 SD大鼠 60只,體重 160～180 g,河北醫科大學動物實驗中心提供,動物合格證號:810054。

1.2 藥物及試劑 益氣化痰祛瘀方的組成與制備:益氣化痰祛瘀方由黃芪、桂枝、瓜蔞、薤白、半夏、川芎、赤芍、三七組成,實驗時在河北醫科大學中醫學院中藥制劑室水提濃縮成相應濃度;復方丹參滴丸,天津天士力制藥股份有限公司出品,實驗時用蒸餾水配置成所需濃度的混懸液;垂體后葉素注射液,南京新百藥業有限公司生產;膽固醇,天津市博迪化工有限公司生產;膽酸鈉,北京奧博星生物技術有限責任公司生產;丙硫氧嘧啶,上海朝暉藥業有限公司生產;總膽固醇 （TC）試劑盒和甘油三酯 （TG）試劑盒均購自保定長城臨床試劑有限公司。

1.3 主要儀器 泰盟科技 BL-420E+生物機能實驗系統、半自動生化分析儀、MSE-25型高速冷凍離心機、PM-10AD光學顯微鏡、Nikon尼康光鏡顯微照相機、LEICA RM2125石蠟切片機。

1.4 動物分組與造模 60只健康雄性 SD大鼠自由飲水進食,飼養于 18℃～22℃明暗各 12 h的清潔級動物實驗室內,正常喂養 1周后,按體重分層隨機分為 5組,每組 12只,即:正常對照組（簡稱正常組）、模型對照組 （簡稱模型組）、益氣化痰祛瘀方高劑量組 （簡稱高劑量組）、益氣化痰祛瘀方低劑量組 （簡稱低劑量組）、復方丹參滴丸對照組 （簡稱對照組）。動物造模參考文獻[1-2],除正常組外,其它各組每天均給予高脂飼料,于末次灌胃給藥前 72 h,灌胃給藥 30min后,腹腔注射垂體后葉素 30 u/kg,連續 3次,每次間隔 24 h,形成冠心病心肌缺血模型。正常組相應注射等容量的生理鹽水。

1.5 高脂飼料配方 2%膽固醇、10%豬油、0.2%丙基硫氧嘧啶、0.5%膽酸鈉、87.3%基礎飼料,由河北醫科大學實驗動物中心加工。

1.6 給藥方法及標本處理 大鼠造模的同時,各組分別給予相應的藥物灌胃,給藥劑量按藥理實驗方法學計算,益氣化痰祛瘀方高、低劑量組分別按 （含生藥量）22.28 g/kg、11.14 g/kg體重的標準灌服,對照組按 0.17 g/kg體重的標準灌服,正常組和模型組灌服相應劑量的蒸餾水。各組 1次/d灌胃,每次用藥體積均按 1mL/100 g計算。實驗 6周末,最后 1次給藥禁食 12 h麻醉狀態下取血,分離血清。取血后迅速開胸剖取心臟和主動脈,在心尖部取適量的左心室心肌組織,將心肌組織和主動脈用預冷 0.9%氯化鈉注射液沖洗,濾紙吸濕后,放入 4%多聚甲醛液中固定。

1.7 檢測指標及方法

1.7.1 心電圖的檢測:于造模前和第 3次腹腔注射垂體后葉素 24 h后,以 20%烏拉坦 4 mL/kg腹腔注射,待動物麻醉后連接泰盟科技 BL-420E+生物機能實驗系統,將其針狀電極分別插入大鼠左前肢和雙后肢皮下,記錄Ⅱ導聯心電圖 ST段第 15min變化 （抬高或降低）的幅度 （mv）。

1.7.2 血清 TC、TG的測定:采用酶法,嚴格按照試劑盒說明書進行檢測。

1.7.3 心肌和主動脈組織形態學的觀察:將固定的心肌和主動脈組織常規石蠟包埋、切片、HE染色,光鏡下觀察其組織形態改變。

2 結果

2.1 益氣化痰祛瘀方對冠心病大鼠心電圖 ST段的影響 由表 1可見,模型組大鼠心電圖 ST段的變化值明顯高于正常組 （P＜0.01）;給藥后,各用藥組大鼠心電圖 ST段的變化值均明顯低于模型組 （P＜0.01）;各治療組之間比較差異無顯著性（P＞0.05）。詳見表 1。

表1 各組大鼠血清TG、TC的含量以及心電圖 ST變化值的比較 （±s）

表1 各組大鼠血清TG、TC的含量以及心電圖 ST變化值的比較 （±s）

注:與模型組比較,*P＜0.01;與對照組比較,△P＜0.01

組別 n TC（mmol/L）TG（mmol/L）ST段變化值 （mv）正 常 組 12 1.68±0.21* 0.53±0.06* 0.14±0.05*模 型 組 12 3.30±0.42 1.14±0.11 0.28±0.04對 照 組 12 2.39±0.34* 0.82±0.10* 0.20±0.04*高劑量組 12 1.77±0.14*△ 0.57±0.08*△ 0.19±0.03*低劑量組 12 1.80±0.18*△ 0.84±0.11* 0.20±0.05*

2.2 益氣化痰祛瘀方對冠心病大鼠血清 TC和TG含量的影響 由表 1可見,模型組大鼠血清TC和 TG的含量較正常組明顯升高 （P＜0.01）;各用藥組均能明顯降低大鼠血清 TC、TG含量 （P＜0.01）;高、低劑量組大鼠血清 TC含量低于對照組 （P＜0.01）,而高、低劑量組之間差異無顯著性 （P＞0.05）;高劑量組大鼠血清 TG含量低于低劑量組和對照組 （P＜0.01）,而低劑量組和對照組之間差異無顯著性 （P＞0.05）。

2.3 心肌和主動脈形態學改變

2.3.1 心肌組織:正常組大鼠心肌細胞排列整齊,胞漿著色均勻,細胞核呈長橢圓形,位于心肌纖維中央,心肌纖維呈束狀分布,排列有序,無炎性細胞浸潤等。模型組大鼠心肌細胞肥大、排列紊亂,胞漿著色不均勻,細胞核腫脹變形,出現炎性細胞浸潤,心肌細胞間隙增寬、結締組織增多,心肌纖維排列不齊,部分心肌纖維萎縮或變性,局部可見空泡樣改變。各治療組大鼠心肌組織均有不同程度的改善,其中高劑量組心肌細胞排列較整齊,細胞核改變較小,心肌纖維結構比較完整,僅見部分心肌細胞間隙增寬;對照組和低劑量組有不同程度的心肌細胞間隙增寬、結締組織增生和心肌纖維萎縮。

2.3.2 主動脈組織:正常組大鼠主動脈內皮細胞完整,主動脈壁內膜光滑無增生,未見炎性細胞浸潤。模型組大鼠主動脈壁內膜粗糙、增厚,有纖維組織增生,主動脈內皮細胞腫脹,出現炎性細胞浸潤。各治療組主動脈組織病理損傷均有改善,其中高劑量組僅見主動脈壁內膜粗糙;對照組和低劑量組可見主動脈壁內膜粗糙、增厚、纖維組織輕度增生。

3 討論

3.1 益氣化痰祛瘀方的組方依據 冠心病在中醫學中無獨立的病名,根據其病因、病機及臨床表現,屬于中醫學 “胸痹”、 “心痛”范疇。其發病主要是由于高年體虛,或中年過勞,損傷正氣,臟腑功能損傷,陰陽氣血失調,加上七情內傷、飲食不節、寒冷刺激、勞逸失度等因素的影響,導致氣滯血瘀,胸陽不振,痰濁內生,痰瘀痹阻于心脈而致病。而且本病的發展是一個 “本虛標實”、“虛實夾雜”的動態的復雜過程。本虛是指氣、血、陰、陽的虧損或不足,標實是指 “陰寒、痰濁、血瘀”而言,特別是以陽氣不足,痰瘀互結最為常見。因此,我們精選益氣溫陽,化瘀祛痰中藥組成益氣化痰祛瘀方,經臨床運用療效顯著。方中選用黃芪、桂枝益氣溫陽,瓜蔞、薤白、半夏化痰寬胸,通陽散結;川芎、三七、赤芍活血化瘀,行氣止痛,諸藥合用共奏益氣溫陽,化痰祛瘀,通脈止痛之功。

3.2 益氣化痰祛瘀方具有良好的治療冠心病作用 現代醫學認為:冠心病發病的根本原因是冠狀動脈粥樣硬化導致血供不能滿足心肌做工和代謝的需要,引起心肌缺血缺氧產生一系列病理生理變化。[3]動脈粥樣硬化的確切病因目前尚不清楚,但與血脂異常、吸煙、年齡、性別等危險因素密切相關。尤其是脂質代謝紊亂和血黏度異常是冠心病發病的重要因素。[4]由于脂質代謝紊亂,或同時有其他危險因素存在,導致動脈內膜發生某種損傷性變化,使脂質易于通過動脈內膜,進入內膜下間隙并沉積。進一步發展是血管平滑肌受到脂質增高的影響而發生增殖,動脈壁變厚,脂質沉積,形成纖維斑塊,進而導致管腔,引起供血減少,致冠心病心肌缺血的發生。

本實驗結合文獻采用喂飼高脂飼料和腹腔注射垂體后葉素的方法復制冠心病心肌缺血大鼠模型,實驗 6周后顯示:模型組大鼠大鼠血清膽固醇、甘油三脂明顯升高;主動脈壁內膜粗糙、增厚,有纖維組織增生,管腔狹窄;心肌細胞肥大、排列紊亂,細胞核腫脹變形,炎性細胞浸潤,心肌纖維排列不齊;心電圖 ST段異常改變,表明造模成功。

T波改變是心肌缺血的表現,ST段移位是冠脈供血障礙心肌損傷的表現,較心肌缺血時更為嚴重。本實驗結果顯示:益氣化痰祛瘀方可以糾正實驗大鼠心電圖 ST段的異常改變,降低血清 TG、TC含量,改善心肌和主動脈組織的病理損害,其總體療效優于對照藥——復方丹參滴丸?？梢酝茰y益氣化痰祛瘀方抗冠心病的作用機制與其調節脂質代謝,改善心肌缺血,減輕心肌和主動脈組織的損傷有關。但其深入的作用機理有待進一步研究探討。

[1] 張明雪,常艷鵬,曹洪欣 .溫陽活血中藥復方調控冠心病（心）陽虛血瘀證大鼠血小板內受體、信號轉導的作用機制研究 [J■.中華中醫藥雜志,2008,23（6）:494-497

[2] 李儀奎.中藥藥理實驗方法學 [M].2版.上海:上?？茖W技術出版社,2006.422-425

[3] 邵念方,駱豐,許榮廷.冠心病中西醫綜合治療 [M].北京:人民衛生出版社,2004.11-13

[4] 劉耀平,蓋貴堂,盧海麗,等.冠心通痹煎劑治療胸痹的臨床應用研究 [J].河北中醫藥學報,2007,22（1）:23-25

（2010-01-05 收稿）