耳腦膠粘合修復大鼠面神經損傷的實驗研究

蘇娟娟,關 鍵,王心,張國梁,朱麗萍

(1.佳木斯大學附屬口腔醫院頜外一科,黑龍江 佳木斯 154002;2.哈爾濱市第一醫院口腔科,黑龍江 哈爾濱 150010)

面神經的損傷導致面部表情肌癱瘓,對患者來說影響極大。應用顯微外膜縫合法修復面神經是目前臨床上常用的方法,可是由于縫線存在異物反應,常規顯微修復會進一步損傷神經軸突,引起軸突組織錯向生長,影響神經修復的效果[1]。本實驗是以現在常用的外膜縫合法為對照,研究耳腦膠粘合大鼠面神經的應用效果。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組

健康雄性 Wistar大鼠 20只,體重260g～ 300g,隨機分為兩組,即耳腦膠粘合組(實驗組)和外膜縫合組(對照組),每組10只,采用左側面神經為修復模型進行實驗。

1.2 實驗材料

1.2.1 耳腦膠 (廣州白云醫用膠有限公司)。本品在凝血酶和纖維蛋白原的共同作用下,可有效止血、封閉創面、硬組織粘合和堵塞血管。在體內應用時,固化膜可降解成水溶性的聚氰基丙烯酸及甲酸等,隨尿液排除體外,時間約一個月。

1.2.2 縫合線采用國產10-0尼龍線(上海元洪醫療器械有限公司生產)。

1.3 手術方法

采用100g/L水合氯醛0.3/kg腹腔注射進行全身麻醉。麻醉成功后左側臥位于動物手術臺上,將大鼠左側面頰部備皮,脫毛,碘伏消毒,鋪無菌巾,手術顯微鏡下,做左側面頰部斜行切口,長約1.5cm,切開 ,分離顯露面神經,找到面神經頰支,分開腮腺咬肌筋膜,將面神經頰支解剖出來,距頸乳孔1cm處將面神經頰支切斷;外膜縫合組,用10-0尼龍線吻合神經外膜,4點、8點、12點方向各一針;耳腦膠粘合組,根據神經外膜血管的走向,將面神經頰支的兩斷端盡量對齊,耳腦膠滴于吻合端,30秒左右耳腦膠凝固,即可見粘合對位佳;將所有動物左側面神經頰支吻合好埋入頰肌,縫合切口,碘伏再次消毒。

1.4 檢測指標

1.4.1 大體及手術顯微鏡下觀察

在術后8周取材時,肉眼及在手術顯微鏡下觀察大鼠左側面神經的恢復情況。

1.4.2 神經電生理檢查

術后8周各組取8只大鼠再次進行腹腔麻醉,顯露左側面神經,用丹麥產 KEYPON T高速肌電誘發電位系統,檢測神經肌肉動作電位,測定其潛伏期和波幅值。信號經電腦分析程序處理。

1.4.3 組織學觀察

術后8周各組取8只電生理檢測結束后,于神經吻合口處取材,用3/0尼龍線縛住神經兩端,固定在小木板上,置于10%福爾馬林溶液內固定,做縱切片進行組織學觀察。每組其余2只大鼠迅速取吻合口處面神經,即投入3%的戊二醛中固定2h,然后從吻合口處切取1mm3小塊,用1%鋨酸固定,用于半薄切片亞甲藍-復紅染色和超薄切片透射電鏡觀察,病理切片計算機圖像分析,計算再生軸突數量、神經纖維直徑及髓鞘厚度。

1.5 統計學處理

2 結果

2.1 大體及手術顯微鏡下觀察

術后8周時,外膜縫合組神經吻合處有大量的瘢痕,與周圍組織界限不清;耳腦膠粘合組神經清晰可見,吻合口處瘢痕很小,可見神經生長良好,且未見神經瘤形成。

2.2 神經電生理檢查

耳腦膠粘合組神經潛伏期值小,波幅值大;而外膜縫合組神經潛伏期值大,波幅值小。

2.3 組織學觀察

術后8周,縱向切片見耳腦膠粘合組扭曲較輕,瘢痕形成較少;外膜縫合組扭曲較明顯,呈盤旋狀 ,瘢痕形成較多。

在透射電鏡下觀察,術后8周時耳腦膠粘合組再生神經中髓鞘結構好,厚度基本接近正常,板層結構清晰,軸突內神經絲和微管及線粒體結構重現,部分髓鞘呈灶性崩解;外膜縫合組再生神經纖維中有髓神經纖維分布較疏散,髓鞘厚薄不一致,軸突內神經微絲、微管結構模糊,神經絲密集,有空泡樣變性。

表1 粘合組與縫合組面神經電生理及其他檢測指標(±s,n=8)

表1 粘合組與縫合組面神經電生理及其他檢測指標(±s,n=8)

組 別 潛伏期(ms) 波幅(mv) 髓鞘厚度(nm) 軸突直徑(nm) 有髓纖維數(個)粘合組 1.87± 0.29 1.02± 0.32 741.11± 192.44 3036.67± 647.54 443± 139.14縫合組 2.07± 0.12 0.82± 0.17 444.70± 96.27 3178.25± 611.07 279± 53.61 P＞0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05

3 討論

神經斷端獲得正確的軸向對位是神經修復的關鍵,目前臨床上常采用顯微外科技術進行神經外膜縫合。神經外膜縫合能使神經端端吻合,缺點是通過手術,神經纖維不能達到解剖復位,即精確對合,且會發生錯誤生長,如雖為神經纖維對合,但感覺神經長到運動神經中,外膜縫合后,雖無張力,但在神經中心區仍有空隙[2]。由醫用耳腦膠組成的快速醫用粘合劑,組織相容性好,適應于人體組織,具有粘合強度大,快速完成止血、粘合,在體內可快速固化、分解、排泄等特點。有人[3]將其歸類于軟組織醫用膠,可用于不同部位組織的粘合,已用于普外科和婦產科的一些手術,但用于神經外科手術的報道較少,用于面神經的損傷修復少見報道。

我們在實驗中在解剖顯微鏡下,根據神經外膜血管的走向,盡量將離斷的面神經準確對位,然后用耳腦膠滴到對合神經斷端處粘合,這種方法操作較簡便,且耳腦膠在凝固后可在神經對合處形成一個凝膠環,可起到再生室的作用,即便粘合過程中有少量的凝膠深入吻合端,也不會影響神經的生長[4]。用膠粘合修復面神經損傷有以下優點:①可以避免由縫線引起的組織反應。②操作相對簡便,易于掌握,縮短了手術時間,不需要特殊設備,術中不會損傷神經的內部結構,吻合的神經對位理想。③在某些特定部位的神經修復,如有骨性管道阻擋及一些難以顯露的手術區域,應用膠粘合非常方便[5]。

本實驗研究結果顯示,耳腦膠粘合組和顯微縫合組在神經吻合部位近端電刺激后口輪匝肌處神經動作電位潛伏期和波幅的差異無統計學意義 (P＞ 0.05),這說明應用耳腦膠粘合在神經功能上的恢復可以達到和神經外膜縫合相同的效果,且在大體觀察和手術顯微鏡下觀察,面神經吻合口處形成的瘢痕組織很小,且沒有神經瘤形成,神經恢復效果較好,從長遠看來可加速神經的恢復,留下的后遺癥應該很小。進一步的組織學觀察和電鏡觀察結果顯示,耳腦膠粘合組再生的神經纖維排列整齊,髓鞘結構較好,板層結構清晰,神經纖維較外膜縫合組生長好,可見應用耳腦膠粘合修復神經的效果較好。統計學分析顯示,兩組的軸突直徑相比較,沒有統計學意義;但髓鞘厚度和有髓纖維數有統計學意義,說明應用耳腦膠粘合可以使神經恢復的更好,對于神經恢復遠期效果好。這可能是由于耳腦膠既達到了使神經相結合的目的,發揮了再生室的作用,且沒有縫線形成異物反應,使神經組織生長良好。

綜上所述,我們可以看出應用耳腦膠修復面神經的損傷,具有一定的優勢,能及時有效的連接上離斷的神經 ,使神經可再生并很好的恢復;且有效的防止了形成神經瘤,使營養因子聚集,促進神經再生。

[1]Berger A,Shen Z,H ierner R.Peripheral nerve surgery:Current achieve-ments and future directions[J].Chin J H and Surg,2000,16:11-12

[2]何秦,蔣電明.周圍神經端端吻合方法的研究進展 [J].重慶醫學,2007,5:975-977

[3]閻漢榮.醫用膠的臨床應用 [M].北京:中國科學技術出版社,1992,4-15

[4]Narakas A.The use of fibrin glue in repair of peripheral nerves[J].Orthopedic Clinics North America,1988,19:187

[5]李宏生,李光昭等.纖維蛋白膠粘合修復周圍神經缺損的實驗研究 [J].中華微創外科雜志,2003,2:82-84