金絲桃苷對荷瘤小鼠腫瘤抑制作用研究

王麗敏,王躍新,朱秋雙,楊 玉,白 雪,劉明遠

(佳木斯大學基礎醫學院,黑龍江 佳木斯 154007)

貫葉金絲桃為藤黃科金絲桃屬多年生草本植物,具有清熱解毒、抗抑郁、抗病毒等功效[1]。金絲桃苷(Hyperin,Hyp)屬黃酮醇苷化合物,是金絲桃屬植物的特征性成分之一[2]。金絲桃苷毒性小,具有鎮痛、抗炎、止咳、抗氧化、保護心血管系統等多種藥理學活性[3,4]。我們在前期的實驗中發現金絲桃苷在體外可以顯著抑制多種腫瘤細胞的增殖,但目前尚無金絲桃苷對動物移植性腫瘤抑制作用的報道。本文通過小鼠移植性腫瘤模型的整體實驗,觀察金絲桃苷對其腫瘤生長抑制作用,為金絲桃苷用于腫瘤的臨床治療提供實驗依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

結腸癌細胞株 HCT8、肉瘤 S180由哈爾濱醫科大學腫瘤醫院提供,由本研究室定期腹腔接種傳代保種。雌性昆明種小鼠(合格證號:黑動字第99101001號 ),體重 18～ 22g,由佳木斯大學實驗動物中心提供。金絲桃苷購自北京生物制品研究所。

1.2 方法

1.2.1 接種 HCT8結腸癌細胞及 S180肉瘤細胞

將預先接種 HCT8、S180腹水瘤的小鼠處死,從腹腔抽出的瘤液,用生理鹽水按 1∶3比例稀釋成 5× 106個癌細胞/mL懸液,每只小鼠右側腋窩皮下接種0.2mL。以上操作在無菌條件下進行。

1.2.2 分組及給藥

接種后隨機分組,每組10只。其中金絲桃苷設三個劑量組 (1.5、3.0、 6.0 mg/kg,ip給藥 ),陽性組 (順鉑 3.0mg/kg,ip給藥),陰性對照組給予滅菌生理鹽水(ip給藥 )。接種24 h后給藥,每日1次,記錄各組小鼠生長情況并稱重,連續 8d。

1.2.3 指標測定

實驗組于末次給藥次日,處死小鼠,剝離瘤塊稱其重量。并計算抑瘤率。

抑瘤率= (對照組瘤質量-給藥組瘤質量)/對照組瘤質量×100%

1.2.4 數據處理

所有數據以平均值±標準差表示,采用雙側 T檢驗進行組間分析。以P＜0.05作為顯著性檢驗標準。

2 結果

2.1 不同處理對荷瘤小鼠外形變化影響

與正常對照組相比,荷瘤對照組小鼠的瘤塊明顯增大,質地較軟且界限模糊,難以剝離,有的還擴散至胸骨、鎖骨等處.金絲桃苷不同劑量組和順鉑組小鼠的瘤塊較小,界限清晰,質地較硬,容易剝離;金絲桃苷不同劑量組對小鼠的外形基本無影響,其毛發、活動及體重基本正常;順鉑組小鼠毛發蓬松零亂、行動遲緩,體重增加緩慢,部分小鼠體重有微量減輕。

2.2 金絲桃苷對 S180荷瘤鼠的抑瘤作用

金絲桃苷對 S180荷瘤鼠具有很好的抑瘤效果,金絲桃苷各劑量組的平均瘤質量與生理鹽水組相比差異顯著(P＜0.01),并且抑瘤效果有良好的劑量依賴性,其中金絲桃苷6.0mg/kg組的抑瘤率最高,達到62.93% (見表1)。

2.3 金絲桃苷對 HCT8異種移植瘤小鼠的抑瘤作用結果

金絲桃苷對 HCT8異種移植瘤小鼠表現出明顯的抑瘤作用,可使其瘤重明顯減輕,與生理鹽水組相比差異顯著(P ＜0.01),當劑量為 6.0mg/kg時,抑瘤率可達到65.04%(見表 2)。

表1 金絲桃苷對 S180荷瘤鼠的抑瘤作用 (±s,n=10)

表1 金絲桃苷對 S180荷瘤鼠的抑瘤作用 (±s,n=10)

注:與生理鹽水組比較,*P＜0.05,** ＜0.01。

組別 劑量(mg/kg)體重(g)開始 結束 瘤質量(g) 抑制率(%)生理鹽水 — 20.49±1.11 22.96±1.27 1.16±0.23 —金絲桃苷 1.5 20.55± 1.73 21.78± 1.28 0.98± 0.12* 15.52 3.0 21.03± 1.16 22.25± 1.73 0.61± 0.11** 47.41 6.0 20.19± 1.73 21.68± 1.86 0.43± 0.07** 62.93順鉑 3.0 19.65± 1.41 20.13± 1.24 0.38± 0.09** 67.24

表2 金絲桃苷對人結腸癌 HCT8異種移植瘤生長抑制作用 (±s,n=10)

表2 金絲桃苷對人結腸癌 HCT8異種移植瘤生長抑制作用 (±s,n=10)

注:與生理鹽水組比較,*P＜0.05,**P＜0.01。

組別 劑量(mg/kg)體重(g)開始 結束 瘤質量(g) 抑制率(%)生理鹽水 — 20.37±1.62 22.76±1.41 1.23±0.24 —金絲桃苷 1.5 20.95± 1.84 22.17± 1.46 0.92± 0.21* 25.20 3.0 20.67± 1.39 21.89± 1.65 0.62± 0.18** 49.59 6.0 21.31± 1.09 22.83± 1.72 0.43± 0.09** 65.04順鉑 3.0 20.16± 1.41 20.97± 1.31 0.41± 0.03** 66.67

3 討論

惡性腫瘤是臨床常見的一種疾病,嚴重威脅著人民的身心健康。腫瘤的化療是治療腫瘤不可缺少的手段,由于現階段用于臨床的化療藥物對腫瘤細胞選擇性普遍較差,毒副反應大已成為當今腫瘤治療的一大難題。近年來,從植物中尋找天然抗腫瘤藥物越來越受到人們的重視,天然植物藥因其毒性低、療效好,而成為治療腫瘤的新途徑,是當前抗腫瘤新藥研究的主要發展方向。

我們從整體的角度觀察了金絲桃苷對結腸癌 HCT8和肉瘤 S180移植性模型小鼠腫瘤生長的影響 ,結果表明金絲桃苷在小劑量時對荷瘤小鼠就產生抑瘤作用,隨著劑量增加其抑瘤效果逐漸提高并且金絲桃苷不同劑量組荷瘤小鼠的外形保持基本正常,說明在此劑量范圍內未表現出毒性,通過進一步研究,金絲桃苷有希望發展成為一種新型的抗癌藥。

[1]Josey E S,Tackett R L.St John’s wort:a new alternative for depression[J].International Journal of Clinical Pharmacology and Therapeutics,1999,37(3):111-113

[2]李艷,曹學麗,付鵬.貫葉金絲桃活性成分及其分離純化與檢測方法的研究進展 [J].藥學進展,2008,32(1):15-20

[3]張成偉,周亞球,陳磊.金絲桃苷藥理作用研究進展 [J].安徽醫藥,2007,11(11):961-963

[4]李慶林,陳志武,馬傳庚.金絲桃苷對原代培養的大鼠心肌細胞缺氧-再給氧損傷的影響[J].中草藥,2006,37(4):575-577