去勢后的雌、雄大鼠在正畸牙齒移動中牙周組織影響的實驗研究

侯玉一,侯玉澤,柳宏志,李德超

(1.佳木斯大學附屬第一醫院口腔科,黑龍江佳木斯 154003;2.佳木斯大學附屬第二醫院修復科,黑龍江 佳木斯 154002;3.大慶油田總醫院,黑龍江大慶 163000)

口腔正畸治療的目的是通過牙齒在骨組織內的移動以及對頜骨生長發育的控制,來矯治各種錯頜畸形,牙齒通過牙周膜和牙槽骨相連接,并固定于牙槽骨內,牙槽骨主要由松質骨組成,是高度可塑性組織,受體內多種激素和活性物質的調節。其中性激素對機體的生長發育和適應性改建起著十分重要作用,而缺乏不同性激素引起的骨組織代謝異常,一定影響到正畸牙齒移動及牙周組織的改建過程。本實驗主要探討切除雌、雄大鼠性腺后,在雌、雄激素缺乏下 ,其不同的骨代謝率對正畸大鼠牙移動的實驗研究,從骨組織形態結構改變觀察其牙周組織超微結構的改建特征,為今后臨床工作提供理論依據和參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

實驗動物為健康的 40只雄性 Wistar大鼠,體重(240±10)g,隨機分成去睪丸組(ORX)和非去睪丸組(A組),每組20只;40只雌性 Wistar大鼠 ,體重 (230± 10)g,隨機分成去卵巢組(OVX)和非去卵巢組 (B組),每組20只,每組再分為1、7、14、21天組,每組各 5只 (由佳木斯大學動物中心提供),分籠飼養,自由攝食 ,飲水,飼料喂養。適應性喂養一周后進行實驗。5月齡 ,體重 2.5～ 4kg。

1.2 方法

1.2.1 動物模型的建立

OVX手術方法,大鼠全麻固定后定于鼠板,碘酒、酒精消毒,背部脫毛輔巾,取腹部正中切口,于腰肌和肋腺相交處鈍性分離腹外側肌肉用小彎鑷夾持卵巢,完整切除,同法切除對側卵巢后縫合皮下組織及皮膚。

ORX手術方法,大鼠全麻固定后定于鼠板,取仰臥式,碘酒,酒精消毒陰囊皮膚,縱隔離相距1cm各開一個縱行切口,剪開鞘膜后,找出雙側睪丸并切除,縫合皮下組織和皮膚。

術后肌肉注射慶大霉素 1萬 u/kg,每天2次,連續用藥3d。所有動物在同等的條件下飼養,自由攝食,攝水,稱重一次。喂養6周后納入實驗。

1.2.2 分組實驗

正畸大鼠牙齒移動裝置的制作,大鼠全麻固定于鼠板,取仰臥式,用帶尖細金剛砂車針的渦輪機在上頜第一磨牙近中,頰側和切牙頸緣磨溝,深約0.2mm,以利于結扎絲的固定。同時磨改上、下第一磨牙和切牙,將按預定力值50g的正畸鎳鈦螺簧用結扎絲固定于上頜第一磨牙與同側切刀之間,使雙側第一磨牙向近中移動。

每兩天檢查一次,若有脫落及時安裝,每隔一周加力一次,每組分別在每組加力后,每隔一周加力一次,每組分別在加力后第 1天、7天、14天、21天各處死5只,測量上頜第一磨牙與鄰牙之間的距離。取加力后上頜頜骨組織固定。常規骨組織形態計量學分析,HE,透射電鏡。

2 結果

骨組織形態計量學靜態參數指標 OVX組和 ORX組比較,骨小梁面積百分率-68%,骨小梁數目-67%,(P＜0.01)。骨組織形態計量學動態參數指標 OVX組和ORX組比較,骨的形成參數顯著增加 (P＜0.01):熒光標記周長百分率+84%,礦化沉積率+32%,單位骨小梁面積骨形成率+142%,代表骨吸收的參數增加:破骨細胞數目+145% (P＜0.01)。B組與 OVX組比較:骨量顯著增加(P ＜0.01)%Tb,Ar+122%;Tb,N+126%;骨的形成參數顯著下降 (P＜0.01):%L.m-66%;M AR-21%;BFR/BS66%;OC,N-66%。

2.1 骨組織形態計量學靜態參數指標結果

見表 1。

表1 四組骨計量學參數的變化 (±s)

表1 四組骨計量學參數的變化 (±s)

OVX組與 O RX組比較,*P＜0.05,**P＜0.01,OVX組與 B組比較,#P＜0.05,##P＜0.01。

組名 n %Tb,Ar(%) Tb,N(# /mm2)OVX 6 6.8± 1.2** 1.2± 0.13**ORX 7 21.13± 4.2 3.6± 0.6 A組 7 16.3± 2.3 4.0± 0.1 B組 6 15.2± 3.7## 2.7± 0.3##

2.2 骨組織形態計量學動態參數指標結果

見表 2。

表2 四組大鼠骨計量學動態參數的變化(±s,n=6)

表2 四組大鼠骨計量學動態參數的變化(±s,n=6)

FOVX組與 O RX組比較,*P＜0.05,**P ＜0.01,OVX組與B組比較,#P＜0.05,##P＜0.01。

組名 %L.m(%) M AR(μ m/d)OC,N(# /mm2) BFR/BS OVX 13.7± 2.3** 1.7± 0.1** 14.2± 2.3** 24.6± 5.3**O RX 7.4± 0.5 1.3± 0.2 5.8± 0.6 10.7± 1.2 A組 5.7± 0.2 1.0± 0.1 7.2± 1.5 4.0± 0.2 B組 6.1± 0.6## 1.4± 0.1## 8.3± 1.9## 4.8± 0.2##

2.3 實驗性牙齒移動距離的測量結果

表3 四組大鼠牙齒移動距離的測量結果(μ m)(±s,n=10)

表3 四組大鼠牙齒移動距離的測量結果(μ m)(±s,n=10)

OVX組與 ORX組比較,*P＜0.05,OVX組與 B組比較,# P＜0.05。

1d 7d 14d 21d OVX 147± 23 159± 18 530± 30* 680± 32*ORX 145± 17 160± 18 470± 28 600± 40 A組 141± 27 140± 21 420± 21 530± 39 B組 143± 23 145± 18 414± 28# 528± 40#

3 討論

OVX組大鼠與 ORX組大鼠及正常雌、雄對照組牙齒移動比較:OVX組大鼠與 ORX組大鼠較正常雌、雄對照組牙齒移動距離更大、更明顯。同時 ,OVX組大鼠與 ORX組大鼠骨代謝率在高水平上進行,骨改建活躍,對正畸牙齒移動有明顯促進作用。而同樣正畸力作用下,OVX組大鼠同 ORX組大鼠相比,移動時間更早,移動速度和距離均顯著快于ORX組,這與雌、雄大鼠骨代謝不同有關。說明雌激素比雄激素能更好的維持大鼠的骨量。因此,在臨床中性激素在正畸治療中應引起我們的重視。