超聲造影劑制備的初步實驗研究

張久云 勞鳳云 艾凌艷 袁 強 門秀麗 張連元 劉 紅

(華北煤炭醫學院基礎部物理教研室，①藥學系藥物分析教研室，②附屬醫院檢驗科，③基礎部病理生理教研室 河北唐山 063000)

與CT、MRI造影相類似，超聲造影劑(ultrasound contrast agent，UCA)是用于醫學超聲造影檢查的增強劑，它不僅可用于診斷，還可用于超聲介入治療。近些年，隨著UCA與造影技術迅速發展，超聲造影的基礎和臨床應用的研究日漸深入。目前，超聲造影在我國雖尚未廣泛開展，但國內一些醫院對超聲造影的基礎及臨床應用的研究已達國際水平，UCA與超聲造影設備的迅速發展，使得超聲造影成為了當前超聲醫學的熱門研究課題[1]。我國UCA的研制起步較晚，目前國產 UCA尚無商品化[2]，臨床只能依賴進口。進口UCA價格十分昂貴，這嚴重影響了我國超聲造影技術的普及和發展。所以研制價格低廉、性能穩定的超聲造影劑具有重要意義。

本研究采用價格低廉、對人體無毒副作用的藥用非離子型表面活性劑司班80(SP80)和吐溫80(TW80)為微泡包膜材料，利用超聲空化法，在前人[3～6]研究的基礎上，初次試制了非離子型表面活性劑超聲造影劑，考察了造影劑的基本物理特征。

1 材料與方法

1.1 材料 司班80(失水山梨醇脂肪酸酯)，吐溫80(聚氧乙烯山梨醇酐單油酸酯)，媒介液。

1.2 儀器 KQ－500VDB超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司)，BX40－Olympus細胞計數器，Olimpus數碼顯微攝像機。

1.3 微泡造影劑的制備 SP80和TW80按5:1的質量比充分混合，加入適量的媒介液稀釋，溶液pH值7.0。取該液20mL于25mL燒杯中，將燒杯置于超聲波清洗器中進行聲處理。超聲功率400W，振蕩頻率28kHz，聲處理時間10min。同時向液體中注入10mL空氣，注氣速度1mL/min。經超聲處理后的微泡懸浮液置于分液漏斗中靜置數小時。液體分為3層，表層為濃度高、粒徑較大、均勻性較差的微泡層。下層為微泡濃度低、粒徑小的液體。中間部分為粒徑大小最為合適且粒徑均勻的微泡層。棄表層液和下層液，取中間層，加入媒介液洗滌3次，倒入青霉素小藥瓶中，密封后低溫保存。

1.4 造影劑微泡性能測定 光學顯微鏡下觀察微泡外觀形態，并用細胞計數板在用媒介液稀釋1 000倍后測量微氣泡粒徑大小及計數微泡濃度，由Olimpus 顯微數碼相機攝取造影劑微泡圖像，并對稀釋后的微泡混懸液進行數據分析，與細胞計數器測得的數據相比對。

2 結果

超聲空化法制備的非離子表面活性劑微泡造影劑原液(圖1)，外觀為乳白色的混懸液，不透明。圖2是靜止提取的微泡造影劑光鏡下觀察效果。光鏡下微球形態圓整，大小均勻，分散性好，濃度在109/mL數量級，粒徑均值3.74μm。圖3是經過3次洗滌之后提取液的微泡圖片。結果顯示，由于離心作用，致使微泡融合，產生一些較大氣泡。所有樣品在4℃冰箱內存放1周均能保持穩定狀態，期間未見微球融合現象。

圖1 造影劑實物圖

圖2 靜置提取的微泡顯微照片(×400)

圖3 洗滌后的微泡顯微照片(×400)

3 討論

聲學造影劑是內含氣體的微氣泡懸浮液，其直徑通常＜7μm，經靜脈注射后能順利通過肺循環，增強組織的灰階顯像，增強彩色多普勒血流信號，提高病灶及多普勒血流信號檢出率，目前已被廣泛用于疾病的超聲診斷與鑒別診斷[7]。本實驗選用了藥用標準的非離子型表面活性物質司班80和吐溫80作為氣泡的成膜材料制得的超聲造影劑，普通光學顯微鏡觀察，經靜置提取的造影劑微球，形態規則，微球粒徑圓整，大小均勻，分散度好，平均粒徑3.74μm，濃度在109/mL數量級。完全滿足微泡聲學造影劑的條件要求，為下一步的研究奠定了一個很好的基礎。

實驗發現，經洗滌獲取的造影劑出現了融合現象，有較大氣泡產生，微球粒徑均勻性下降，致使造影劑質量降低。在今后的研究工作中需考慮進一步改進分離條件。另外，目前制備造影劑注入的氣體普遍采用的是氟碳類大分子惰性氣體，如全氟丙烷氣體、六氟化硫等。充有氟碳類氣體的微泡性能穩定，成像效果好。而本實驗因是初次試制，考慮到節約經費故用的氣體是空氣。

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