宮頸癌患者宮頸脫落細胞 HPV、病變組織 Brn-3a的表達變化及意義

伊心浩,鄭 妮,王際亮

(勝利油田中心醫院,山東東營 252700)

研究證實,約 99.8%的宮頸癌合并人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染[1],HPV是宮頸癌的主要致病因子。HPV致癌的分子機制復雜,可能與多種因子的表達有關。Brn-3a是 POU轉錄因子家族的一員,在成人周圍神經系統和中樞神經系統特異區域高表達,其表達代表了中樞神經系統最早的有絲分裂后神經元形成[2]。研究發現,Brn-3a在非神經來源的細胞類型,包括 B和 T淋巴細胞以及乳腺、宮頸和睪丸細胞中都有表達[3]。2006年 10月 ～2008年 6月,我們檢測了 19例宮頸癌患者宮頸脫落細胞中HPV及病變組織中 Brn-3a的表達變化,并探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 104例宮頸病變患者,年齡 21～54歲,平均 34.8歲。其中宮頸炎癥 30例,宮頸上皮內瘤變Ⅰ級(CINⅠ)20例,CINⅡ級 16例,CINⅢ級 19例,宮頸癌 19例。患者均未接受任何婦科相關疾病的治療。

1.2 方法

1.2.1 HPV檢測方法 采用導流雜交方法。均用宮頸刷刷取患者宮頸細胞,分離提取 DNA后按照擴增反應體系的要求進行 PCR擴增,然后行 PCR產物雜交,最后顯色判斷結果。檢測結果陽性點為清晰可見的藍紫色原點,根據膜條 HPV分型分布圖判斷陽性點。

1.2.2 Brn-3a檢測方法 采用免疫組化 SP法。取患者宮頸病變組織,常規制作石蠟標本并切片,按試劑盒說明書操作。細胞顯示棕色或有棕色顆粒者為陽性細胞。隨機觀察 5個高倍視野,每個視野計數100個細胞,計算陽性細胞數的平均百分比。0～5%為 0分,～25%為 1分,～50%為 2分,～75%為3分,＞75%為 4分；染色強度:未染色為 0分,淡黃色為 1分,棕黃色為 2分,棕褐色為 3分；兩者相加所得總分 ＞1分為陽性。

1.2.3 統計學方法 采用CS2000統計軟件。計數資料采用 χ2檢驗,相關關系采用配對資料的關聯性分析。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

宮頸炎、CINⅠ級、CINⅡ級、CINⅢ級和宮頸癌患者宮頸脫落細胞中 HPV陽性率分別為 43.3%、50.0%、68.8%、84.2%、94.7%,宮頸組織中 Brn-3a陽性率分別為 6.7%、15.0%、62.5%、78.9%、89.5%。CINⅡ ～Ⅲ級及宮頸癌患者 HPV、Brn-3a陽性率均明顯高于宮頸炎和 CINⅠ患者(P均 ＜0.01)。宮頸癌患者宮頸脫落細胞中 HPV及病變組織中 Brn-3a的表達呈正相關(r=0.283,P＜0.01)。

3 討論

研究表明,HPV感染在宮頸腫瘤發生發展中起重要作用[4,5]。近年來,隨著檢測技術的迅速發展,HPV在宮頸癌篩查及其癌前病變預測中發揮了重要作用,但也存在一些局限性。雖然文獻報道,HPV感染使宮頸癌的相對危險性增加 250倍[6],但病毒的短暫感染并不引發惡性病變的發生,長期持續感染才能導致宮頸癌的發生。因此,積極地治療宮頸高危型 HPV感染,對阻斷病程、預防宮頸癌,特別是宮頸浸潤癌的發生具有重要意義。

既往,對 Brn-3a的研究主要集中于神經系統,包括對其表達的調節及其作用機制等。Ndisang等[5]認為,在人類宮頸細胞中,Brn-3a有激活編碼HPV E6和 E7蛋白基因轉錄的作用,在 CINⅢ患者的宮頸活檢組織中 Brn-3a表達水平增高。因此,Brn-3a可作為 HPV致癌基因轉錄活化的生物標志物[6,7],其在宮頸轉化過程中發揮著關鍵性作用。本研究發現,CINⅡ、CINⅢ及宮頸癌患者宮頸脫落細胞中 HPV與病變組織中 Brn-3a陽性率較高,且二者的表達呈正相關。提示 Brn-3a與 HPV的致癌作用密切相關,聯合檢測對于病情的判斷具有很好的指導意義。

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