熊麗紅
(江西省血液中心,江西 南昌 330077)
為了提高血型檢測準確率,保證臨床用血安全,本中心在街頭用紙片法(正定型)對無償獻血者進行血型初步篩查,再將血標本送入實驗室進行正、反定型。筆者根據2009年6萬多人份街頭篩查結果和實驗室的結果比較,尋找血型出現異常現象的各種因素,現報道如下。
1.1 樣本來源 2009年1月~2009年12月江西省血液中心的無償獻血者血液標本63045份,均用EDTA-Na2抗凝。
1.2 試劑來源 正定型試劑為長春博德生物技術有限責任公司和北京金豪制藥股份有限公司;反定型試劑為上海血液生物醫藥有限責任公司和北京金豪北京金豪制藥股份有限公司。
1.3 儀器 HIMILTON STAR2000全自動加樣儀 (瑞士),RT-340酶標儀(瑞士),Thermo Star溫控孵育振蕩儀(瑞士),Labofuge400e平板式離心機(瑞士)。
1.4 方法
1.4 .1標本檢測 獻血前對所有獻血者用紙片法進行血型的初步篩查。進入實驗室后,對血袋針頭血液再次用紙片法進行一遍正定型檢測;用96孔U型微量孔板法(微板法)進行一次正定型檢測和兩次反定型檢測 (實驗室用不同廠家試劑進行兩次正定和兩次反定血型)。紙片法:在血型檢定卡標記好抗-A和抗-B的位置,分別各滴1滴抗-A和抗-B血清試劑,再各加受檢者血液1滴,混合后立即判斷血型。微板法:用STAR全自動儀加樣,反定型在U型板加兩孔標本血清各50μl,再各加2~5%的標準A和B紅細胞試劑50μl;正定型對標本紅細胞進行2%的稀釋后在U型板加兩孔稀釋紅細胞各50μl,再各加標準抗-A和抗-B試劑50μl。加樣完畢后在孵育振蕩儀上孵育振蕩2min,離心1min后再次孵育振蕩2min,用RT-340酶標儀判讀血型。
1.4 .2結果判斷規則 只有正反定型相符的血型才能發放合格報告,出現血型差錯的報業務科處理,出現正反定型不符的標本送輸血研究室進行確認。
2.1 2009年實驗室共檢測出血型異常29例,占獻血總數的0.046%。
2.2 29例血型檢測異常的人員中,有13例為外采人員檢測血型錯誤,占44.8%;16例為正反定血型不符,占55.2%。
2.3 16例正反定血型不符標本經輸血研究室確認后,結果回饋見表1。

表1 正反定血型不符因素分析
2.4 除上述29例血型異常現象外,尚有1例標本實驗室重復檢測血型未發現異常,血液被醫院因血型正反定不符退回,經本中心輸血研究室確認后為血液中存在冷凝集素。還有1例實驗室正反定無異常,因Rh(D)陰性送輸血研究室確認后發現標本中存在不規則抗體。
街頭外采人員初篩血型與實驗室重復檢測后發現,血型出現異常的現象有44.8%是初篩出現錯誤。造成街頭現場初篩血型檢定錯誤的因素比較多,如街頭實驗條件、溫度、濕度等實驗條件比較復雜;現場獻血人員過多;抗-A、抗-B血清效價較低及試劑在運輸、保存、使用過程中其質量也可能發生變化等。
引起血型正反定型不符的原因比較多,除血液中抗原或抗體的減弱或丟失、獲得性抗原存在或抗原改變、假或不規則抗體凝集反應等客觀因素外,實驗方法、人為因素等均可造成。統計本實驗室2009年所有正反定型不符的結果顯示有31.25%未找到明確原因,排除人為因素外,可能方法本身也有一定影響。紙片法純手工實驗,要求實驗人員有高度責任心外,實驗條件也是影響結果的重要因素;U型微板法檢測血型快速簡捷、適于批量檢測,但也存有一定缺陷,因速度快,需震蕩、離心,可能造成溶血及弱凝集不易發現,通過酶標儀檢測凝塊大小判定血型,跟抗原、抗體效價高低及加樣量也有關系。客觀因素中以血液中存在不規則抗體為最多,與有關報道相一致[1]。
血型鑒定錯誤是臨床上出現溶血性輸血反應主要原因之一,血型正反定型一致是血型鑒定關鍵所在。而血型鑒定錯誤首先是要避免人為因素造成的錯誤,除要有一套完整的質量體系文件,還需要工作人員有高度的責任心。各種免疫因素引起的正反定型不符原因比較復雜,血型的亞型、抗原或抗體減弱不可控制,但部分不規則抗體通過O型紅細胞來監控,對所有無償獻血者血液標本進行不規則抗體篩查的必要性和可行性還需進一步探討。為保證臨床用血安全,血型鑒定必須百分之百準確,這要求工作人員具備豐富的理論知識和工作經驗,合理應用各種血清學檢查技術進行研究分析,隨時學習掌握各種新理論、新技術才能適應現代輸血事業發展的需要。
[1]張循善,何秀英,許連慶.血型正反鑒定結果不符原因分析及解決方法的探討[J].安徽醫科大學學報,2001,36(1):67-68.