Coulter LH750全自動血細胞分析儀的性能評價

許永志，謝志雄，朱小東

(解放軍第175醫院 廈門大學附屬東南醫院檢驗科，福建 漳州 363000)

Coulter LH750全自動血細胞分析儀的性能評價

許永志，謝志雄，朱小東

(解放軍第175醫院 廈門大學附屬東南醫院檢驗科，福建 漳州 363000)

Coulter LH750；全自動血液分析儀；性能評價

Coulter LH750是美國貝克曼庫爾特公司推出的全自動五分類血細胞分析儀，它可對血液的多種細胞組分(包括白細胞的五種組分)進行定量分析[1]。其中紅細胞和血小板采用電阻抗檢測，血紅蛋白采用HiCN法檢測，白細胞則采用VCS結合細胞化學染色技術，經專用的WBC/DIFF檢測通道(流動室)進行測定。我們以ISCH[2]和NCCLS[3-5]制定的評價方案為標準，對該儀器的全血細胞計數(complete blood count，CBC)和白細胞分類(differential count，DC)進行性能評價[6]?，F將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器 美國Beckman-Coulter公司。

1.1.2 試劑 美國Beckman-Coulter公司原裝配套試劑，包括稀釋液、分類試劑包、溶血劑及清洗液。

1.1.3 質控品 美國Beckman-Coulter公司原裝配套5C質控品。

1.1.4 Olympus顯微鏡由日本奧林巴斯光學工業株式會社生產。

1.1.5 其他手工測定血液細胞方法所用試劑，均為市售AR級試劑。

1.2 標本采集 采自健康體檢者，部分為本院住院病人標本，靜脈血(以EDTA-K3抗凝)。所有檢測均于采樣后2h內完成。

1.3 方法

1.3.1 全血細胞計數 CBC、DC、PLT、Hb自動分析按照儀器操作說明書進行，在室內質控在控的情況下進行測定。

1.3.2 主要性能評價試驗 按照ICSH、NCCLS和CLIA’88提供的評價標準進行，包括精密度、線性、攜帶污染率、準確度、DC與人工分類結果比較的評估。

1.3.3 參考方法 白細胞手工分類由3位有經驗的工作人員采用雙盲法對同一標本分類600個WBC，結果取平均值。

1.3.4 所有結果均經Microsoft Excel 2003軟件進行數據分析。

2 結果

2.1 精密度 測定結果表明：Coulter LH750全自動血液分析儀對血液各細胞組分的測定具有很高的精密度，測定所得的變異系數(CV%)均低于預期要求。詳見表1、表2。

表1 Coulter LH750批內精密度測定結果

2.2 線性 取一份高值血細胞抗凝血樣本離心除去部分血漿，WBC、RBC、HGB、 和 PLT 值分別為 195.5×109/L、9.585×1012/L、297.5g/L和3299×109/L，以此樣本為100%。用稀釋液對血樣按 90%、80%、40%、20%、10%、2.50%、0%進行稀釋，然后從低到高以LH750測定各稀釋樣本，并經計算所得與各稀釋度預期值項比較。由于血小板的濃度過高，因此對于第二低值進行再稀釋，然后測定各稀釋度的樣本，測定結果與各稀釋度的預示值作線性回歸分析。詳見表3。

2.3 攜帶污染率 取正常人全血，約4ml，混勻后分裝兩管；取三個干凈的試管，每管中加入大約2ml的稀釋液。將五個試管按前兩管為全血，后三管為稀釋液裝入同一試管架；將試管架放入樣本裝載區，儀器將自動進行檢測。測定結束后儀器將自動計算出攜帶污染率，攜帶污染率(CV%)=[(D1-D3)/(B2-D3)]×100，D1表示第一管稀釋液結果，D3表示第三管稀釋液結果，B2表示第二管全血結果，結果見表4。

2.5 準確度 通過2010年度第一次福建省臨檢中心室間質評回報結果，所有項目數值均在允許范圍內，且偏倚均小于我科質量目標預期值(＜1/2 CLIA’88)詳見表5。

2.6 與手工分類結果比較 取78份住院患者的抗凝血在LH750儀器上測定，每份樣本重復測2次取均值。同時每份血推3張符合質控要求的血片，染色后由3位有經驗的技師在體尾交界處進行白細胞分類，分為中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞五部分，每張血片油鏡分類計數200個白細胞，共計800個白細胞取均值，再與LH750儀器的白細胞分類值進行比較。以LH750儀器白細胞分類值為X軸、顯微鏡白細胞分類值為Y軸，其中45例非白血病標本兩種方法的對比結果詳見表6。

表2 Coulter LH750批間精密度測定結果

表3 不同稀釋度預測值與實測值的相關性

表4 各參數攜帶污染率測定值及結果

表5 2010年度第一次福建省臨檢中心血細胞分析室間質評結果

結果表明 LH750對N、L、E的分類結果較好，M次之，B的分類效果則尚可。

2.7 對幼稚細胞篩選的評估 對于33例有幼稚細胞的白血病標本，儀器均有一個和/或多個報警提示及散點圖顯示異常。對這些33份標本進行手工鏡檢幼稚細胞，并與LH750進行比較，相見表7。

表6 LH750與顯微鏡人工分類結果比較(n=45)

表7 LH750與手工鏡檢幼稚細胞比較

據此得出LH750對幼稚細胞篩選的有關預示值為：檢出靈敏度93.3%；檢出特異性88.9%；陽性預示值87.5%；陰性預示值94.1%。

3 討論

通過對LH750全自動血細胞分析儀的性能評價發現，該儀器對全血細胞計數線性良好，攜帶污染率非常低，CBC各參數精密度高，各參數指標均符合本科室制定的質量目標標準。

比較DC與顯微鏡鏡檢結果，我們發現其中M和B的分類結果稍有偏差，分析其原因，可能與全血細胞中這類細胞的數量少，在制片的同時于血片上分布不均從而造成手工分類的偏差；也有可能進行鏡檢分類操作者分析技術不夠完善等。同時，對幼稚細胞的篩選結果表明，LH750對異常細胞的檢出能力很強，有利于大量常規標本的過篩，而對分類提示異常的標本，仍需手工鏡檢分類。但由于本次統計白細胞分類計數標本數量較少，儀器白細胞分類報警的真陽性率、假陽性率等指標有待于今后增加白細胞分類的標本數量再進一步分析。

總之，通過對Coulter LH750血細胞分析儀的性能評價，結果顯示該儀器測定速度快、檢測參數多、精密度、準確度高，與已知性能的血細胞分析儀相關性好，是一種性能優良的全血細胞分析儀，能夠滿足臨床血液常規與大批量常規標本的檢驗需要。

[1]Coulter LH750 Operator Manuals.Beckman-Coulter Co,Ltd,USA.

[2]International Council for Standardization in Hematology.Guidelines for the evaluation of blood cell analyzer including those used for differential leukocyte and reticulocyte counting and cell i/larker application.Prepared by the ICSH expert panel on cytometry[J].Clin LabHemat,1994,16:157.

[3]National Committee for Clinical Laboratory Standards.Leukocyte Differential Counting NCCLS Approved Standard H20-A2 [S].Villanova PA,1992.

[4]National Committee for Clinical Laboratory Standards．Procedures and devices for the coUecfion of diagnostic blood spedmens by skin puncture；Approved standard fourth edition[S].NCC1S document H4 A4(ISBN 1 56238-382-5),1999.

[5]余立江,等.NCCLS文件EP5T推薦的評價儀器精密度性能方法的應用[J].中華醫學檢驗雜志,1992(3):172-174.

[6]叢玉隆,王淑娟.今日臨床檢驗醫學[M].北京:中國科學技術出版社,1997.

R446.11+1

B

1674-1129(2010)04-0399-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2010.04.036

南京軍區醫藥衛生科研基金課題（08MA076）