自建檢測系統與KX-21N配套檢測系統間結果的可比性研究

王偉鑫，李崢嶸，蘇水林，李忠信

(1、東莞康華醫院檢驗科，廣東 東莞 523080；2、中山市寶駿生物工程研究所，廣東 中山 528415)

隨著科學技術的不斷發展，血細胞分析儀已經普遍用于臨床實驗室，由于進口原裝配套試劑價格比較昂貴，使用價格比較低廉的國產試劑必將成為國內一種趨勢，但不同的血細胞分析儀因分析系統的差異，對同一份標本的測定，結果間可以存在著誤差[1]。本文按照CLSIEP9-A2文件[2]的相關要求對使用國產試劑的自建檢測系統與使用原裝進口配套試劑的配套檢測系統的檢測性能進行比較研究，探討使用非配套國產試劑的可行性及可能存在的一些問題。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1 .1儀器 Sysmex公司生產的XE-2100血細胞分析儀(A3140)由于使用配套校準品、質控品、試劑，具有良好的精密度及準確性，每年參加衛生部、廣東省臨檢中心的室間質評，結果均合格，故選擇其作為其他兩個檢測系統參考儀器。

1.1 .2檢測系統的組成 配套檢測系統由KX-21N血細胞分析儀 (A9398)、原裝配套試劑稀釋液CELLPACK(CPK-303A， 批號 G8035)、 溶血素STROMATOLYSER-WH(SWH-200，批號 R8041)和EIGHTCHECK-3WP質控品(批號 92150822)組成；自建檢測系統由KX-21N血細胞分析儀(A9394)、國產稀釋液 (適用于日本Sysmex KX-21系列稀釋液，批號A080728)和溶血素(適用于日本Sysmex KX21溶血素，批號A080722)組成。

1.2 標本來源 本院門診、住院、體檢患者靜脈采血 2ml，EDTA-K2濃度為 4.45±0.85μmol/L 血液，所有檢測均在4h內完成。

1.3 方法

1.3 .1檢測系統的校準 使用SCS-1000校準品按照CLSIH38-P文件[3]要求對XE-2100進行校準；后采用彭黎明等介紹的方法[4]用經校準過的XE-2100定值的新鮮全血標本校準兩臺KX-21N血細胞分析儀。

1.3 .2試劑理化性質 對國產試劑及進口試劑的理化性質進行比較。

1.3 .3精密度

1.3 .3.1 日內精密度 分別選取(WBC、RBC、Hb、Hct、PLT)高、中、低濃度新鮮標本各一份于兩套系統進行連續檢測11次，棄去第一次結果，計算10次結果的均值及變異系數。

1.3 .3.2日間精密度 每日使用同一批號的配套質控品于兩個檢測系統各檢測1次，連續檢測30d，計算各系統結果的均值及變異系數。

1.3 .4相關性 選取住院門診患者和健康體檢者(男性：139、女性：101，年齡：最大 68 歲，最小 8 歲)標本240例，分別在兩臺KX-21N上進行平行測定，對測定結果進行統計分析。

1.3 .5檢測性能 以配套檢測系統結果為標準，分別以 WBC≥3.5×109/L，RBC≥3.9×1012/L，Hb≥110g/L，Hct≥0.37，PLT≥100×109/L，WBC≤10.0×109/L，RBC ≤5.5 ×1012/L，Hb ≤170g/L，Hct≤0.51，PLT ≤300×109/L作為陽性界值對自建檢測系統結果進行ROC曲線分析，分別計算其曲線下面積(AUC)，陽性似然比(PPV)，陰性似然比(NPV)。

1.3 .6 參考范圍驗證[6]選取在我院2009年9月至2009年10月期間健康體檢標本，根據CLSI C28-A3文件要求自建檢測系統進行參考范圍的驗證，同時與配套檢測系統參考范圍進行比較。

1.3 .7統計學處理 以上實驗數據使用SPSS 13.0統計軟件以及Microsoft Excel 2003進行處理。

2 結果

2.1 檢測系統的校準

對三個檢測系統進行校準均合格，結果見表1。

2.2 試劑理化性質

兩種試劑的理化性質均無差異，結果見表2。

2.3 精密度

表1 三套檢測系統的校準結果(n=10)

表2 兩種血細胞分析儀試劑的理化性質比較*

2.3 .1 日內精密度 結果顯示兩套檢測系統的日 內精密度均良好，均在儀器要求CV之內[5]，見表3。

表3 兩套檢測系統的日內精密度結果的比較(n=10)

2.3 .2日間精密度 結果顯示兩套檢測系統的日間精密度結果均良好，均在儀器要求CV之內[5]，見表4。

2.4 相關性

在檢測 WBC、RBC、Hb、Hct、PLT 時，兩套檢測系統的結果間具有良好的相關性，相關系數均大于0.95。結果見表5。

表4 兩套檢測系統的日間精密度結果的比較

表5 兩套檢測系統結果的相關性

2.5 檢測性能 以配套檢測系統結果為標準，分別以 WBC≥3.5×109/L，RBC≥3.9×1012/L，Hb≥110g/L，Hct≥0.37，PLT≥100×109/L，WBC≤10.0×109/L，RBC ≤5.5 ×1012/L，Hb ≤170g/L，Hct≤0.51，PLT ≤300×109/L作為陽性界值對自建檢測系統結果進行ROC曲線分析，結果自建檢測系統在測定評價項目(WBC、RBC、Hb、Hct、PLT) 時具有良好的檢測性能，見表6。

2.6 參考范圍驗證

表6 自建檢測系統的診斷性能結果

自建檢測系統與配套檢測系統的參考范圍不存在差別，結果見表7。

表7 兩套檢測系統的參考范圍比較(x±2sd)

3 討論

使用進口配套檢測系統結果穩定可靠，但由于其試劑、校準品等比較昂貴，使用國產試劑可以降低成本，目前國內多數廠家生產的試劑眾多，如何在使用國產試劑的同時，與進口配套檢測系統間具有可比性，成為近期一個研究的課題。

彭黎明等研究表明用新鮮血校準儀器雖較麻煩，但適用于所有儀器，特別是不易獲得配套校準品的儀器，成本低，適用性強[4]；且根據準確度傳遞的原理，認真做好每一個環節，通過分析驗證后的結果也表明，其結果是可靠的，標準品重新定值后的準確度有進一步提高[7]。

本研究通過使用儀器配套的校準物SCS-1000對使用配套試劑的XE-2100進行校準后，用經其定值的新鮮全血對兩臺KX-21N進行校準，使兩臺KX-21N的結果可以溯源到XE-2100，保證了儀器在使用非配套試劑降低成本的同時，使結果更具可靠性。

使用病人標本進行相關性分析時，兩個檢測系統間結果具有良好的相關性，WBC、RBC、Hb、Hct、PLT等項目相關系數均＞0.95，P值均＞0.05。

以配套檢測系統結果為標準對自建檢測系統的結果進行診斷性能研究發現，自建檢測系統在測定WBC、RBC、Hb、Hct、PLT 項 目 時 其 AUC 均 較 好 ＞0.93。

在參考范圍的驗證方面，使用自建檢測系統與配套檢測系統的參考范圍的差異無統計意義。

Taouinet R等也論述了使用非配套血細胞分析儀試劑的可能性、可行性[8]。但由于儀器、試劑等因素改變，需定期與配套檢測系統進行比對，確保其準確性。

[1]胡曉波,李 泳,吳駕浦,等.上海地區血液分析儀上準確性的研究和探討[J].上海醫學檢驗雜志,2001,16(16):355-357.

[2] The national committee for clinical laboratory standards method comparison and bias estimation using patient samples. Approved Guidline[S].Second Edition.EP9-A2,2002:4

[3]CLSI.Calibration and quality control of automated hematology analyzer;Proposed standard[S].National Committee for Clinical Laboratory Standards.Villanova,PA,1999,H38-P.1-22．

[4]彭黎明,蔣能剛,府偉靈.多臺血細胞分析儀校準方法的建立[J].中華檢驗醫學雜志,2005,28(5):539-542.

[5]Sysmex KX-21N血細胞分析儀操作說明書,日本Sysmex公司,2004年4月.

[6]Clinical and Laboratory Standards Institute.Defining,establishing,and verifying reference intervals in the clinical laboratory;approved guideline-third edition[S].CLSIdocument C28-A3.Wayne 2008.

[7]李熙建,王 鵬,鄧述琴,等.自建檢測系統與目標檢測系統檢測結果一致性的方法探討[J].檢驗醫學,2008,28(5):655-659.

[8]Taouinet R,Mougin G,Brun C,Darodes de Tailly P.Statistical comparison of the results of the blood cells count obtained with a Micros 60 ABX analyzer using the genuine reagents and generics reagents kits[J].Ann Biol Clin(Paris),2007,65(6):671-676.