替加環素對鮑曼不動桿菌的體外抗菌活性

徐嬌君，呂火祥，胡慶豐，殷 偉，沈蓓瓊，朱永澤，徐 娟

(1、浙江省金華市人民醫院檢驗科，浙江 金華 321000；2、浙江省人民醫院檢驗醫學中心，浙江 杭州 310014)

鮑曼不動桿菌(Acinetobacter baumanni)是一種非發酵的革蘭陰性條件致病菌，也是醫院內不動桿菌屬爆發流行中最主要的菌種，它廣泛分布于水，土壤，人體皮膚，口腔粘膜，呼吸道和泌尿道中，尤其醫院環境中從各種用具和醫務人員手的檢測率均很高且可長期存活，可引起菌血癥，腦膜炎，肺炎及傷口感染等，對危重患者和CCU及ICU中的患者威脅很大，此類感染也被稱作ICU獲得性感染。另外，隨著廣譜抗生素的廣泛使用及介入性操作的普及，導致鮑曼不動桿菌的耐藥率也逐年增高，出現了多重耐藥甚至“全耐藥”的鮑曼不動桿菌[1]，因而給感染性疾病的治療帶來相當大的困難。替加環素[2]是近年來開發的甘氨酸環素類抗生素藥物，已在美國上市[3]由于在國內還未上市，本文用K-B法檢測臨床分離的100株鮑曼不動桿菌菌株對替加環素的藥敏情況，為臨床治療，控制醫院感染提供參考依據，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1 .1資料來源 100株鮑曼不動桿菌分離自浙江省人民醫院2009年7月至2010年2月住院患者送檢標本。分別來自痰液56株、咽拭子25株、血液11株、分泌物6株、腹水1株、膿液1株。同一患者多次分離的菌株只取1株。

1.1 .2儀器與試劑 VITEK-32型全自動微生物分析儀、M-H瓊脂均購自法國生物梅里埃公司、替加環素紙片15μg/片(Oxoid公司，美國輝瑞公司惠贈)。

1.2 方法

1.2 .1菌種分離與鑒定 將待檢標本接種于羊血哥倫比亞瓊脂平板，35℃培養18～24h，分離純化后，用VITEK-32型全自動微生物分析儀配套的革蘭陰性菌鑒定卡GNI和GNS藥敏卡進行菌株鑒定及常規藥物敏感性檢測，具體操作按使用說明書。

1.2 .2 K-B紙片擴散法 取0.5麥氏單位的菌液，按標準的K-B法將菌液涂布于M-H平板上，室溫放置15min，待表面干后，將紙片貼在瓊脂表面。35℃孵育16～18h，用精密度為1mm的游標卡尺量取抑菌圈直徑 (抑菌圈的邊緣應是無明顯細菌生長的區域)。目前CLIS2009版沒有替加環素的藥敏結果的判定標準，本研究的判定標準參照美國FDA給出的替加環素的抑菌圈的直徑(mm)來判讀結果。對于不動桿菌屬：抑菌圈的直徑≥16mm為敏感(S)，抑菌圈的直徑在13～15(mm)之間為中介(I),抑菌圈的直徑≤12mm為耐藥(R)。

2 結果

100 株鮑曼不動桿菌對替加環素的檢測結果見表1顯示：這100株鮑曼不動桿菌對替加環素的敏感率為57%。

3 討論

替加環素是米諾環素的衍生物，是第一個應用于臨床的甘氨酸環素類抗生素。替加環素適用于18歲以上患者敏感菌所致感染的治療，2005年FDA已批準的適應癥包括：復雜性皮膚和皮膚軟組織感染、復雜性腹腔內感染、社區獲得性細菌性肺炎。研究表明替加環素作用機制是以陽離子-四環素類復合物形式通過主動轉運機制穿過細菌外膜并聚積在包膜間質，接著復合物解離，具有弱親和脂性、電中性的四環素分子通過彌散方式透過細胞膜進入細胞。一旦進入細胞質，四環素很可能與陽離子形成螯合物，并與核糖體30S亞基結合，阻斷氨酰基-轉移RNA(t-RNA)進入A位點，從而阻斷肽鏈的延長繼而抑制細菌蛋白質的合成[4,5]。四環素類和甘氨酰環素類共享一個核糖體結合位點，該位點位于16S rRNA的30S亞基上。替加環素與核糖體結合的緊密度為四環素和米諾環素的5倍[6]。替加環素也可能通過另外的結合位點，使其對核糖體保護介導的耐藥菌仍保持活性[7]。

表1 100株鮑曼不動桿菌對替加環素抗菌藥物耐藥情況

表2 替加環素與常用藥物對100株鮑曼不動桿菌耐藥性比較

鮑曼不動桿菌屬非發酵菌，是能在人類皮膚表面生存的革蘭陰性桿菌。本屬菌對營養無特殊要求，抵抗力強，可在環境中廣泛存在，在干燥物體表面存活時間較長。在健康人群中其定植率為40%，在住院病人中定植率為75%[8]。不動桿菌在臨床標本分離率僅次于銅綠假單胞菌[9]，醫院感染不動桿菌屬較社區獲得性感染的菌株藥耐性高，易于發生耐藥菌的傳播和擴散，特別是產β-內酰胺酶菌株常造成感染的流行與暴發[10]。同時由于長期抗生素選擇壓力使泛耐藥株明顯增加，特別是對廣譜β-內酰胺類藥物的耐藥，給臨床抗菌治療帶來了極大的困難。研究顯示，100株鮑曼不動桿菌對常用抗菌藥物的藥敏試驗結果表明：頭孢西丁的耐藥率已達到了91%；其他如亞胺培南，美洛培南，頭孢吡肟,左氧氟沙星,慶大霉素耐藥率都達到了50%以上分別為69%，65%，71%，66%，55%。相對阿米卡星的耐藥率稍微低些，為38%；多粘菌素B的耐藥率為0。本試驗所研究的替加環素的耐藥率為22%，中介率為21%，敏感率為57%。在本研究中，替加環素對鮑曼不動桿菌感染有一定的抑菌效果，臨床可結合病情，考慮合理使用抗菌藥物以降低鮑曼不動桿菌的耐藥性。

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