急性腦梗塞前后血清腫瘤壞死因子-α含量的研究

【摘要】腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor，TNF-α)是一種具有多種生物活性的細胞因子，在正常情況下血清中存在較低水平的TNF-α，某些病理狀態TNF-α水平升高。本文采用酶聯免疫吸附法定量檢測腦梗塞患者發作期及治療期血清中TNF-α的含量的變化研究，以探討TNF-α與腦梗塞發病的關系，指導治療，減少病殘率。

【關鍵詞】腦梗塞;腫瘤壞死因子;血清;酶聯免疫吸附測定

【中圖分類號】R743.33【文獻標識碼】A【文章編號】1007-8517(2010)10-006-1

1材料與方法

1.1研究對象:病例組選取2009年4月至2009年12月我院住院治療的急性腦梗塞患者48例，其中男性28例，女性20例，年齡在54～66歲，平均年齡60±6歲;另取體檢正常人群30例做對照，其中男性16例，女性14例，年齡在55～65歲，平均年齡60±5歲。病例組入選標準:均符合2008年全國第八屆腦血管病學術會議修訂的診斷標準，并經頭顱CT或頭顱MRI證實病灶存在。須具備以下條件:①首次患急性腦梗塞，發病在12h以內。②必須是住院患者;入院時體溫正常，無明確的炎癥癥狀。③NIHSS評分在5～23分之間。病例組和對照組的排除標準:①近兩周患有感染性疾病;②伴發惡性腫瘤;③伴有自身免疫性疾病;④伴有嚴重的心、肝、腎臟疾病及血液系統疾病。

1.2研究方法

1.2.1主要試劑:為TNF-α ELISA試劑盒。

1.2.2標本采集:患者血清標本分別來自以上48例急性腦梗塞患者，正常人血清標本30例作為對照。患者入院治療前抽取空腹靜脈血2ml，室溫下靜置2小時后，用低溫離心機離心血液標本取上清(10℃ 2000轉/分、10分鐘)，分裝于EP管中，溶栓及治療后7天分別再次采集標本，方法同上。所有血清置于-70℃低溫保存待檢。

1.2.3實驗方法:血清TNF-α含量的ELISA檢測。嚴格按照試劑盒說明書操作，根據標準濃度曲線計算出樣品TNF-α含量，結果以ug/L表示。

1.2.4統計學方法:數據輸入計算機，采用SPSS10.0軟件進行處理。數據以x±s表示，組間比較用t檢驗、單因素方差分析。P<0.05為差異有顯著性。

2結果

急性腦梗塞發作期TNF-α含量明顯高于治療期(P<0.01)，急性發作期和治療期明顯高于正常對照組(P<0.01)，結果見表1。

表1 各組血清TNF-α比較(x±s，CB/ug.L-1)

組別例數 TNF-α

正常對照組3087.58±10.87

腦梗塞急性期 48 156.63±15.46﹡△

腦梗塞治療期 48 110.56±16.87﹡

﹡P<0.01與正常對照組比較△P<0.01與腦梗塞治療期比較(t檢驗)

3討論

腫瘤壞死因子-α(TNF-α)主要是由激活的巨噬細胞分泌的一種多肽類物質，它具有廣泛生物學功能，包括抗腫瘤、抗感染、促進組織修復等重要作用，在許多疾病中參與重要的病理生理作用。

近年來的研究表明，TNF-α主要通過以下方式對中樞神經系統(CNS)產生影響:①外周TNF-α通過神經介質作用于CNS或通過受損的BBB(血腦屏障)進入CNS;②外周細胞進入CNS產生TNF-α;③CNS多種細胞成分，如脈絡叢室管膜細胞、血管內皮細胞、活化星形膠質細胞、小膠質細胞及神經元等，在不同刺激/損傷下產生TNF-α。腦梗塞患者有白細胞聚集和浸潤的病理現象。這種繼發于腦缺血的炎癥過程對損傷程度有影響。TNF-α可影響血管內皮細胞活性并對血管炎癥過程起調節作用。有研究認為TNF-α參與腦梗塞發病的病理生理機制可能是:(1)增加內皮細胞組織因子的合成釋放，抑制組織纖溶酶原激活物的釋放及誘導纖溶酶原激活物抑制劑-1的分泌而抑制纖溶反應，下調血栓調解素的表達，從而抑制具有抗凝作用的蛋白C激活，并刺激內皮細胞釋放白介素-1(IL-1)，而IL-1具有促進血栓形成作用，TNF-α與IL-1協同作用使內皮細胞表面成為促凝狀態，促進血栓形成。(2)TNF-α可影響血管舒縮活性物質的表達。腦梗塞時TNF-α增加，還伴有前列腺素(PGT2)、TXB2產生等增加。這些因子除影響血凝過程外，還可促成血管舒縮因子的下降和內皮素(ET)的增加引發血管收縮，增加局部卒中的危險性。(3)腦缺血后2～7d，TNF-α刺激成纖維細胞。成膠質細胞和星形細胞表達神經生長因子，有助于缺血改善和神經元生存。缺血后7～30d，通過巨噬細胞和膠質細胞產生絲氨酸激酶、微管蛋白-2激酶等，參與損傷組織吸收、修復和重塑。TNF-α參與了腦梗塞患者炎癥/免疫反應發生發展過程。有研究結果顯示腦梗塞患者血中TNF的增高，使得內皮細胞和白細胞上的粘附分子[ICAMs]表達增強，進而使血液中白細胞與血管內皮細胞之間的粘附作用加強。白細胞粘附于微血管內皮表面，一方面可使機械性堵塞循環通道，影響組織的血液供應另一方面活化的白細胞可釋放大量的毒性氧自由基蛋白水解酶，損害局部血管，導致血管通透性加強，造成腦組織水腫，活化的白細胞透過受損的血管壁向缺血區移行，可進一步釋放上述毒性物質，破壞幸存的神經元和膠質細胞，從而加重神經組織損傷。

本試驗表明腦梗塞急性期血清TNF-α含量明顯高于治療期，兩者比較有顯著性差異(P<0.01);而治療期患者血清TNF-α含量明顯高于正常對照組，兩者比較有顯著性差異(P<0.01)。提示TNF-α是參與急性腦梗塞病理生理機制中的關鍵介質之一，參與急性腦梗死的炎癥免疫過程，所以，能在腦梗塞進程中有效地降低TNF-α含量，可減少病殘率。

參考文獻

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