涎腺多形性腺瘤中PLAG1的表達及其與ER\\P53的關(guān)系

[摘要] 目的 探討涎腺多形性腺瘤中PLAG1的表達及其與ER、P53的關(guān)系。方法 應用免疫組織化學方法檢測多形性腺瘤中PLAG1、ER和P53蛋白的表達。結(jié)果 在45例多形性腺瘤中，PLAG1、ER、P53均呈陽性表達，其中PLAG1為強陽性表達;PLAG1在復發(fā)組陽性率小于無復發(fā)組;PLAG1、ER、P53有同時表達;PLAG1表達在ER與P53陽性組表達比率明顯高于陰性組。結(jié)論 多形性腺瘤中可見PLAG1、ER與P53蛋白表達。三者表達具有密切相關(guān)性，可能存在協(xié)同作用。其表達與多形性腺瘤的預后(復發(fā)、惡變)密切相關(guān)，可作為反映多形性腺瘤特征的一個檢測指標。

[關(guān)鍵詞] 多形性腺瘤; 多形性腺瘤基因1; 雌激素受體; 免疫組化

[中圖分類號] R739.87 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2010)05-25-02

PLAG1 Expression and Its Relationship with ER and P53 in Pleomorphic Adenoma

ZHANG Yuting XIE Liping SHEN Lei

Department of Anatomy，Qiqihaer Medical College，Qiqihaer 161006，China

[Abstract] ObjectiveTo expiore the PLAG1expression and analyze the relation between the expression and ER and P53 in pleomorphic adenoma. MethodsThe expression of PLAG1，ER and P53 in pleomorphic adenoma was detected by using immunohistochemical method. ResultsIn 45 cases of pleomorphic adenoma，the PLAG1，ER and P53 expression was positive，PLAG1 showing a strongly positive expression. The expression level of PLAG1 in recurrence group was lower than that in no recurrence group. The expression of PLAG1，ER and P53 was present in pleomorphic adenoma. ConclusionThere was PLAG1，ER and P53 expression in pleomorphic adenoma，with a close correlation among the three. It is suggested that the expression of PLAG1 ER and P53 should be a valuable marker in predicting the biological behavior of pleomorphic adenoma.

[Key words]Pleomorphic adenoma; PLAG1; ER; Immunohistochemistry

研究證實唾液腺多形性腺瘤基因L1(pleomorphic adenoma gene 1，PLAG1)顯示為腫瘤抑制基因[1，2]，其突變與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，有少量的報道認為PLAG1基因突變也出現(xiàn)在其它系統(tǒng)腫瘤中。對于PLAG1表達的研究報道很少，而有關(guān)PLAG1在PA中的表達及其作用的研究，目前為止還不多見。而且對PA的早期診斷和預后的評估，目前還存在較多的不確定因素。野生型P53[3]蛋白通過其結(jié)合、轉(zhuǎn)錄活性功能調(diào)節(jié)雌激素受體ER[4]的表達，ER能調(diào)節(jié)細胞分裂有關(guān)的基因而影響細胞的分裂與增殖。因此，檢測涎腺多形性腺瘤中PLAG1的表達及其與ER、P53的關(guān)系對了解多形性腺瘤發(fā)病的分子機制及判斷其預后提供更有效和客觀的分子生物學指標。

1 材料與方法

1.1 一般材料

1.1.1 材料來源 收集本院1998年10月～2007年10月確診的PA病例45例，患者最小年齡為34歲，最大年齡76歲;其中男20例，女25例;患者術(shù)前均未做任何輔助性治療。

1.1.2 材料分組 蠟塊切片厚約5μm，常規(guī)HE染色按WHO發(fā)表的新的涎腺腫瘤組織病理分類法進行分組，PA共20例，正常腮腺組織15例做為對照。

1.1.3 實驗用品 鼠抗人P53單克隆抗體、鼠抗人PLAG1單克隆抗體(ZY-7D2)、SABC免疫組化試劑盒、DAB顯色試劑盒(均購自北京中山生物技術(shù)有限公司)、水箱、電烤箱、微波爐。

1.2 實驗方法

所有標本均經(jīng)10%甲醛固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋，行連續(xù)切片，厚約5μm，用于PLAG1、ER、P53的免疫組織化學檢測。然后在光鏡下依據(jù)細胞核著色及陽性細胞百分數(shù)，陰性:沒有著色;陽性:細胞核著色，陽性細胞數(shù)≥25%。

1.3 統(tǒng)計學方法

計數(shù)資料用卡方檢驗和Spearman等級相關(guān)檢驗;檢驗水平α=0.05即P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義;采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。

2 結(jié)果

在45例PA中PLAG1陽性率為91.11%，均呈強陽性;ER陽性率為35.55%;P53陽性率為51.11%。在復發(fā)的5例中均檢出ER的表達和P53的過度表達。見圖1。PLAG1、ER、P53在各組中的陽性表達率見表1。45例多形性腺瘤患者中PLAG1表達陽性高達41例(91.11%)，陰性4例(64.3%);PLAG1陽性表達率在年齡≥45歲組(96.29%)高于<45歲組(83.33%)，但兩組間無顯著性差異(P>0.05);男性患者的PLAG1蛋白表達率(85%)低于女性患者(96%)，但男女兩組比較無顯著性差異(P>0.05);在復發(fā)組陽性率40%小于無復發(fā)組(97.5%)，兩組間有顯著性差異(P<0.01)。PLAG1、ER與P53同時表達率為(16/45)35.55%。PLAG1表達在ER與P53陰性的表達比率為(5/45)11.11%，而PLAG1表達在ER與P53陽性組表達比率高于陰性組，有顯著性差異(P<0.05)。

3 討論

多形性腺瘤(pleomorphic adenoma，PA)是腮腺最常見的良性腫瘤，由于具有一定的侵襲性生長特性，復發(fā)率較高，而且多次復發(fā)后易導致癌變。多形性腺瘤是腮腺最常見的良性腫瘤，約占腮腺腫瘤的60%～70%。雖然為良性腫瘤，卻有一定的侵襲性生長特性。保存面神經(jīng)的腫瘤及部分腺體切除術(shù)和保存面神經(jīng)的腫瘤及腮腺淺葉或全葉切除術(shù)是目前治療腮腺多形性腺瘤的最為有效的手段，但是即使在臨床手術(shù)完全成功的情況下仍然存在最高3%的復發(fā)率，因此了解多形性腺瘤和惡性多形性腺瘤的發(fā)生發(fā)展機制對腫瘤的預防、早期診斷和治療都有著非常重要的意義。

在45例PA患者中，PLAG1陽性表達率達91.11%，提示PLAG1的激活和表達與PA有一定的相關(guān)性。PLAG1在復發(fā)組陽性率小于無復發(fā)組，兩組間有顯著性差異(P<0.01)，在每個瘤旁正常腺體組織均未檢出PLAG1的表達，提示PLAG1與PA的預后有相關(guān)性。而PLAG1陽性表達率在大于或等于45歲組高于小于45歲組;男性患者的PLAG1蛋白表達比率低于女性患者，但兩組比較均無顯著性差異(P>0.05);綜合以上結(jié)果，可以認為，PLAG1的表達可以作為判斷PA預后的一個指標。

近年來，不少學者認為腫瘤的發(fā)生是基因多重損傷所致的復雜過程，提出了多基因協(xié)同作用的假說。認為單獨一個癌基因可引起細胞增殖和永生化，但不一定引起腫瘤的發(fā)生，至少有兩個或兩個以上癌基因共同作用才能引起腫瘤的發(fā)生。本實驗中PLAG1、ER與P53同時表達率為35.55%(16/45)。PLAG1表達在ER與P53陰性的表達比率為11.11%(5/45)，而PLAG1表達在ER與P53陽性組表達比率高于陰性組，有顯著性差異(P<0.05)。經(jīng)統(tǒng)計學分析，PLAG1表達與P53及ER陽性表達密切相關(guān)，即表達相一致。而在復發(fā)的3例中，均表達ER，這可能是P53基因突變后，改變了對許多基因的影響也影響了對ER基因的調(diào)節(jié)，從而使ER得到表達。因此，同時檢測PLAG1、P53和ER蛋白對判斷多形性腺瘤預后具有極高的意義。

[參考文獻]

[1] Bilanges B，Varrault A，Basyuk E，et al. Loss of expression of the candidate tumor suppressorgene ZAC in breast cancer cell lines and primary tumors[J]. Oncogene，1999，18(27):3979-3988.

[2] Pagotto U，Arzberger T，Theodoropoulou M，et al. The expression of the antiproliferative gene ZAC is lost or highly reduced in nonfunctioning pituitary adenomas[J]. Cancer Res，2000，60(24):6794-6799.

[3] 胡建功，金小平，申興斌，等. VEGF P53在甲狀腺腫瘤中的表達意義[J]. 中國誤診學雜志，2004，4(3):327-329.

[4] 劉弋，胡家驊，王震宗，等. 胃癌生物學行為與性激素及其受體相關(guān)關(guān)系的研究[J]. 中華醫(yī)學雜志，1992，72(2):168-169.

(收稿日期:2009-12-01)