未刺激的未成熟卵體外培養(yǎng)在多囊卵巢綜合征患者中的應(yīng)用

趙彩巖　梅　麗　劉　麗

【摘要】 目的 探討未刺激的未成熟卵體外培養(yǎng)成熟(IVM)治療難治性多囊卵巢綜合征(PCOS)患者的療效。方法 2005年10月至2006年10月本中心對(duì)50例難治性PCOS患者65個(gè)周期的IVM治療。結(jié)果 9個(gè)周期取消，取消率為13.85%；65個(gè)周期共獲卵1 338枚，平均每周期20.6枚，培養(yǎng)48 h后總成熟率為68.5%。正常受精率為70.2%，卵裂率為91.1%，每穿刺周期和移植周期的臨床妊娠率分別為37.5%和40.6%，28例臨床妊娠中，6例多胎，多胎妊娠率為21.4%。結(jié)論 未經(jīng)刺激的IVM技術(shù)用于難治性PCOS是一種有效的方法，可獲得與常規(guī)體外受精-胚胎移植(IVF-ET)相似的臨床妊娠率。

【關(guān)鍵詞】多囊卵巢綜合征；未成熟卵體外培養(yǎng)成熟；體外受精-胚胎移植

In vitro maturation and fertilization of unstimulated inmature oocyte for treatment of infertility women withpoly cystic ovary syndrome

ZHAO Cai-yan,MEI Li，LIU Li.

Shenyang No.204 Hospital,Liaoning 110043,China

【Abstract】 Objective To evaluate the clinical application of in vitro maturation(IVM)of unstimulated inmature oocytein the treatment of infertility women with polycystic ovary syndrome.Methods Between Oct.2005 and Oct.2006,65 cycles of IVM in 50 infertility women with obstinate polycystic otaty syndrome(PCOS)were carried out.Results 9 cycles were cancelled and cancellation rate was 13.85%；a total of 1338 inmature oocytes were obtained in 65 cycles with the average number of 20.6 per cycle.A total of 643 oocytes were normally fertilized by ICSI 70.2%，with a cleavage rate of 91.1%.28 clinicat pregnancies were obtaind.Pregnancy rate was 37.3%per puncture and 40.6%per transfer.Among the 28 cases 6 cases were multipregnancy.The multipregnancy rate were 21.4%.Conclusion Our results shows that IVM of unstimulated in mature oocytes is an effective method for the treatment of infertility women with obstinate PCOS which maybe offered as an altimative to conventiona lVF.

【Key words】Polycystic ovary syndrome;In vitro maturation;In vitro fertilization

1 資料與方法

1.1 一般資料 從2005年10月至2006年10月本中心對(duì)50例難治性PCOS患者65個(gè)周期的IVM治療。PCOS診斷標(biāo)準(zhǔn)為：①長(zhǎng)期無(wú)排卵;②臨床和生化指標(biāo)提示有高雄激素血癥存在，并排除其他可致高雄激素血癥的疾病。

1.2 方法

1.2.1 未成熟卵的采集 自然月經(jīng)周期或撤退性出血的第3~5天行陰道超聲檢查，由專人測(cè)量子宮內(nèi)膜厚度及記錄兩側(cè)卵巢的竇卵泡數(shù)。未經(jīng)刺激，于周期的第10~12天，行陰道B超監(jiān)測(cè)，如雙側(cè)卵巢中無(wú)直徑大于8 mm的卵泡，即肌內(nèi)注射人絨毛膜促性腺激素(HCG)10 000 U，并于36 h后在丙泊酚靜脈注射下經(jīng)陰道超聲引導(dǎo)行卵泡穿刺獲卵。

1.2.2 IVM和胚胎培養(yǎng) 把抽到的血性卵泡液的1 ml平鋪放在拾卵皿(FocoB003)，顯微鏡下觀察拾卵，將卵子放入體外成熟培養(yǎng)體系，即為TCM-199培養(yǎng)液(美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品)+20%胎中血清(杭州四季青公司產(chǎn)品)+0.075 n/ml FSH+0.1 U/ml 人絨毛膜促性腺激素(HCG，瑞士Serono公司產(chǎn)品)中，于體外培養(yǎng)24~48 h，待極體沾液后，行ICSI，之后將部分卵母細(xì)胞移入CM(Ceunin公司產(chǎn)品)中培養(yǎng)液，18 h后觀察受精情況，繼續(xù)培養(yǎng)24~48 h，直至胚胎移植，移植前常規(guī)行激光輔助孵化。

1.2.3 子宮內(nèi)膜的準(zhǔn)備 于IVM周期第3~5天戊酸雌二醇(補(bǔ)佳樂(lè)、德國(guó)先靈公司)2 mg/d,如取卵第8天內(nèi)膜厚度小于7 mm，則增至6~10 mg/d,于移植日減為4 mg/d;如取卵日內(nèi)膜厚度大于7 mm,增至4 mg/d; ICSI當(dāng)天開(kāi)始肌內(nèi)注射黃體酮80 mg/d,連續(xù)兩周。

1.2.4 胚胎移植及黃體支持 于ICSI受精后的第2~3天實(shí)行宮腔內(nèi)胚胎移植(ET)，ET后2周行尿妊娠試驗(yàn)，若陽(yáng)性繼續(xù)服用戊酸雌二醇4 mg/d 和肌注黃體酮80 mg連續(xù)2周，ET后4周行超聲檢查確定胎囊及胚胎發(fā)育情況，若情況良好，黃體酮減為60 mg，否則維持原劑量直至90 d停藥。

2 結(jié)果

2.1 IVM的實(shí)驗(yàn)室結(jié)果 50例患者共進(jìn)行65個(gè)周期，其中4例患者因獲卵母細(xì)胞少而放棄，4例患者獲得的未成熟卵母細(xì)胞培養(yǎng)48 h后不成熟，一例患者獲卵母細(xì)胞30個(gè)，有受精但無(wú)裂卵。因此9例取消，取消率為13.85%(9/65)，其余41例患者共移植56個(gè)周期，獲得未成熟卵母細(xì)胞851個(gè)，平均每周期15.2個(gè)，體外培養(yǎng)48 h后，卵母細(xì)胞成熟620個(gè)，成熟率為72.9%，行ICSI后卵母細(xì)胞正常受精640個(gè)，受精率為75.2%，卵裂582個(gè)，卵裂率為90.9%。 2.2 IVM的臨床結(jié)果 移植56年IVM周期中，共移植202個(gè)胚胎，平均3.78個(gè)(2~6個(gè))，50例患者中，1例生化妊娠，22例獲得臨床妊娠,每取卵周期的臨床妊娠率為40%(22/56)，2例3胎妊娠，于妊娠8周成功減為雙胎，6例雙胎妊娠，多胎妊娠率為36.4%。

3 討論

目前對(duì)難治性PCOS不孕患者尚無(wú)有效的治療方法，而IVM技術(shù)主要針對(duì)一些卵子成熟障礙的不孕患者，尤其對(duì)于PCOS無(wú)排卵者已有較多研究且獲得了較高的臨床妊娠率^[2]對(duì)于應(yīng)用促性腺日后是否真正有益于IVM結(jié)構(gòu)，存有爭(zhēng)議^[3-5]。本生殖中心采用未經(jīng)刺激的IVM技術(shù)可獲得與常規(guī)IVF或ICSI相媲美的臨床妊娠率，其優(yōu)勢(shì)在于：①未用任何促排卵藥，節(jié)約近一半的費(fèi)用；②監(jiān)測(cè)過(guò)程簡(jiǎn)單，減輕患者的日程負(fù)擔(dān)；③由于未用藥物刺激，治療周期縮短，且可繼續(xù)進(jìn)行；④避免其他輔助生殖技術(shù)中使用促性腺激素超促排卵的近期并發(fā)癥及遠(yuǎn)期并發(fā)癥；⑤即使本周期未成功，但穿刺本身可改善PC0S患者體內(nèi)的不良的分泌環(huán)境，對(duì)于不伴其他因素的PCOS患者，IVM后可自然恢復(fù)排卵并妊娠；⑥穿刺簡(jiǎn)便安全。由于IVM在PCOS的應(yīng)用中，具有很大的優(yōu)勢(shì)，關(guān)于PCOS患者采取前是否需要用少量的促性腺激素，爭(zhēng)取獲得最好質(zhì)量和最多數(shù)目的不成熟卵母細(xì)胞，提高IVM成熟的卵母細(xì)胞質(zhì)量，進(jìn)而提高臨床的妊娠率，將是IVM在PCOS中應(yīng)用研究的熱點(diǎn)。

參 考 文 獻(xiàn)

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