接骨續筋膠囊中揮發油的提取和包合工藝研究

摘要：目的：考察接骨續筋膠囊中揮發油提取和包合的最佳制備工藝。方法：采用共水蒸餾法，以收油量為指標，利用單因素試驗篩選揮發油的提取工藝；采用飽和水溶液法，以包合物收得率和包合率為評價指標，利用正交試驗篩選包合工藝。結果本方揮發油提取的最佳工藝為：加10倍水，浸泡2h，共水蒸餾提取6h；最佳包合工藝為：揮發油與8—CD的比例為1:6，包合溫度為50℃，攪拌時間為2h。結論用此法得到的揮發油提取率及B—CD包合物的包合率較高，包合物性質穩定，而且操作簡單。

關鍵詞：接骨續筋膠囊；揮發油；提取工藝；包合；正交設計

中圖分類號：R927.2 文獻標識碼：A

文章編號：1007--2349(2009)09--0053--03

接骨續筋膠囊是由骨碎補、三七、川芎、當歸、桂枝、川木香等藥組成，具有接骨續筋，散瘀生新，行氣止痛，通經活絡的功效，在本院臨床上主要用于治療骨折，粉碎性骨折，骨不連，脫位，筋傷，關節疼痛等癥。方中當歸、川芎、桂枝、川木香中的揮發油為藥理活性成分之一，現采用單因素試驗對當歸等藥的揮發油提取工藝進行了研究，但若將揮發油直接藥用，容易氧化變質，且穩定性較差，為了提高藥材揮發油在制劑過程中的穩定性，保證療效，通過正交實驗L_{9(3⁴)實驗對其揮發油進行β—CD包合，以包合物收得率和包合率為評價指標，優選出飽和水溶液法制備包合物的最佳工藝條件，為這幾味藥的揮發油粉末化參與制劑生產提供了依據。}

1 材料與儀器

材料：當歸、川芎、桂枝、川木香藥材(購于成都市荷花池中藥材市場，經鑒定符合《中國藥典》2005版相關規定)、β—CD(上海伯奧生物科技有限公司)、無水乙醇等試劑均為分析純。

儀器：揮發油提取器(四川大學玻璃儀器廠)、KUUDOSSK250HP型超聲波清洗機(上海科導超聲儀器有限公司)、85—2數顯恒溫磁力攪拌器(上海君竺儀器制作有限公司)、電子分析天平(d＝0.001g，北京賽多利斯天平有限公司)。

2 方法與結果

2，1揮發油提取工藝研究本方選擇共水蒸餾法，以收油量為指標，采用單因素試驗進行考察。影響揮發油提取效果的因素主要有藥材粉碎度、浸泡時間、加水量、提取時間等。為了適應大生產的實際情況，處方藥物均以飲片投料，故只考察其余3項。2，1，1藥材吸水率的考察按處方比例，稱取當歸、川芎、桂枝、川木香藥材共100g，加10倍量水浸泡，每30min觀察藥材浸透情況，直至藥材完全浸透心(6h)。濾過，藥渣稱重，測得吸水率為141.3％。因此，揮發油提取時應額外加入1.5倍量水以補足藥材的吸水量。2，1，2浸泡時間的考察按處方比例稱取當歸、川芎等藥材5份，每份200g，各加8倍量水，分別浸泡0h、1h、2h、4h、12h，以收油量為指標，在相同條件下共水蒸餾法提取6h，結果見表1。

結果表明，浸泡2h后提取，揮發油的提取量沒有增加，故將揮發油提取浸泡時間確認為2h。2，1，3加水量的考察按處方比例稱取當歸、川芎等藥材4份，每份200g，分別加6倍、8倍、10倍、12倍量水，浸泡2h，以收油量為指標，在相同條件下共水蒸餾法提取6h，結果見表2。

結果表明，加水量為10倍以上時，揮發油幾乎沒有增加，故確認加水量為10倍。2，1，4提取時間的考察按處方比例，稱取當歸、川芎等藥材3份，每份200g，各加10倍量水，浸泡2h，在相同條件下共水蒸餾法提取8h，以收油量為指標記錄不同時間的揮發油收得量，結果見表3

結果表明，提取6h以后，揮發油量幾乎沒有增加，而且隨著提取時間的延長，揮發油顏色加深，影響揮發油質量，故將揮發油提取時間確認為6h。2，1，5揮發油提取工藝驗證試驗從上述結果可知，本方揮發油提取的最佳工藝為：加10倍水，浸泡2h，共水蒸餾提取6h為確保提取工藝的準確可行，取3批藥材進行驗證試驗，結果見表4。

結果表明，該揮發油提取工藝穩定可行。

2，2揮發油β—環糊精包合工藝研究2，2，1空白回收率試驗精密量取1mL揮發油于500mL圓底燒瓶中，加蒸餾水200mL，然后按2005版《中國藥典》一部附錄xD揮發油測定法項下測定，計算揮發油空白回收率，結果見表5。

揮發油空白回收率(％)一(揮發油收得量／揮發油加入量)×100％

由上表可知，測得揮發油的空白回收率為82％。2，2，2評價指標的選擇包合率為衡量包合效果的重要指標，包合率越高，包合效果越好，可作為包合工藝篩選的主要指標，權重系數定為0.7；但收得率在大生產中也有意義，在β一環糊精和揮發油投入量一定的情況下，收得率越高，包合效果越好，故收得率作為次要篩選指標，故權重系數定為0.3。

包合物收得率(％)＝[包合物／(β—CD加入量+揮發油加入量)]×100％

包合率(％)＝[包合物中揮發油回收量／(揮發油加入量×空白回收率)]×100％。2，2，3包合方法的選擇根據文獻及預試驗可知，本方揮發油的包合采用飽和水溶液法，具有操作方便，設備要求不高，便于工業化生產等特點。β—CD包合揮發油的處理方法較多，有超聲處理、攪拌、研磨等方法，現對此3種方法進行比較。稱取一定量的β—CD，加100mL蒸餾水于水浴上加熱溶解，放涼至40℃使之成飽和溶液，然后緩緩加入當歸、川芎等藥材的揮發油無水乙醇溶液，充分混勻，恒溫50℃，分別超聲、置研缽中研磨、用磁力機攪拌各1h，靜置冷藏(0℃～5℃)24h，抽濾，沉淀用少許蒸餾水，石油醚各洗滌3次，40℃干燥5h，即得成品，結果見表6。

由上表可知，超聲處理包合物收得率及包合率都高于研磨法和攪拌法，但超聲法只略高于攪拌法，考慮到采用超聲法對設備要求較高，且產量較小，不能滿足大生產的需要，故對本方揮發油采用攪拌法處理。2，2，4揮發油包合工藝的考察在影響揮發油包合的主要因素有：油(mL)：β—CD(g)、包合時間、包合溫度，故對以上3個因素，各取3個水平，以包合物收得率和包合率為考察指標，應用正交表進行試驗，篩選最佳工藝，因素水平見表7。

正交試驗結果：運用spss11.5對正交實驗結果進行方差分析，試驗數據及方差分析結果見表8、表9。

通過直觀分析和方差分析，影響因素大小為B>A>C，A，C因素對揮發油的包合有顯著性意義(P<0.05)，因素c無顯著性影響。最佳包合工藝條件為AB₂C₂；即揮發油與β—CD的比例為1:6，包合溫度為50℃，攪拌時間為2h。2，2，5驗證實驗根據上述結果所得的最佳包合工藝驗證3批，結果見表10。

由上表可知，揮發油的β—CD包合工藝合理可行。

3 討論

處方中的四味藥主要含有輕油，同時也含有少量的重油，試驗發現使用比重小于1的揮發油提取器也能較為完全的提取揮發油，為方便以后大生產的操作，故四味藥材的揮發油采用輕油提取器提取。在揮發油的提取實驗中，筆者還比較了各藥分別提取和合提，對分提油量的總和與諸藥合提油量總和進行t檢驗，P>0.05，說明兩種方式提取揮發油沒有顯著性差異，從生產和節能降耗角度而言，確定選擇當歸、川芎、桂枝和川木香四味藥合提的方式。

在揮發油的提取中，曾考慮了采用正交試驗法，但又考慮到揮發油的提取試驗次數不是很多，況且單因素篩選法設計全面，數據可靠，結果可比性強，能分析出事物的內在規律，故最終確定本方揮發油的提取采用單因素篩選法。

在實驗中還發現轉速對揮發油的包合有一定的影響，因此采用了單因素篩選攪拌速度，最終確定以400r／min的轉速對揮發油進行包合。