藥對桂枝——羌活揮發油成分分析

摘 要：目的：分析藥對桂枝-羌活、單味藥桂枝和羌活的揮發油成分。方法：采用氣相色譜-質譜（GC-MS）檢測。通過化學計量學解析法對二維色譜/質譜數據進行解析，從而實現對藥對桂枝-羌活、單味藥桂枝和羌活的揮發油成分的分析。結果：藥對桂枝-羌活、單味藥桂枝和羌活分辨出的色譜峰，通過質譜庫對其進行定性，分別得到45、35和36個定性結果，占總含量的96.34%、95.76%和93.94%。結論：藥對揮發油成分主要來自于單味藥羌活，而化學成分種類基本上為2個單味藥的加和。

關鍵詞：藥對桂枝-羌活；揮發油；氣相色譜-質譜；化學計量學解析法

中圖分類號：R284.1文獻標識碼：A文章編號：1673-2197（2008）07-015-03

配伍理論是中藥復方的核心問題。藥對是中醫臨床上常用的、相對固定的兩個單味藥的配伍形式，是復方的最小組成單位。分析藥對中兩藥配伍后發生的化學變化和物理作用，可以闡明復方中藥物的配伍機理，剖析和理解復方，使之更好的應用于臨床。

桂枝-羌活為常用解表藥對［1］。桂枝散寒解表、溫經通脈、通陽化氣；羌活辛能發散、溫能祛寒、苦能燥濕，既能發表散寒，又能除濕止痛［2］。二藥伍用，辛溫發散，同氣相求，共奏通陽散寒解表之功。揮發油是解表藥對的有效成分［3］，藥對桂枝-羌活的揮發油成分尚未見報道。本文采用GC/MS法分離檢測藥對桂枝-羌活、單味藥桂枝和羌活的揮發油成分，利用化學計量學解析法（Chemometrics resolution method，CRM）［4~8］對重疊峰進行分辨，再憑質譜庫對分辨的純組分進行定性，用總體積積分法進行定量，并比較了單味藥與藥對的揮發油成分，討論了單味藥配伍后揮發油成分的變化。

1 材料與方法

1.1 儀器與藥品

儀器為QP2010型氣相色譜儀—質譜儀（日本島津公司）。藥材桂枝和羌活均購自湖南中醫藥研究院，經該院中藥研究所鑒定，分別為樟科植物肉桂(Cinnamomum cassia Presl)的干燥嫩枝﹑傘形科植物羌活(Notopterygium incisum Ting ex H.T.Chang)的干燥根莖及根。

1.2 揮發油的提取

藥對揮發油的提取：稱取干燥的桂枝（Ramulus cinnamomi，RC）和羌活（Rhizoma seu radix notopterygii，RsRN）各50g，置于1000 mL圓底燒瓶中，加水至700 mL。參照中國藥典2000年版揮發油提取法提取［9］。

單味藥揮發油的提取：分別稱取干燥的桂枝和羌活各50g，按照以上方法提取。

1.3 揮發油的測定條件

色譜條件：色譜柱OV-1(30m×0.25mm)。程序升溫：起始溫度40℃，以2℃/min升至130℃，保持5min，再以10℃/min升至230℃，維持15min。載氣：He，流速10mL/min進口溫度250℃，界面溫度280℃。

質譜條件：電子EI源，能量70eV。離子源溫度：230℃。倍增電壓：1.28KV。掃描范圍40~600amu，掃描速率：38scans/s。溶劑延遲2min。

1.4 數據分析

數據分析在PentiumШ850（Intel）計算機上進行，程序用Metlab6.1編寫，所分辨的質譜在NIST標準質譜庫中檢索。

2 結果與討論

2.1 揮發油成分的定性分析

圖1為藥對桂枝-羌活和桂枝﹑羌活的揮發油成分GC/MS檢測的總離子圖（TIC），其中部分色譜峰產生重疊。以圖1(a)中的峰簇A（保留時間為50.6~51.2min，放大為圖2）為例說明CRM的應用。

由圖2可見，峰簇A由兩個色譜峰組成，但每個色譜峰都不平滑。若直接從色譜庫中進行檢索，峰簇A中左邊的色譜峰是isoaromadendrene epoxide，其相似度為75%；右邊部分是epiglobulol，其相似度為74%。該峰簇左半部分與右半部分的不同位置檢索結果均不相同，且相似度都較低，這說明峰簇A是一個重疊峰。這種重疊峰直接從色譜庫中進行檢索的定性結果，其可靠程度和準確度都較低，也難以進行定量分析。

利用CRM分析，結果表明峰簇A是一個三組分體系（圖3）。根據各組分的純色譜曲線和質譜，再將它們與NIST標準庫進行匹配，可檢索到三種化合物1、2和3，分別為nerolidyl acetate、1-hydroxy-1、7-dimethyl-4-isopropyl-2、7-cyclodecadiene和spathulenol、相似度分別為9361%、95.1%和97.35%，相對含量分別為0.21%，0.45%和02%。其相應的標準質譜與解析所得的質譜圖如圖4~6所示。由于得到的是純組分的質譜，定性結果更準確可靠。

類似地，對桂枝-羌活揮發油總離子流圖中，其它保留時間段的色譜與桂枝和羌活揮發油總離子流圖，利用CRM逐個進行解析，可得到解析出的組分的質譜，再用質譜庫對分辨出的組分進行定性檢索，得到組分定性結果。桂枝-羌活﹑桂枝和羌活揮發油定性鑒定的組分分別為45、35和36個。

2.2 揮發油化學成分的定量分析

對解析后的所有色譜采用總體積積分法積分，可得到各組分的定量分析結果，藥對桂枝-羌活，桂枝和羌活定性組分含量分別占總含量的96.34%、95.76%和93.94%。三者的揮發油主要化學成分(含量≥0.10%)見表1。

2.3 藥對與單味藥之間揮發性成分的比較與分析

從表1可見，桂枝揮發油主要成分是Benzylidenemalonaldehyde、alpha.-Pinene、Camphene、D-Limonene、alpha.-Muurolene；羌活揮發油主要成分是alpha.-Pinene、L-.beta.-pinene、D-Limonene、gamma.-Terpinen、beta.-Cymene、alpha.-Terpineol、L-4-terpineol；藥對桂枝-羌活揮發油主要成分為Benzylidenemalonaldehyde（36.71%）、alpha-Pinene（12.6%）、L-.beta.-pinene（7.12%）、alpha.-Terpineol（6.18%）、L-4-terpineol（4.79%）、D-Limonene（4.62%）、Borneol（2.73%）。比較可知，藥對桂枝-羌活揮發油成分主要來自于單味藥羌活，但化學成分種類基本為2個單味藥的加和，單味藥揮發油成分的含量在藥對中發生了變化。

3 結論

（1）藥對揮發油成分主要來自于單味藥羌活，但化學組分種類基本為2個單味藥的加和，單味藥揮發油成分的含量在藥對中發生了變化。

（2）藥對桂枝-羌活揮發油主要成分為Benzylidenemalonaldehyde（36.71%）、alpha.-Pinene（12.6%）、L-.beta.-pinene（7.12%）、alpha.-Terpineol（6.18%）、L-4-terpineol（4.79%）、D-Lim-onene（4.62%）、Borneol（2.73%）。

參考文獻：

［1］ 譚同來，劉慶林.常用中藥配對與禁忌［M］.太原：山西科學技術出版社，2004：55~56.

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［3］ 沈映君.中藥解表方藥研究［M］.北京：中醫藥科技出版社，2005：198~199.

［4］ Kvalheim O M，LIANG Yi-zeng.Heuristic evolving latent projections-resolving 2-way multicomponent data.1.Selectivity，latent-projective graph，datascope，local rank and unique Resolution ［J］.Anal Chem，1992，64(8)：936~946.

［5］ LIANG Yi-zeng，Kvalheim O M，Keller H R，etal.Heuristic evolving latent projections-Resolving 2-way multicomponent data.2.Detection and resolution of minor constituents ［J］.Anal Chem，1992，64(8)：946~953.

［6］ LI Xiao-ru，LIANG Yi-zeng，GUO Fan-qiu.Analysis of volatile oil in rhizoma ligustici chuanxiong radix paeoniae rubra by gas chromatography mass spectrometry and chemometric Resolution ［J］.Acta Pharm Sinica，2006，27(4)：491~498.

［7］ GONG Fan，LIANG Yi-zeng，CHOU Fou-tian.Combination of GC-MS with local resolution for determining volatile components in si-wu decoction ［J］.J Sep Sci，2003，26(1/2)：112~122.

［8］ LI Xiao-ru，LAN Zheng-gang，LIANG Yi-zeng.Analysis of the volatile chemical constituents of Radix Paeoniae Rubra by GC-MS and chemometric resolution ［J］.J Cent South Univ Technol，2007，14(1)：57~61.

［9］ 中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)［M］.北京：化學工業出版社，2000：64.

（責任編輯：姜付平）