封閉抗體和抗心磷脂抗體與復發性流產的相關性研究

劉偉，農翠茴，馬麗輝，

（1.三亞市婦幼保健院婦產科，海南 三亞 572000；2.汕頭大學醫學院，廣東 汕頭 515000；3.三亞市婦幼保健院檢驗科，海南 三亞 572000；4.三亞市人民醫院風濕免疫科，海南 三亞 572000）

封閉抗體和抗心磷脂抗體與復發性流產的相關性研究

劉偉1，2，農翠茴3，馬麗輝2，4，

（1.三亞市婦幼保健院婦產科，海南 三亞 572000；2.汕頭大學醫學院，廣東 汕頭 515000；3.三亞市婦幼保健院檢驗科，海南 三亞 572000；4.三亞市人民醫院風濕免疫科，海南 三亞 572000）

目的 探討封閉抗體和抗心磷脂抗體與復發性流產的相關性，尋找復發性流產的病因。方法選取2014年6月至2016年6月三亞市婦幼保健院收治的120例有復發性流產史婦女為觀察組，120例健康經產婦為對照組。采用ELISA法檢測兩組受檢者的封閉抗體和抗心磷脂抗體，采用χ2檢驗比較兩組受檢者中抗體的表達率；采用診斷試驗評價的靈敏度、特異度和受試者工作曲線(ROC)方法，定量反映兩種抗體表達對育齡期婦女復發性流產的預測情況。結果觀察組婦女的血清封閉抗體陰性率為85.8%，明顯高于對照組的30.0%，差異有顯著統計學意義(P＜0.01)；觀察組婦女的血清抗心磷脂抗體陽性率為19.2%，高于對照組的4.2%，差異亦有顯著統計學意義(P＜0.01)；觀察組的血清封閉抗體陰性+抗心磷脂抗體陽性為11例，占9.17%，高于對照組的0.83%，差異有顯著統計學意義(P＜0.01)；經診斷試驗評價，血清封閉抗體陰性、抗心磷脂抗體陽性或兩者聯合對育齡期婦女復發性流產預測的靈敏度(85.8%、19.2%、9.2%)、特異度(70.0%、95.8%、99.2%)和ROC曲線下面積(0.779、0.575、0.542)有明顯差異。結論育齡期婦女的血清封閉抗體缺失或抗心磷脂抗體增高與復發性流產密切相關，尤其是前者。在臨床中應重視免疫抗體的檢測及治療，減輕育齡期婦女因反復流產帶來的心理、身體傷害及社會醫療負擔。

封閉抗體；抗心磷脂抗體；復發性流產

復發性流產(recurrent spontaneous abortion，RSA)是指與同一性伴侶連續發生3次或3次以上的自然流產，即孕28周前自行終止妊娠，胎兒體質量＜1 kg。近年來育齡期婦女合并RSA的發生率呈現逐年增高的趨勢，研究發現免疫紊亂是導致RSA的重要原因，約占全部RSA的50%以上[1]。免疫紊亂表現為育齡期婦女的血清自身免疫抗體抗心磷脂抗體(ACA)陽性率或自身免疫抑制抗體封閉抗體(BA)陰性率增高。本研究通過檢測RSA婦女與健康經產婦的血清封閉抗體和抗心磷脂抗體，探討兩種抗體與RSA的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年6月至2016年6月三亞市婦幼保健院收治的120例RSA育齡期婦女為觀察組，年齡19～43歲，平均29.4歲，均進行常規病因檢查，排除因夫妻雙方染色體異常或母兒血型不合因素發生的自然流產。選取同期來我院體檢的120例健康經產婦作為對照組，平均年齡29.9歲(范圍21～42歲)，均無不孕不育史以及反復流產病史且已經生育一個正常子女。觀察組的文化程度大學46例，高中52例，初中22例；對照組大學42例，高中49例，初中29例。兩組研究對象的年齡、學歷等一般資料比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 標本采集 采集住院患者與體檢經產婦清晨靜脈血3 mL，離心析出血清。樣本收集后從凝血中分離血清，按照NCCLS文件H18-A2建議進行樣本保存。

1.2.2 實驗儀器及試劑 測定儀器用BioTek ELX800酶標儀，輔助儀器用精宏三用恒溫水槽DK型、TECAN Freedom EVOlyzer全自動酶免分析一體機。封閉抗體檢測試劑盒-ELISA法試劑由美國萊姆德公司生產，購自北京索奧生物技術有限公司；抗心磷脂抗體檢測試劑盒為INOVADiagnostics公司產品。

1.2.3 封閉抗體及抗心磷脂抗體檢測 檢測過程嚴格按照試劑盒說明書進行操作和結果的判讀。

1.3 統計學方法 應用SPSS18.0版統計軟件進行數據分析，計數資料采用χ2檢驗。為進一步探討兩種抗體表達與育齡期婦女合并RSA的相關性，采用診斷試驗的靈敏度、特異度和受試者工作曲線(ROC)法計算各個抗體表達及聯合表達預測RSA的曲線下面積(Az)。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組血清抗體的檢測情況 觀察組患者的封閉抗體陰性率為85.8%，明顯高于對照組的30.0%，差異有統計學意義(χ2=76.741，P＜0.001)。觀察組的抗心磷脂抗體陽性率為19.2%，亦顯著高于對照組的4.2%，差異有統計學意義(χ2=13.100，P＜0.001)。觀察組的血清封閉抗體陰性+抗心磷脂抗體陽性為11例，占9.17%，高于對照組的0.83%，差異有統計學意義(χ2=8.772，P=0.003)，見表1。

表1 兩組血清封閉抗體和抗心磷脂抗體陽性率的比較(例)

2.2 兩種血清抗體對RSA預測的靈敏度、特異度和ROC曲線下面積比較 封閉抗體陰性預測RSA的靈敏度、特異度和ROC曲線下面積Az分別為85.8%、70.0%和0.779(P＜0.001)；抗心磷脂抗體陽性預測RSA的靈敏度、特異度和ROC曲線下面積Az分別為19.2%、95.8%和0.575(P=0.045)；封閉抗體陰性+抗心磷脂抗體陽性預測RSA的靈敏度、特異度和ROC曲線下面積Az分別為9.2%、99.2%和0.542(P=0.265)，表明封閉抗體陰性育齡期婦女預測RSA的靈敏度較高，而抗心磷脂抗體陽性和兩者聯合預測RSA的特異度更高，見圖1。

圖1 兩種血清抗體及組合對RSA預測的ROC曲線

3 討 論

研究表明，育齡期婦女合并RSA的原因除染色體、解剖、內分泌、感染等不良因素外，機體的免疫紊亂是主要原因之一[2]。抗心磷脂抗體是以血小板和內皮細胞膜上帶負電荷的心磷脂作為靶抗原的一種自身抗體。研究發現，血清抗心磷脂抗體陽性育齡期婦女妊娠容易合并胎盤血管內皮損傷、血栓形成以及胎盤梗阻的病理改變[3-5]。封閉抗體是人類白細胞抗原(HLA)、滋養層及淋巴細胞交叉反應抗原(TLX)等刺激母體免疫系統產生的一類IgG型抗體[6-7]，它可以與來自父系的抗原相結合，阻止母體Th細胞識別胎兒抗原，誘發對胚胎的攻擊[8-11]。

本文結果顯示，觀察組的血清封閉抗體陰性率高達85.8%，而健康經產婦的血清封閉抗體陰性率僅為30.0%，說明RSA患者中血清封閉抗體顯著缺失；同時，觀察組的血清抗心磷脂抗體陽性率為19.2%，亦較對照組的4.2%有明顯升高。這一結果與盧巧云等[12]報道RSA婦女血清的封閉抗體陰性率89.0%與抗心磷脂抗體陽性率19.0%基本接近，與該作者報道的RSA婦女血清封閉抗體陰性率和抗心磷脂抗體陽性率均高于正常分娩者的結論亦完全一致。李相新等[13]于2015年報道了在RSA患者、繼發性不孕患者和正常生育產婦3種不同育齡婦女人群中血清封閉抗體和抗心磷脂抗體的檢測結果，顯示RSA組的血清封閉抗體陰性率為88.00%，均高于其他兩組，且RSA組的血清總抗心磷脂抗體陽性率為17.33%，介于繼發性不孕組和正常生育產婦組之間；該研究認為育齡期婦女的血清封閉抗體和抗心磷脂抗體與復發性流產密切相關。通過現有文獻報道，我們可以明確進行上述兩種自身抗體的檢測并及時采用合適的治療方法是防治復發性流產的有效措施。

本研究為進一步了解兩種自身抗體檢測的預測價值，采用診斷試驗評價中的靈敏度、特異度和受試者工作曲線(ROC)法來計算兩種抗體表達及聯合表達對復發性流產的預測能力。經過計算，封閉抗體陰性預測RSA的靈敏度較高但特異度低；而抗心磷脂抗體陽性以及兩者聯合預測RSA的特異度更高，達95%以上；ROC曲線下面積則提示育齡期婦女的血清封閉抗體陰性的綜合檢測能力略高。針對該結果參考文獻報道，鮑時華等[14]提出應針對抗心磷脂抗體進行多次檢測，必要時應進行5次以上的測定，否則容易出現漏診；而本研究未對抗心磷脂抗體進行多次檢測，這可能也是抗心磷脂抗體陽性以及兩種抗體聯合預測RSA的靈敏度偏低的原因。

綜上所述，育齡期婦女的血清封閉抗體缺失和抗心磷脂抗體陽性與RSA關系密切，尤其是前者，需引起臨床上的廣泛重視，并積極進行檢測，做到提前預防和治療，提高育齡期婦女的妊娠率。

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Relationship between blocking antibodies and anti-cardiolipin antibodies in recurrent spontaneous abortion.

LIU Wei1,2,NONG Cui-hui3,MA Li-hui2,4.1.Department of Gynaecology and Obstetrics,Maternal and Child Health Care Hospital of Sanya,Sanya 572000,Hainan,CHINA;2.Shantou University Medical College,Shantou 515000,Guangdong, CHINA;3.Department of Clinical Laboratory,Maternal and Child Health Care Hospital of Sanya,Sanya 572000,Hainan, CHINA;4.Department of Rheumatology,Sanya Municipal People’s Hospital,Sanya 572000,Hainan,CHINA

ObjectiveTo investigate the relationship between blocking antibodies and anti-cardiolipin antibody in recurrent spontaneous abortion,and find the causes of recurrent spontaneous abortion.MethodsFrom June 2014 to June 2016,120 women with recurrent spontaneous abortion history were selected as the study group,and 120 healthy non-pregnant parous women were recruited as the control group,who were given blocking antibody detection and anti-cardiolipin antibody detection by ELISA method.The negative rate of blocking antibodies and positive rate of anti-cardiolipin antibody were compared by the chi-square test,and sensitivity,specificity and receiver operator characteristic curve(ROC)were used to calculate and compare the prediction ability of the two antibodies for recurrent spontaneous abortion.ResultsBlocking antibody negative rate of the study group were significantly higher than that in the control group(85.8%vs 30.0%,P＜0.001).Anti-cardiolipin antibody positive rate of the study group were significantly higher than that in the control group(19.2%vs 4.2%,P＜0.001).The rate of blocking antibody negative and anticardiolipin antibody positive in the study group was 9.17%(11 cases),which was significantly higher than 0.83%in the control group(P=0.003).According to diagnostic test evaluating,the sensitivity(85.8%vs 19.2%vs 9.2%),specificity(70.0%vs 95.8%vs 99.2%)and area under the curve(0.779 vs 0.575 vs 0.542)showed significant difference among blocking anti-bodies negative,anti-cardiolipin antibody positive,and the combination of the two.ConclusionBlocking antibody negative and anticardiolipin antibody positive in women are closely related to the recurrent spontaneous abortion,especially the former.We should strengthen the detection and treatment in clinic,so as to reduce the psychological and physical damage,and social medical burden of women of childbearing age due to repeated abortion.

Blocking antibodies;Anticardiolipin antibodies;Recurrent spontaneous abortion

R714.21

A

1003-6350（2017）04-0597-03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.04.026

2016-09-20)

馬麗輝。E-mail：marymlh@sina.com