太極拳運動對大學生外周血Ｔ細胞亞群的影響

摘要：為了探討太極拳運動對大學生細胞免疫功能的影響。以60名身體健康的大學生隨機分為實驗組和對照組，實驗組每周進行太極拳運動3次，而對照組不進行太極拳運動。12周后采取外周血，用雙色法流式細胞術檢測T細胞亞群變化。結果顯示，實驗組在實驗后外周血Th細胞、Th1細胞以及Th與Tc、Th1與Th2細胞比值明顯高于實驗前和對照組(P<0.05)，說明規律性太極拳運動可增強大學生的細胞免疫功能，促進T細胞亞群向Th1細胞分化。

關鍵詞：太極拳；大學生；T細胞亞群

ffects of shadowboxing exercise on T cell subpopulation in peripheral blood of college students

PANG Yang-kang1，LIU Fang2

（1.Department of Physical Education；2.Department of Medical Immunology，

Guangdong Medical College，Zhanjiang 524023，China）

Abstract: In order to probe into the effects of shadowboxing exercise on cellular immune functions of college students， the authors divided 60 physically healthy college students randomly into an experiment group that did shadowboxing exercise 3 times a week and a control group that did not do shadowboxing exercise， sampled their peripheral blood 12 weeks later and tested the change of T cell subpopulation by means of twin color flow cytometry， and revealed that after the experiment the ratios of Th cells to Th1 cells， Th cells to Tc cells， and Th1 cells to Th2 cells in peripheral blood of students in the experiment group are significantly higher than those of students before the experiment and in the control group (P<0.05)， which indicates that regular shadowboxing exercise can enhance cellular immune functions of college students， and promote the change of T cell subpopulation into Th1 cells.

Key words: shadowboxing；college student；T cell subpopulation

一般認為適度的運動可強身健體，提高機體免疫力，而過度運動可引起免疫抑制。太極拳運動可調整機體中樞神經系統機能活動，促進循環系統功能，提高免疫功能，調和陰陽平衡及影響生化、代謝、內分泌功能等作用[1]。太極拳運動可明顯提高中老年人的體液和細胞免疫功能，簡化太極拳運動可增強高年級女大學生的體液免疫應答，但有關其對大學生細胞免疫功能影響的報道較少[2-4]。本研究用雙色法流式細胞術檢測了30名在校大學生經過12周太極拳運動后外周血T細胞亞群變化，旨在觀察規律性太極拳運動對健康大學生細胞免疫功能和Th、Tc細胞分化的影響，探討太極拳運動對正常機體免疫系統的作用機制，為在大學中廣泛開展太極拳運動和增強防病祛病效果提供理論依據。

1研究對象與方法

1.1研究對象

隨機選取廣東醫學院2005級臨床醫學系本科生60人，男女各半，平均年齡(20.6±0.7) 歲，平素身體健康，無自身免疫性疾病個人史和家族史，無規律性運動習慣。60人再隨機分為實驗組和對照組，每組30人，男女各15人。實驗組每周進行太極拳運動3次，每次運動時間為60 min(包括準備活動10 min，太極拳運動40 min，放松活動10 min)，持續12周，實驗期間不參加其他體育活動。對照組在實驗期間不參加太極拳運動和其他體育活動。實驗期間，兩組均不接受免疫性疾病治療。

1.2試劑和儀器

Cy5標記抗CD4、CD8單抗為EB公司產品，PE標記的抗CRTH2單抗為Miltenyibiotec公司產品；EPICS-XL流式細胞儀為Beckman公司產品；T細胞分離富聚柱(hCD3⁺ T Cell Enrichment Column)為BD公司產品；淋巴細胞分離液為AXIS-SHIELD公司產品。

1.3研究方法

1)外周血T淋巴細胞分離：對照組和實驗組均在實驗前、實驗后12周抽取肘靜脈血5 mL，其中實驗組在最后1次運動后24 h內抽取，肝素抗凝，用淋巴細胞分離液分離單個核細胞。無菌玻璃培養皿37℃培養30 min，去除黏附于玻璃培養皿的單個核細胞，以獲取懸浮的淋巴細胞。加入質量分數為0.85％NH4Cl溶液溶解紅細胞，經T細胞分離富聚柱采用負篩選法獲得純化的T淋巴細胞，免疫組化法檢測其純度>98%，臺盼藍拒染法檢測其活性>95%。用含有20％小牛血清的RPMI1640培養液調整細胞濃度至2×10⁶/L。

2)T淋巴細胞亞群的測定：取3支試管，各加入100 μL T淋巴細胞懸液，再分別加入20 μL鼠抗人單克隆抗體IgG1-PE和IgG1-Cy5(陰性對照)、抗CD4-Cy5和抗CRTH2-PE(CD4+細胞）、抗CD8-Cy5和抗CRTH2-PE(CD8⁺細胞)，混勻后4℃避光孵育30 min，PBS洗滌2次，各管加入0.5 mL緩沖液，流式細胞儀檢測。

1.4統計分析

數據用均數±標準差( x±s)表示，采用SAS 8.22統計軟件分析作成組t檢驗，P<0.05表示差異具有顯著性。

2結果

2.1外周血Th、Tc細胞

實驗組在實驗后外周血Th細胞百分率、Th與Tc細胞比值明顯高于實驗前和對照組(P<0.05)，而Tc細胞百分率無明顯變化(P>0.05)；對照組在實驗前后外周血Th和Tc細胞百分率、Th和Tc細胞比值無明顯變化(P>0.05)(表1)。

1)實驗組實驗前后比較，P<0.05；2)與對照組比較，P<0.05

2.2外周血Th、Tc細胞亞群

實驗組在實驗后外周血Th1細胞百分率和Th1與Th2細胞比值明顯高于實驗前和對照組(P<0.05)，而Th2、Tc1、Tc2細胞百分率和Tc1與Tc2細胞比值在實驗前后和兩組間的差異無統計學意義(P>0.05)(表2、表3)。

1)實驗組實驗前后比較，P<0.05；2)與對照組比較，P<0.05

3討論

太極拳運動作為全民健身的首選項目，有著獨特的保健機制和豐富的內容。太極拳運動可將用意與運氣、運勁三者自然結合，通過意守、調整呼吸使其逐步達到緩、細、深、長，給大腦皮層以良好的刺激，使大腦皮層得以發揮對機體內部的主導調節作用，從而調整中樞神經系統功能；此外，還具有調和陰陽平衡，提高機體免疫力，以及影響血液循環、代謝、內分泌功能等作用[1]。太極拳不屬于劇烈運動，對心血管系統和微循環的影響較為適中，適合于精神經常處于緊張狀態的亞健康人群[5]。有關太極拳運動對中老年人免疫功能的影響報道較多。規律性太極拳鍛煉可明顯增強中年人的活動功能、提高個人生活質量、增強調節性T細胞的功能[2]。可明顯提高老年人T、B淋巴細胞功能，增強機體的免疫力[3]。

由于太極拳是中強度的有氧運動，太極拳運動可調理大學生的睡眠，提高學習精力、心血管功能、身體素質，并可減輕身心緊張和精神壓力[5]。Wang等[6]發現太極拳運動對大學生身心健康產生積極的影響。研究顯示太極拳運動可明顯增強大學生的體液免疫功能。參加太極拳訓練的女大學生血清IgG含量比對照組高，但血清IgM、IgA水平在各組間的差異無顯著性[4]。劉艷環等[7]發現太極拳運動可明顯提高女大學生血清IgA和IgG水平，縮短上呼吸道感染的病程。此外，太極拳運動可明顯提高女大學生血清補體C3、C4水平和總補體活性，增強非特異性抗感染免疫，提高免疫應答水平[8]。然而，太極拳運動對大學生細胞免疫功能影響的報道較少。

Th細胞，即輔助性T細胞，可通過分泌多種細胞因子來調節機體的免疫應答。根據分泌細胞因子種類的不同，Th細胞可分為Th0、Thl、Th2亞群。初始CD4+T細胞(naive CD4+ T cell，Tn)經抗原刺激后首先分化為Th0細胞，隨后受細胞因子、抗原特性、激素等因素的影響，Th0在IL-2或IL-4作用下分別分化為Thl或Th2細胞。Th1細胞可分泌IL-2、TNF-α、IFN-γ等細胞因子，主要參與細胞免疫應答，在抗病毒和胞內細菌感染的免疫應答中發揮作用；Th2細胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13等細胞因子，與B細胞增殖、成熟及促進抗體生成有關，可增強抗體介導的體液免疫應答，在對過敏原和蠕蟲感染的免疫反應中起主要作用。近年來研究發現，人類CD8+T細胞至少也可分為Tc1、Tc2兩個亞群。Tc1與Th1相似，可分泌IL-2、IFN-γ等細胞因子；Tc2 與Th2相似，可分泌IL-4、IL-5、IL-10等細胞因子[9]。Mosmann等[10]將Th1和Tc1、Th2 和Tc2分別統稱為Th1類、Th2類細胞。Thl和Th2細胞為一對重要的調節細胞，又可互為抑制細胞，它們之間的相互平衡直接影響機體的免疫功能，且與疾病狀態密切相關[11]。

近年的研究認為CRTH2是檢測人Th2和Tc2特異性的表面標志[12]，本文應用PE標記的抗CRTH2單抗和Cy5標記的CD4、CD8作雙色法流式細胞術。在純化的外周血T細胞中，分別以CD4+T細胞、CD8+T細胞代表Th、Tc細胞，再以CRTH2區分Th1類和Th2類細胞。我們發現12周的太極拳運動(每周3次)可使大學生外周血Th細胞百分率及Th與Tc細胞比值明顯增加，而Tc細胞百分率無明顯變化；結果表明實驗組體內Th細胞數量顯著提高，提示規律性太極拳運動可促進機體正向免疫系統的平衡，增強機體的細胞免疫功能。另外，我們還發現實驗組外周血Th1細胞百分率明顯增加，Th1與Th2細胞比值顯著升高，但Th2、Tc1、Tc2細胞百分率和Tc1與Tc2細胞比值無明顯變化；結果表明實驗組體內呈明顯的Th1優勢，提示規律性太極拳運動可促進T細胞亞群向Th1細胞分化，機體抵抗細菌和病毒感染的能力得到明顯增強。

如何提高大學生的機體免疫力、增強其抗病能力是亟待解決的重要課題，也是體育教學的重要任務之一。本文的研究結果顯示：在大學生中推廣規律性太極拳運動可增強大學生的細胞免疫功能，促進T細胞亞群向Th1細胞分化，增強大學生的特異性和非特異性免疫應答，從而有利于增強機體的抗細菌和病毒感染能力。

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[編輯：鄭植友]