組培茅蒼術揮發油的氣相色譜質譜聯用分析

　　摘　要：目的：分析組織培養再生植株栽培后所得茅蒼術的根莖中所含揮發油的化學成分，對組織培養技術生產的茅蒼術藥材進行品質評價。方法：采用水蒸氣蒸餾提取法提取藥材揮發油，利用GC－MS聯用技術進行分析。結果：從組織培養再生植株栽培茅蒼術的根莖中鑒定出22個化合物。結論：組織培養技術所生產的茅蒼術主要含有β-桉葉醇、蒼術醇、蒼術素等成分，與野生茅蒼術所含成分沒有顯著差異。
　　關鍵詞：茅蒼術；氣質聯用；組織培養；揮發油
　　中圖分類號：R284　文獻標識碼：A
　　文章編號：1007—2349(2007)02—0039－02
　　茅蒼術Atractylodes lancea(Thunb．)DC．為菊科多年生草本植物，根莖作蒼術人藥，臨床應用廣泛。采用組織培養技術進行其快速繁殖，可獲得大量再生植株，栽培后得到茅蒼術組培藥材，利用GC—MS聯用技術進行分析，從而對組織培養技術能否應用于茅蒼術藥材生產進行初步評價。
　　
　　1儀器和樣品
　　
　　1．1儀器與試劑
　　1．1．1儀器　HP5973－GC6890氣相色譜一質譜聯用儀；
　　1．1．2試劑　乙醚(分析純)。
　　1．2樣品　茅蒼術組培藥材：2004年4月于南京中醫藥大學藥用植物組織培養實驗室培育出茅蒼術試管苗，煉苗2～3天后移栽至江蘇省宜興市，10月采收。
　　
　　2實驗方法
　　
　　2．1揮發油的提取　將藥材洗凈，除去須根，放陰涼處干燥，粉碎，過80目篩。取樣品10g，置于500 ml圓底燒瓶中，加入200 ml蒸餾水，浸泡30min，用揮發油提取器按水蒸氣提取法提取至油量不再增加。所得揮發油為褐色，有濃烈香氣，用乙醚定容至2 ml，備用。
　　2．2 GC－MS分析條件　色譜柱：HP 5MS(30m×0．32mm，0．25μm)彈性石英毛細管柱；程序升溫：初始溫度60℃，保持5min，以5℃／min的速率升溫至230℃，保持20min；分流進樣，分流比為20：1，流速為1μl／ml；進樣口溫度250℃；倍增器電壓：1600V；溶劑延遲：4min。
　　
　　3結果
　　
　　按上述的GC—MS條件對揮發油進行分析，得到總離子流圖，見圖1。
　　對總離子流圖中的各峰經質譜掃描后得到質譜圖，經過質譜計算機數據系統檢索，人工譜圖解析，按各色譜峰的質譜裂片圖與文獻核對，查對有關質譜資料，對基峰、質核比和相對豐度進行直觀比較，同時對一些主要組分采用標準物質對照，分別對各色譜峰加以確認，綜合各項分析鑒定，確定出組培茅蒼術揮發油中的化學成分。
　　從組培茅蒼術中分離出71個色譜峰，鑒定出22個成分，采用氣相色譜數據處理系統，以面積歸一化法獲得揮發油各組分相對百分含量，主要成分見表1。
　　
　　
　　4討論
　　
　　在鑒定出的組分中，組培茅蒼術主要含有β－桉葉醇(14．304％)、蒼術素(5．167％)、蒼術醇(3．216％)^[1～3]、4，11～桉葉二烯(1．603％)、7－苯基－2－庚烯－4，6－二炔－1－醇(22．676％)等成分。其中前三者已有多數文獻報道，但在相對含量上有較大差異。其他如棕櫚酸^[4](0．616％)、γ一欖香烯^[5](0．412％)、亞油酸^[4](0．286％)、石竹烯^[5～6](0．282％)、愈創醇^{[2，4，]}(0．266％)、葎草烯^{[1，2，5，]}(0．216％)、石竹烯氧化物^[6](0．186％)、欖香醇^{[1～3，5～6]}(0．012％)、α－蒎烯^{[1～3，6]}(0．012％)、α一水芹烯^{[1～3，5～6]}(0．012％)等成分也有報道。萜醇類組分和倍半萜烯類組分在揮發油中相對含量較高，另含有少量苯、苯酚類化合物。
　　組培茅蒼術的主要化學組分與野生茅蒼術所含的主要成分相似，但在含量上有一定的差異，因此組培茅蒼術是否能夠真正代替野生或栽培茅蒼術用于臨床還需要進一步的試驗進行驗證。
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