西雙版納產兒茶藥材兒茶素含量的測定

　　摘　要：目的：測定云南西雙版納產兒茶藥材中兒茶素的含量。方法：采用反相高效液相色譜法，以兒茶素為對照品。結果：按選定的色譜條件，兒茶素在0．6125～9．8μg范圍內線性良好，加樣回收率為99．6％，RSD為1．8％(n＝5)；兒茶樣品檢測含量在14．95～15．84％范圍內。結論：云南西雙版納產兒茶藥材兒茶素含量在15．37％左右，有很高的藥用價值和經濟價值。
　　關鍵詞：兒茶素；反相高效液相色譜法；西雙版納
　　中圖分類號：R927．2　文獻標識碼：A
　　文章編號：1007—2349(2007)02—0037－02
　　兒茶以豆科植物兒茶樹Acacia catechu(L)Willd去皮后的心材煎汁濃縮而成的干燥浸膏入藥。兒茶為云南特產的“南藥”，是我國民族藥中最早收載《中國藥典》的正品中藥之一。也是我國歷史上有記載的進口“南藥”品種之一。《中國藥典》^[1]收載兒茶的功能是收濕生肌斂瘡。主治潰瘍不斂，濕疹，口瘡，跌打傷痛，外傷出血。兒茶素類化合物具有明顯的清除體內自由基、阻斷N－亞硝基化合物形成、抑制脂氧化酶活性和脂質過氧化物作用，并有防突變、防癌等藥理活性。
　　兒茶在國外主產于印度、印尼及緬甸；國內主產于云南西雙版納，廣西有少量栽培。兒茶主要含有兒茶鞣酸(Catechutannic acid)20％～50％，兒茶素(d－catechin)2％～20％，表兒茶素(epicatechin)，兒茶紅(Catechred)，槲皮素，樹膠等^[2]。西雙版納傣族稱兒茶為“西謝”(傣語)，有悠久的栽種歷史。為了更好地開發利用，筆者用反相高效液相色譜法^[3～5]，按選定的色譜條件，對云南西雙版納產區兒茶藥材6批市售來源的兒茶膏以及自制的兒茶膏進行了兒茶素含量測定。
　　
　　1儀器與試藥
　　
　　島津LC－20AT(二元泵，無柱溫箱，溫度主要靠空調調節)；電子分析天平FA2004200g／0．1mg(上海衡平儀器廠)；對照品(+)－CATECHIN98％(SIGMA)；乙腈(HPLC級，美國天地)；甲醇(HPLC級，美國天地)；磷酸(分析純，國產)；0．45um微孔過濾膜。自制兒茶樣品于2005年12月18日采自云南省西雙版納州景洪市景哈哈尼族鄉的兒茶樹熬制而成，經本所彭朝忠主管技師鑒定為豆科植物兒茶樹Acaciacatechu(L．)Willd。6批市售兒茶購于西雙版納。
　　
　　2方法與結果
　　
　　2．1色譜條件　色譜柱：Phenomenex Luna 5uC一18，250mm 4．6ram；流動相：A：0．1％HPO，B：CAN(85：15)；檢測波長：275nm；流速：1．0ml／min；進樣量：20ul，梯度洗脫，時間24min。理論板數按兒茶素峰計算大于4000。
　　2．2兒茶膏的提取　兒茶樹砍伐后，除去邊材，將心材截成段，削切為長約10cm，厚1cm的薄片，放入鋁鍋(忌用鐵鍋)，加8倍量的水煎熬7h，當液體由棕紅色變成紫黑色時，用紗布過濾，過濾液濃縮至稀薄漿狀時，改用文火蒸干，以免碳化。浸膏用竹片攪拌，挑起能拉絲時停火，取出晾干即成兒茶膏。
　　2．3供試品制備　精密稱取兒茶膏樣品粉末80mg，置于100ml容量瓶內，加50％甲醇約80ml，超聲20min，放冷至室溫，加50％甲醇至刻度，搖勻即成濃度為800ppm的供試品。取1．5～2．0ml供試品置離心試管內，于12，000轉／分鐘轉速下離心10min，取上清液進樣檢測。
　　2．4標準曲線制作　(1)精密稱取catechin標準品25mg放入50ml容量瓶，加50％甲醇約40ml，超聲至全溶。放冷至室溫，加50％甲醇至刻度，充分震蕩搖勻；(2)倍比稀釋，可得一系列對照品溶液：500ppm、250ppm、125ppm、62．5ppm、31．25ppm分別進樣檢測，以濃度為X軸，以標準樣出峰面積積分值為Y軸作圖，得一直線。結果表明：兒茶素在O．6126～9．8μg范圍內線性良好，回歸線方程為Y＝14097X+38106，
　　R²＝0．9999。取同一濃度的樣品反復進樣檢測，兒茶素峰面積積分值的RSD為2．1％；檢測的重現性兒茶素保留時間和含量的RSD分別為3．5％、0．9％。對照品與樣品色譜圖見圖1。
　　2．5樣品含量檢測　按選定的檢測方法，對采集來的云南西雙版納產區6批市售來源的兒茶藥材兒茶膏以及自制的兒茶膏進行了兒茶素含量測定，其檢測結果見圖2，表1。
　　
　　注：圖譜1B與自制3號樣品對應，圖2與市售1號樣品對應
　　
　　3討論
　　
　　從表1中可以看出，實驗室自制的兒茶膏(高溫干燥)的兒茶素含量只有10．08％，而未經高溫干燥的兒茶素含量達16．74％，兩者含量差異很大，可能是因為兒茶素在高溫作用下發生了某些變化，因此，在制作兒茶膏時，要防止高溫使兒茶素含量降低。購買的西雙版納的兒茶樣品兒茶素含量在14．95～15．84％范圍內，其兒茶素平均含量在15．37％左右，有很高的藥用價值和經濟價值，有待于進一步開發利用。
　　當地傣族民間在熬制兒茶膏的過程中，一是用鐵鍋煎熬，二是溫度控制不好，容易碳化，含量降低，這些都是由于加工不規范所造成的，因此要不斷加大對兒茶藥材的開發研究，規范化生產。
　　我國兒茶藥材資源日益減少，建議加強栽培推廣。據文獻報道，過去我國西雙版納勐臘、景洪兩地的海拔500～600m地區有大面積人工栽培^[1]。近2年經實地調查了解到，因其它熱帶經濟作物的開發而將原來種植的兒茶樹砍伐，西雙版納兒茶樹的種植面積大為減少。
　　兒茶是《中國藥典》中較少收入的提煎膏品種之一，在民間防病治病中應用較廣，特別是少數民族地區，遠遠超出《中國藥典》的范疇，是西雙版納特有的民族藥，在傣藥產業開發中，應充分利用兒茶資源，加強兒茶產品的開發研究，以推動民族醫藥的發展。
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