基于計算生物學的含何首烏中成藥藥物性肝損傷機制研究

中圖分類號：R285 文獻標志碼：A 文章編號：1002-4026（2025）04-0014-14

Abstract：Drug-inducedliver injury（DILI）is one of themost common adverse drug reactions.Therefore，using computational biologyandartificial inteligencemodeling toexplorethematerialbasisandmechanismsunderlyingadverse drugreactions fromtraditional Chinese medicine compoundsisof great significanceinenhancing thesafetyof clinical medication.Inthisstudy，weretrievedthechemicalcompostionandtargetinformationofCompoundPolygonummulifoum andRehmanna glutinosa Pils（CPRP），along withDILI-relatedtargets.ACPRP-DILIprotein-proteininteractionnetwork containing362nodesand1518interactions wasconstructedbasedonthis information.Geneontologyanalysis indicated that in terms of molecular function CPRP-DILIprimarily involves reactionstochemical substances，chemical stimuli，andorganic compounds.Cellular componentsare primarily localized to the extracelularregion，plasma membrane，and cellsurface.The biological processes of CPRP-DILIinvolve thebinding of enzymes，proteins，smallmolecules，and signaling receptors.Kyoto encyclopedia of genesandgenomes signaling pathway analysis revealed the involvement of the Pl3K-Akt and MAPK signalingpathways.The keymiRNAs inthe miRNAregulatory network include hsa-mir-34a-5pand has-mir-155-5p.The HubGenes of the two core subnetworks include AKT1，CTNNB1，MAPK3， HIF1A，JUN，TP53，and STAT3.The Clinical drugs associated withDILl includeantitumordrugs，nonsteroidalanti-nflammatorydrugs（NSAIDs），andimmunosuppressants. Fourteen high-risk DILIcompounds were predicted tobe present in CPRP，including emodin，rhein，andgalicacid.The chemicalcomponents in CPRP mayafect certain biological pathways in susceptible populations，interfering with hepatic angiogenesisandautophagybalance，therebyimpeding liverrepair processesand exacerbatingliver injury.Thechemical compoundsmayalsoexhibitcross-hepatotoxicitywith pyrimidine-containingantitumordrugs，NSAIDs，and immunosuppressants，suggesting thatcautionis needed when co-administering CPRP with the aforementioned drugs in clinical settings.

KeyWords：drug-induced liverinjury；Polygonummultiflorum；CompoundPolygonummulifoumandRehmannia glutinosa Pills； computational biology； angiogenesis

藥物性肝損傷（drug-induced liver injury，DILI）是指藥物在使用過程中，因藥物本身或其代謝物或由于特殊體質對藥物的超敏感性或耐受性降低所導致的肝臟損傷，亦稱藥物性肝病[1]。DILI是最常見和最嚴重的藥物不良反應之一，目前上市的明確可引起DILI的藥物超過1100種。DILI在發達國家發病率介于十萬分之一至十萬分之二十之間，在我國的發病率約十萬分之二十四，已成為不容忽視的嚴重公共衛生問題[2]。

中藥復方具有多成分作用的系統性特點，這使得對其不良反應的研究具有特殊性。系統藥理學和人工智能的發展促進了多學科組學技術的應用融合，其研究思路正符合中藥復方多成分作用的系統性特點[3]。計算生物學結合人工智能模型通過預測藥物的藥動學特征，基于藥物屬性探索中藥復方不良反應的隱含規律，挖掘中藥復方不良反應的物質基礎和作用機制，對于提升臨床用藥安全性具有重要意義[4]。

近年來國內外關于中藥不良反應的報道逐漸增多，臨床報道13種生首烏及37種含制首烏的中藥制劑致 DILI案例，炮制前后、正常或超常規用量均有發生[5]。何首烏及其制劑的活性成分繁多且作用機制復雜，目前認為其致 DILI的成分包括蒽醌類、二苯乙烯苷、鞣質、沒食子酸等，另外還存在各主要化合物間協同作用[6]，涉及機制包括代謝酶缺陷、代謝循環受阻、特異質免疫損傷等，其物質基礎和毒效機制仍存在爭議[7]。

本文以含何首烏中藥制劑復方首烏地黃丸（CPRP）為例，基于計算生物學相關理論，結合人工智能模型的預測方案，建立CPRP 成分的化學結構、基因靶標與不良反應之間聯系，預測 CPRP致 DILI可能的作用機制、物質基礎和關聯藥物集，為含何首烏制劑的不良反應研究提供新的策略和方法。

數據庫與軟件

HERB 數據庫（htp：//herb.ac.cn/）; ETCM 數據庫（The Encyclopedia of Traditional Chinese Medicine，http：//www.tcmip.cn/ETCM/index.php/Home/）；中藥系統藥理學數據庫與分析平臺（TCMSP，TraditionalChinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform， htp：//tcmspw.com/tcmsp.php ）; GO數據庫（https：//geneontology.org/）;KEGG 數據庫（htps：//www.keg：jp/）;miRTarBase 數據庫（http：//mirtarbase.mbc.nctu.edu.tw/php/index.php）;Drugbank 數據庫（https：//go.drugbank.com/）; BATMAN-TCM 數據庫（A Bioinformatics Analysis Tool of Molecular Mechanism of Traditional Chinese Medicine，htp：//bionet.ncpsb.org/batman-tcm/）; UniProt 數據庫（htts：//www.uniprot.org/）; DAVID（htps：//david.Nciferf.gov/）;STRING（htps：//string-db.org/）； OMIM 數據庫（https：//omim.org/）; Genecards 數據庫（https：//www.genecards.org/）;DifferentialNet（htp：//netbio.bgu.ac.il/diffnet/）;SIGNOR（htp：//signor.uniroma2.it）; CTD 數據庫（Comparative Toxicogenomics Database，htp：//ctdbase.org/）; pkCSM（htps：//biosig.lab.uq.edu.au/）;vNN-ADMET（htps：//vnnadmet. bhsai.org/）; ADMET LAB 2.0（https：//admetmesh. scbdd.com/） ; ProTox-I（https：//tox-new.charite.de/）;ADMET SAR（htp：//mmd.ecust.edu.cn/admetsar2/）;eMolTox（htp：//xundrug.cn/） ;FUNRICH （http：//www.funrich.org/） ;Cytoscape 3.5.1 （http：//www.cytoscape.org）。

2 研究方法

2.1 CPRP活性成分的配體庫構建及靶點篩選

基于HERB、ETCM、TCMSP、BATMAN-TCM數據庫，檢索CPRP中制何首烏、熟地黃、酒女貞子、墨旱蓮的化學成分及靶點，獲取化合物SMILES格式，整理涉及的靶點信息。

2.2 DILI相關靶點篩選

以\"liver toxic”“hepatotoxicity”“drug-induced liver injury”為關鍵詞檢索 GeneCards 數據庫獲得 DILI 靶點;去除重復后利用UniProt 數據庫將相關靶點統一為官方名稱（OfficialGene Symbol）。

2.3 CPRP-DILI交集靶點蛋白

基于FUNRICH軟件獲取CPRP 活性成分的靶點蛋白與已篩選的 DILI 相關Gene Symbol（Relevancescore ?0.19 ）交集靶點蛋白。

2.4 靶點功能及通路注釋分析

R 軟件包clusterProfiler插件進行基因本體（GeneOntology，GO）及京都基因和基因組百科全書（KyotoEncyclopediaofGenesand Genomes，KEGG）通路富集分析。設定最小基因集為 5，Plt;0.05 和錯誤發現率（1 discovery rate，FDR） lt;0.25 被認為具有顯著性意義。

2.5 富集靶點蛋白相互作用及網絡構建

CPRP-DILI靶點基因映射至STRING數據庫，Network Analysis 插件進行網絡拓撲學分析，構建蛋白-蛋白相互作用網絡（protein-protein interaction networks，PPI）。

2.6 CPRP-DILI的miRNA調控網絡

基于 miRTarBase 數據庫和 Cytoscape 3.5.1 構建CPRP-DILI的 miRNA 調控網絡。

2.7 聚類分析篩選子功能模塊的HubGene

Cytoscape 3.5.1的MCODE 插件確定網絡的子模塊;CytoHubba插件依次選擇度數（Degree）、邊緣滲透分量（EPC）、最大鄰域分量（MNC）、最大集團中心性（MCC）和相似度（Closeness）算法計算子模塊的HubGene 。

2.8 HubGene相關臨床藥物的相似性

CTD 數據庫獲得與GPRP作用靶點相似的臨床藥物集合;基于RDKit使用Morgan拓撲指紋方法計算CPRP-DILI活性成分與相似臨床藥物集的化學結構相似性。

2.9 基于人工智能模型預測CPRP-DILI物質基礎

基于pkCSM、vNN-ADMETADMET LAB2.0、ProTox-II、ADMET SAR、eMolTox 等6種人工智能模型平臺或軟件預測CPRP-DILI物質基礎，聚類分析后以熱圖的形式將結果可視化。

3 結果與分析

3.1 CPRP活性成分及靶點

基于配體預測小分子與靶蛋白相互作用時，將不同數據庫互為補充以避免“活性懸崖問題”。圖1為幾個數據庫聯合分析韋恩圖，可以看出 HERB、ETCM、TCMSP、BATMAN-TCM數據庫去除重復后獲得1300 個靶點，包含共同靶點22個，如腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）、腫瘤蛋白p53（tumor protein p53，TP53）、雌激素受體（androgen receptor，AR）、信號傳導和轉錄激活因子3（signal transducer and activator oftranscription3，STAT3）、細胞間黏附分子-1（intercellular cell adhesion molecule-1，ICAM1）絲裂原活化蛋白激酶激酶激酶3（mitogen-activated protein kinase kinase kinase 3，MAPK3/ERK1） ?^v -src肉瘤（ v -src sarcoma，SRC）、缺氧誘導因子 1α （hypoxia-inducible factor 1-alpha，HIF1A）、原癌基因 JUN（protoc gene-oncogene c-Jun，JUN）、細胞核因子 κBp65 蛋白（nuclear factor kappa-B p65，RELA）、原癌基因FOS（FOS proto-oncogene，FOS）、熱休克蛋白 β -1（heat shock protein β -1，HSPB1）、B細胞 κ 輕肽基因增強子核因子抑制因子（inhibitorofkappa-lightpolypeptide gene enhancer in B-cells kinase beta，，IKBKB）雌激素受體 1/2 （estrogen receptor 1/2，ESR1/2）、連環蛋白 β1 （catenin beta1，CTNNB1）、人轉錄激活因子2（activating transcription factor2，ATF2）、絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶（ v -akt murine thymoma viral oncogene homolog 1，AKT1）、鼠雙微體 2（murine double minute 2，MDM2）、細胞窖蛋白-1（caveolin-1，CAV1）、血管內皮生長因子A（vascular endothelial growth factor A，VEGFA）等。

圖1中藥數據庫聯合分析韋恩圖

Fig.1Venn diagram depicting the conjoint analysis of traditional Chinese medicine databases

3.2 CPRP-DILI關鍵靶點的PPI網絡

GeneCards、DrugBank 數據庫檢索并去重復項后獲得DILI相關靶點700個，CPRP-DILI交集靶點362個，涉及活性化合物47個。構建CPRP-DILI的PPI網絡（見OSID開放科學數據與內容）包含362個節點和1518條相互作用關系，網絡拓撲學分析顯示網絡平均介數 =0.424 ，平均度值 =8.41 plt;1.0×10^-16 ，核心靶點包括EGFR、ESR1、CTNNB1、TP531、STAT3、HSPB1等。

3.3 基于DAVID數據庫的關鍵靶點GO富集分析

分別從細胞組分（celllar component，CC）、分子功能（molecular function，MF）、生物過程（biologicalprocess，BP）進行GO分析的標準化描述，見圖2，結果表明CPRP-DILI在MF方面主要涉及對化學物質的反應、細胞對化學刺激的反應、對有機物的反應等;CC 主要定位于細胞外部分、細胞質膜部分、細胞表面等;而BP 主要涉及酶結合、相同蛋白結合、小分子結合、信號受體結合等。

圖2關鍵靶點的GO 富集分析結果

Fig.2Results of GO enrichment analysis of key targets

3.4基于DAVID數據庫的關鍵靶點KEGG富集分析

如圖3所示，KEGG疾病相關主要涉腫瘤信號通路；信號轉導通路涉及PI3K-Akt信號通路、MAPK信號通路;傳染病相關通路涉及乙型肝炎信號通路、卡波西肉瘤皰疹病毒感染信號通路、人巨細胞病毒感染信號通路、人類T細胞白血病病毒信號通路等。

3.5 基于DifferentialNet數據庫篩選肝臟表達的關鍵靶點

如圖4所示，在肝臟組織具有重要意義的靶點包括 TP53、STAT3、TNF、MAPK3、SRC、HIF1A、JUN、FOS、IKBKB、CTNNB1、AKT1、CAV1。

圖3KEGG 富集分析結結果

圖4肝組織特異性蛋白質-蛋白質相互作用圖Fig.4PPI network of hepatic tissue-specific proteins

3.6 CPRP-DILI的miRNA調控網絡

CPRP-DILI關鍵基因映射至miRTarBase，構建CPRP-DILI的 miRNA調控網絡（見OSID 開放科學數據與內容），涉及關鍵 miRNA 包括 hsa-mir-34a-5p、has-mir-155-5p，核心靶點包括 HIF1A、JUN、FOS、CASP3、STAT3、TP53、CTNNB1、AKT1、CAV1、VEGFA。

3.7 聚類分析功能模塊的靶點基因集

MCODE 插件分析 PPI 網絡獲得子網絡 cluster 1、2 如圖5 所示，cluster 1主要涉及 VEGF、Rap-1、TNF、HIF-1、MAPK信號通路，CytoHubba 插件獲得的 HubGene 包括 EGFR、CASP3、SRC、AKT1、MAPK3;cluster2主要涉及 TNF、FoxO、JAK-STAT、PI3K-AKT、MAPK 信號通路，HubGene 包括 TNF、TP53、STAT3、JUN。其中VEGF 信號通路在血管新生過程中發揮無可替代的作用，Rap-1、HIF-1、TNF 和 MAPK信號通路等上下游信號通路不同程度參與調控血管新生，HubGene 如 EGFR、CASP3、SRC、AKT1、MAPK3等是血管新生途徑的關鍵節點，提示CPRP-DILI可能與血管新生有關。此外，TNF信號通路和MAPK信號通路作為子網絡模塊共有信號通絡，可能在CPRP-DILI進展中發揮重要作用。

圖5CytoHubba插件計算該網絡子模塊及HubGene

Fig.5Submodules and HubGenes of the network calculated using the CytoHubba plugin

3.8 CPRP-DILI關聯臨床藥物集合

3.8.1 CPRP-DILI的HubGene及關聯成分

CPRP-DILI的7個 HubGene，包括 AKT1、CTNNB1、MAPK3、HIF1A、JUN、TP53、STAT3，涉及 3^′ -0-甲基香豌豆苷元、芹菜素、山奈酚、木犀草素、槲皮素、白藜蘆醇、大黃酸、熊果酸、蘆薈大黃素、大黃素、沒食子酸等24個化合物（見OSID開放科學數據與內容）。

3.8.2 HubGene的關聯藥物網絡

CPRP-DILI的 HubGene 映射到 CTD 數據庫，以 Degree 和Betweeness 為指標篩選，獲得 HubGene-臨床藥物網絡圖（圖6）。

圖6HubGene-治療藥物的網絡圖

HubGene-藥物網絡關鍵成分按化學結構及藥理作用分類，如圖7（a），谷胱甘肽、乙酰半胱氨酸、姜黃素、沒食子酸表沒食子兒茶素等16種物質具有肝臟保護作用，涉及黃酮類、多酚類及類胡蘿卜素類等;如圖7（b），DILI關聯藥物主要為嘧啶類抗腫瘤藥（氟尿嘧啶、地西他濱、吉西他濱、氟達拉濱）、吲哚乙酸類非甾體抗炎藥（吲哚美辛、舒林酸及其代謝物）及免疫抑制劑（環孢菌素、西羅莫司、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤）等，提示CPRP-DILI可能涉及某些成分的肝細胞毒性及易感人群自身免疫引起的炎癥反應。

Fig.6Network diagram of HubGenes-therapeutic drugs

圖7HubGene-關鍵成分按化學結構及藥理作用分類圖

3.8.3 基于RDKit評估化學結構相似性

基于RDKit的拓撲指紋和Tanimoto相似性方法，計算CPRP-DILI相關化合物分子之間相似性，以熱圖的形式可視化后結果見圖8。

圖8CPRP-DILI相關化合物分子之間化學結構相似性

Fig.8Chemical composition similarities among CPRP-DILI related compounds

3.8.4人工智能模型預測的肝毒性/DILI風險

基于eMolTox、vNN-ADMET、ProTox-II、pkCSM等肝毒性或DILI的人工智能預測模型，確定大黃素、大黃酸、沒食子酸等15個高風險化合物。根據藥物代謝動力學參數，月桂酸、14-庚烷醇的可旋轉鍵 （RBN）gt;10 提示口服生物利用度差;月桂酸、熊果酸、谷甾醇、14-庚烷醇的Alog Pgt;6 表明脂水分配情況不適宜（通常0.4?AlogP?5.6） ；月桂酸、煙堿、睪酮、香葉醇、14-庚烷醇、谷甾醇H-鍵供體/受體數量（ ：Hdon/Hacc）lt;3 表明與其他分子形成氫鍵能力差;綜合類模型預測結果確定月桂酸、熊果酸、金合歡素、香葉醇、14-庚烷醇等DILI風險較低，并剔除與之分子相似度高的丙戊酸、對乙酰氨基酚、氟尿嘧啶等。聚類分析如圖9所示，沒食子酸與阿司匹林分子相似度高;大黃素、大黃酸、蘆薈大黃素與多柔比星、他莫昔芬、阿司匹林、雙氯芬酸鈉分子相似度高;腺苷、煙酸與氟達拉濱、地西他濱、吉西他濱分子相似度高;木樨草素、山奈酚、槲皮素、 .3^′ -0-甲基香豌豆苷元等黃酮類成分與硼替佐米、吲哚美辛、塞來昔布、舒林酸分子相似度高。

圖9分子相似性聚類分析圖

Fig.9Cluster analysis diagram of molecular similarity

4 討論

本文聯合多數據庫篩選CPRP-DILI共同靶點，通過構建PPI網絡、肝臟組織特異性表達網絡、miRNA網絡尋找關鍵靶點，基于 MCODE、CytoHubba 等算法確定 HubGene，結合GO、KEGG 富集分析推測 CPRP-DILI分子機制涉及血管新生途徑;基于HubGene篩選與CPRP表達類似化學藥物，結合分子指紋和人工智能預測 CPRP-DILI物質基礎，推測CPRP 相關DILI涉及免疫炎癥相關的肝臟血管新生，為臨床合理用藥和降低DILI風險提供參考。

血管新生為組織受損區域提供血液和營養，參與疾病損傷組織的重塑、修復與再生，是維持正常生理組織的關鍵過程[8]。近年來，血管新生在肝臟疾病發生發展中的作用不斷揭示，肝臟炎癥反應、損傷及修復、纖維化過程中均伴有血管新生[8-9]，肝損傷時表達異常的許多細胞因子，與炎性反應、缺氧狀態及急性損傷狀態下促進新生血管生長因子分泌有關[10]。CPRP-DILI可能與 MAPK介導的炎癥相關肝臟血管新生有關。KEGG分析提示CPRP-DILI主要涉及PI3K-AKT信號通路和MAPK信號通路，其兩個關鍵子網絡同時涉及TNF信號通路和MAPK信號通路。TNF信號通路是協調全身炎性免疫反應的核心，也是急性期反應的細胞因子生成主要途徑之一，其介導的炎性反應通過 MAPK信號通路促進炎癥基因的激活[1]。GO 富集分析發現 CPRP-DILI細胞組分主要定位于細胞表面及外部分，生物學過程涉及酶結合、小分子結合、信號受體結合等，而MAPK信號通路通常被一系列細胞外的刺激信號激活并介導信號從細胞膜向細胞核傳導，調控炎癥、調亡等許多生理活動。子網絡cluster1涉及RAP1、HIF-1和VEGF信號通路均屬于炎性反應相關的血管新生信號通路[12]，其中 HIF-1信號通路在上游缺氧環境下調節 VEGF信號通路時促使血管新生[13]，體內某些細胞因子也通過RAP1信號通路促進VEGF介導的血管新生反應[14]。同時，PI3K/Akt 信號通路是 RAP1、VEGF 的共同下游因子，在肝損傷相關的血管新生及細胞凋亡等生理過程中發揮重要作用[15]。此外，自噬可能在 CPRP-DILI中發揮作用。miRNA 網絡關鍵外泌體 has-mir-34a-5p、has-mir-155-5p 均影響自噬過程，cluster 2 涉及的 PI3K-AKT-FOXO 通路是自噬的重要上游調控機制之一[16]。細胞因子參與調節自噬而影響新生血管的形成，通過二者相互作用調控機體的生理和病理過程[17]。已知 has-mir-155-5p 通過 SOCS1/JAK2/STAT3信號通路調控黑色素瘤相關成纖維細胞促血管生成表型轉變[18]，而 has-mir-34a-5p 通過抑制Noch 1信號通路抑制血管生成[19]。cluster 2涉及JAK-STAT通路是由細胞因子刺激的信號轉導通路，與血管新成尤其與VEGF信號之間存在密切聯系[20]。JAK-STAT信號通路許多成員在肝組織中高度表達，其轉導異常可能導致多種肝損傷[2I]，還可以激活PI3K/Akt信號通路，活化后的Akt可以調節細胞的遷徙，促進肝細胞修復，改善肝臟功能[22-23]。

復方首烏地黃丸（CPRP）由女貞子、制何首烏細粉，與熟地黃和墨旱蓮提取的清膏混合制得而成，每克CPRP相當于制何首烏 0.845g ，說明書規定用法用量相當于每日攝入制何首烏 5g 。查閱文獻[24]發現制何首烏中沒食子酸、大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素質量分數范圍分別為 5.45～18.49，0.08～1.88，2.77～4.35 （204號 39.69～131.69μg/g ，這些成分的含量比例受到原藥材產地、炮制方法和炮制時間等多重因素影響[25-26]2020 年《中國藥典》制何首烏煎服的日劑量限定為 6～12g ，CPRP中制何首烏是以細粉直接入藥，雖未經提取過程活性成分損失較少，但低于安全范圍最低值，推測CPRP肝毒性可能與用藥劑量無關，與免疫、代謝、遺傳等人體自身相關特異質肝損傷及服藥時間長短有關。沒食子酸[27]、蘆薈大黃素、大黃素、大黃酸[27-28]等肝毒性成分損傷肝細胞，可能進一步引發易感人群的特異質免疫異常活化產生級聯炎癥反應;與非甾體類抗炎藥分子相似度較高的木樨草素[29]、山奈酚[30]、槲皮素[31]等黃酮類成分的抗炎作用，延緩了肝損傷前期免疫相關的炎癥進展，但也抑制COX-2激活HIF- ??α∝ ，減弱VEGF的轉錄及釋放，使早期肝臟受損區域正常的血管新生受阻而無法提供血液和營養，影響急性期肝損傷修復[32-33]，但配伍成分的肝臟保護作用可能掩蓋部分早期肝損傷指征;隨著服藥時間延長，炎癥反應抑制狀態達到穩定（且易感人群COX-2表達差異），而肝毒性成分不斷攝入持續損傷肝細胞，肝臟炎癥程度超過配伍黃酮類成分抗炎效應，其他配伍組分的肝臟保護作用不足以平衡肝細胞破壞程度，逐漸開始出現肝損傷癥狀;而此時肝臟血管新生逐漸增強但已難以修復損傷區域，肝臟損傷修復過程反復被激活并產生大量細胞因子和基質，誘導血管新生逐漸進入肝毛細血管化和毛細血管增生的病理性發展期，加劇肝損傷并可能導致肝纖維化等惡性進展。清代黃元御所撰《玉楸藥解》認為何首烏應配伍燥土暖水等扶陽之藥并佐以疏木導經之品以避免助濕敗脾，并使肝血溫升達到滋肝養血、黑發烏須的作用，多為溫熱的陽性藥，不建議配伍過多助陰之品。而CPRP中制何首烏配伍的熟地黃、女貞子、墨旱蓮均為補陰藥，從化學成分及藥理活性來看，熟地黃主要化學成分環烯醚萜苷類、氨基酸類、苯乙醇苷類多糖類等具有抗炎及免疫活性調節功能[34]。而酒女貞子、墨旱蓮組成的經方“二至丸”，所含環烯醚萜類及苯乙醇苷類成分協同熟地黃增效，可能過度激活免疫異常的特異質患者的免疫功能，增加DILI發生風險;其黃酮類、三萜類及有機酸類成分又具備保肝、抗細胞凋亡、抗氧化應激、減低炎癥因子釋放、減弱促炎癥反應等作用[35-36]。這也一定程度解釋為什么何首烏相關DILI患者的服用劑量和潛伏期跨度較廣（劑量最少 1～3g/d 最多不超過 100g/d ;潛伏期最短1～3d，最長不超過 180d ，中位數 ）[37]，且多數何首烏相關DILI患者停藥后可恢復正常，但仍有少數患者發展成肝纖維化[38]，上述免疫炎癥相關的血管新生是可能的機制之一。

脂溢性脫發、須發早白、濕疹、白癲風、銀屑病、強直性脊柱炎、系統性紅斑狼瘡綜合征、類風濕性關節炎等疾病通常伴有免疫系統紊亂，都可能增加DILI風險。CPRP說明書指出服藥兩周或服藥期間癥狀無改善或癥狀加重，或出現新的嚴重癥狀，應立即停藥并去醫院就診。因此，建議長期服用CPRP的人群定期檢查肝功能;藥師也應當將用法用量、禁忌及注意事項等做明確的用藥交代，這是實現患者安全、有效、正確用藥的重要一環。此外，嘧啶類藥物是核苷類抗代謝藥物，在DNA 和（或）RNA的合成中干擾或競爭核苷三磷酸，肝臟代謝在此類藥物的體內過程中發揮重要作用，嘧啶類似物都存在不同程度的直接肝毒性潛力[39]，已知氟尿嘧啶[40]、地西他濱[41]、吉西他濱[42]、氟達拉濱[43]均能影響組織的VEGF 的表達及血管新生，若與CPRP 聯用可能加速肝損傷進程;而非甾體類抗炎藥是藥物引發肝損傷的主要原因，研究表明[4]，非甾體類抗炎藥損傷肝臟的靶點包括干細胞、膽管及肝血管，主要病理特征包括匯管區炎性反應、匯管區細膽管增生、肝細胞脂肪變性[45]，可能增強CPRP中的肝毒性成分的致炎反應，反復激活肝臟損傷修復過程并產生大量細胞因子和基質，加速誘導血管新生進入病理性發展期;而免疫抑制劑甲氨蝶呤和硫唑嘌呤通常直接損傷肝細胞[46]，CPRP 中的肝毒性成分存在協同毒性作用，而西羅莫司和環孢菌素通常導致膽汁淤積型肝損傷，膽汁淤積通過VEGF/FAK/Src 通路促進血管內皮遷移和增殖，從而加速后期病理性血管新生的發生[47]。CPRP 可能與上述藥物存在不同程度交叉肝毒性，臨床上如果聯用時需謹慎，用藥前需進行肝功能評估或藥物劑量調整，并定期監測肝功能指標，發現異常時及時停藥或采取其他治療措施，以保障用藥安全。

綜上，CPRP的肝毒性可能與免疫、代謝、遺傳等人體自身相關特異質肝損傷及服藥時間長短有關，其潛在肝毒性成分沒食子酸、蘆薈大黃素、大黃素、大黃酸等直接損傷肝細胞，引發易感人群的特異質免疫異常活化產生級聯炎癥反應;部分配伍成分延緩肝損傷前期免疫相關的炎癥進展，但也使急性期肝臟受損區域正常的血管新生受阻而影響早期修復，并掩蓋部分早期肝損傷指征;隨著服藥時間延長，肝臟損傷修復過程反復被激活并產生大量細胞因子和基質，肝臟血管新生逐漸增強并被誘導逐漸進入病理性發展期，進一步加劇肝損傷并可能導致惡性進展。然而，本文仍存在一定的局限性，如計算生物學的方法并不能評估藥物使用療程對肝損傷的影響，因此本文所得到理論仍然需要體內外實驗驗證，并收集更多的臨床病例加以驗證，實現臨床合理用藥和安全用藥。

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