可溶性膳食纖維在便秘小鼠模型和便秘人群中的作用和機制研究

中圖分類號：TS218 文獻標志碼：A 文章編號：1002-4026（2025）04-0028-11

Abstract：Inorder to studytheroleand mechanism of solubledietary fiber inaleviating constipation，this studyutilized 16SrRNA sequencing，gas chromatography-massspectrometry，quantitativepolymerase chainreaction，and immunobloting methodsinamouse model of constipation.Fromvariousaspectsof intestinalmicroecology，suchas the distributionofthegutmicrobiota，short-chainfattacidmetabolites，andtheintestinalepithelialbarier，thisstudyexplored theroleand molecular mechanismof soluble dietaryfiber in aleviating constipation in mice.The aleviating efectof soluble

dietaryfiberon constipation was furtherconfirmedin humantrials.This studyfoundthat soluble dietaryfiber significantly aleviatedthe symptoms of constipation inmice and humans.The mechanisms of action areas folows：increasing the numberof probioticssuchasParabacteroidesand Ligilactobacilus intheintestinal tract of mice；promoting theproduction of short-chain fattacidssuchasaceticacid;and significantly improving theexpresionof genes encoding the production of intestinaltight junctionproteins，alongwithproteins themselves，whichareinvolved inmaintainingtheintegrityof the intestinalbarrier.Theresultsindicate thatsolubledietaryfiber has goodaleviating effctsonconstipationinmiceand humans，whichisachievedthroughthe production of short-chain fatyacids，theimprovementof the gut microbiota，and theenhancementof the intestinal barier.This studyfurther confirms the valueof soluble dietaryfiberforapplicationin constipated populations，providing a scientific basis for intestinal research and product development.

KeyWords ： soluble dietary fiber;constipation；gut microbiota;short-chain fatyacids；intestinal tight junction proteins

便秘是指糞便干結、排便費力，且排便次數明顯減少的一種消化道癥狀。根據羅馬Ⅱ標準，若每周排便次數少于3次，或者有超過 25% 的時間感到排便費力，即可診斷為便秘[1]。便秘的發病率隨年齡增長而增加，尤其在老年人群中極為普遍，流行病學調查顯示其發生率超過 20% ，在活動量較少的老年住院患者中甚至可高達 79%^[2] 。盡管便秘不會直接威脅生命，但它會顯著降低患者，尤其是老年患者的生活質量。隨著我國逐步進入老齡化社會，便秘問題日益成為醫藥領域關注的焦點。

目前，便秘的藥物治療主要包括容積性、潤滑性、滲透性等導瀉劑以及莫沙必利等腸道動力促進劑。然而，某些潤滑性或滲透性導瀉劑可能導致依賴性，長期使用可能導致腸道失去自主排便能力。此外，不當使用可能導致電解質失衡、脫水等副作用。腸道動力促進劑除了可能引起胃腸道反應外，還可能帶來心血管風險[3]。相較于其他類型的便秘藥物，膳食纖維以其安全、有效且可長期使用的特點而受到青睞，同時對老年人心血管健康還具有額外的好處[4-5]。因此，對于便秘患者，特別是慢性便秘的老年患者、兒童、糖尿病患者以及孕產婦，膳食纖維可作為首選的預防和治療手段[6]。文獻報道，魔芋來源的葡甘露聚糖以及低聚木糖等可溶性膳食纖維能有效增加糞便容積和含水量，對預防和改善便秘具有積極作用，但其具體作用機制尚需進一步探究[7]。為此，我們建立了藥物誘導的小鼠便秘模型，對可溶性膳食纖維改善便秘的作用及其分子機制進行了深人研究，并在人體試驗中確證了可溶性膳食纖維對便秘的緩解作用。

1儀器與材料

1.1 儀器

生物安全柜（上海力康生物科技有限公司），倒置顯微鏡（儀景通光學科技（上海）有限公司），BSA124S分析天平（德國 Sartorius公司），超聲波清洗機（寧波新芝生物科技股份有限公司），二氧化碳培養箱、冷凍離心機（美國Thermo 公司），氣相-四極桿飛行時間質譜聯用儀（Impact ⅡI，德國 Bruker公司），組織裂解儀，LightCycler 480定量熒光PCR（美國Roche公司），全自動生化分析儀（美國雅培公司），Xf-180血球計數儀（日本Sysmex公司），ZQ-200 尿液分析儀（美國ZQ公司）。

1.2材料

C57BL/6J 小鼠（北京維通利華實驗動物有限公司，SPF級），滅菌小鼠維持飼料（北京科奧協力飼料有限公司，SPF級），地芬諾酯（常州康普藥業有限公司，規格 2.5mg ，批號32022716），TRIzol試劑（美國 Invitrogen公司，規格 100mL ，貨號15596026），實驗所采用的可溶性膳食纖維為魔芋低聚木糖（，食用級，標準Q/DFHHT002J，批號23010001），食用色素（廣西聚力恒生物科技有限公司，食用級，標準GB26687—2011），玉米淀粉（新鄉良潤全谷物食品有限公司，食用級，標準GB/T8885—2017），qPCR反轉錄試劑盒（思科捷生物技術有限公司），甲醇、乙腈（美國Thermo公司，色譜級，規格 500mL ），甲酸、乙酸（天津市科密歐化學試劑有限公司，分析級，規格 500mL ），去離子水（美國Thermo公司純水機制備），引物信息（北京六合華大基因科技有限公司，常規引物，GAPDH-F/R：TCCTTGGAGGCCATGTGGGCCAT/TGATG

ACATCAAGAAGGTGGTGAAG; Occludin-F/R：TGGCAAGCGATCATACCCAGAG/CTGCCTGAAGTCATCCACACTC ;ZO-1F/R：GTTGGTACGGTGCCCTGAAAGA/GCTGACAGGTAGGACAGACGAT），抗 ZO-1（ABCam，貨號 216880）、occludin（ABCam，貨號22691）、claudin-1（Affnity Biosciences，貨號0127）和 GAPDH抗體（Affinity Biosciences，，貨號 7021）。

2 實驗方法

2.1 試劑及樣品配置

綠色食用色素的淀粉糊的配制：稱取普通玉米淀粉 0.1g ，溶解于 1mL 無菌水，加入 0.1mL 食用色素后混合均勻備用。

模型藥物地芬諾酯的配制：取地芬諾酯藥物制劑4片，置于 15mL 離心管，加入 10mL 無菌水，完全溶解藥片后混勻備用。

可溶性膳食纖維樣品配制：稱取魔芋低聚木糖待測樣品 555mg 溶解到 100mL 無菌水中，充分溶解，給予小鼠自由飲用，每 ^12h 按照上述操作重新配置可溶性膳食纖維樣品，并更新飲水。

2.2 動物模型構建和干預

動物實驗方案經省分析測試中心動物倫理委員會批準（批件號ECAESDATC-2024-036）。實驗動物為雌性C57小鼠7～8周齡30只，在實驗室適應性飼養1周后，隨機分為正常對照組、便秘模型組和膳食纖維組，各組小鼠飼料均使用普通小鼠維持飼料，正常對照組和模型對照組飲水為無菌去離子水，膳食纖維組小鼠飲水為溶解了可溶性膳食纖維的溶液，干預方式和劑量參照文獻方法[8-10]，按照 10g/d 的成人劑量，設定每只質量 20g 的小鼠折合的飲水計算劑量為 1667mg/kg 。各組小鼠試驗期間自由飲食每 ^12h 更換新鮮飲水或可溶性膳食纖維溶液。第7天禁食 ^12h 后，除對照組外，均灌胃給予 10mg/kg 地芬諾酯誘導小鼠發生便秘。 30min 后，給予各組小鼠灌胃含綠色食用色素的淀粉糊。在干凈的籠子里面單獨放置小鼠，給予飼料和飲水，觀察首顆綠色糞便排出時間，記錄 6h 內每只小鼠排出糞便的數量，并收集至液氮中。 ^12h 后繼續給予小鼠便秘誘導劑維持便秘狀態， 24h 后處死小鼠，收集小鼠腸道組織。

2.3 小鼠腸道菌群測序和分析

收集小鼠糞便并置于液氮凍存，勻漿后提取DNA并進行PCR擴增，引物對應區域：16SV4區引物（515F和806R，CCTAYGGGRBGCASCAG，GGACTACNNGGGTATCTAAT），所有 PCR 混合液加入 15μL Phusion？High-Fidelity PCR Master Mix（New England Biolabs）、 0.2μmol/L 引物和 10ng 基因組DNA 模板，在 98^°C 下進行 1min 的第一次變性，然后在 98°C（10s），50^°C（30s） 和 72^°C（30s） 下進行30次循環，最后在 72^°C 下保持 5min 。對PCR產物進行磁珠純化，根據PCR產物濃度進行等量混樣，充分混勻后對PCR產物進行檢測并回收目的條帶。然后再經末端修復、加A尾、加測序接頭、純化等文庫制備常規步驟完成文庫制備，構建好的文庫經過Qubit 和Q-PCR 定量，文庫合格后，使用NovaSeq6000 進行PE250上機測序。根據 Barcode序列和 PCR擴增引物序列從下機數據中拆分出各樣本數據，使用QIIME2軟件對樣本數據進行降噪并完成物種注釋。

2.4 腸道緊密蛋白mRNA和蛋白表達測定

本研究使用了定量實時聚合酶鏈反應（qPCR）和免疫印跡分析來檢測結腸組織中目標基因和蛋白的表達。首先，通過使用 TRIzol試劑從結腸組織中提取總RNA，并使用 SPARKscript IIRTPlus Kit將 RNA反轉錄成cDNA。為了定量分析目的基因，使用 SYBR Green qPCR Mix（SparkJade，Jinan，China）在 Roche Light-Cycler480上進行cDNA的擴增。研究所用的引物由北京六合華大基因科技有限公司合成。通過 2^-ΔΔCt 方法計算相對mRNA表達水平。對于蛋白質的分析，結腸組織使用含有 1mmol/L 苯甲基磺酰氟（PMSF）的RIPA裂解緩沖液在冰上裂解 15min ，然后以 12000r/min 離心 15min 以提取總蛋白。使用BCA蛋白質測定試劑盒對蛋白質濃度進行定量。等量的蛋白質通過十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）分離并轉移到聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上。將膜用 5% 脫脂牛奶封閉后，與一抗（ZO-1、occludin、claudin-1 和

GAPDH）孵育。用 TBST洗滌后，膜與二抗孵育。隨后，使用BioDoc-It 220成像系統（UVP）可視化蛋白條帶，并使用ImageJ（Bethesda，MD）對條帶進行定量分析，以GAPDH為內參進行標準化處理。

2.5 短鏈脂肪酸測定

干預實驗最后一天，采集各組小鼠新鮮糞便2粒，準確稱量 0.02g 樣品，按照1：40比例加入超純水，放入研磨鋼珠，用組織研磨儀進行研磨勻漿，時間控制在 1min ，然后超聲提取 15min ，在 4‰ 條件下離心 10min ，取上清液;用移液槍移取 100μL 血清、組織提取液或糞便提取液，置于潔凈的 2mL 帶帽玻璃管中，加人 10μL2mmol/L 的2-乙基丁酸內標進行校正，加入 44μLpH=7.0 的磷酸鹽緩沖液，充分混勻后加入 308μL100mmol/L 衍生化試劑，劇烈渦旋 1～2min ，然后置于水浴鍋中進行衍生化，溫度設定為60^°C ，加熱時間為 1.5～2h ，水浴結束后取出放置于冰上，以縮短冷卻時間，降低短鏈脂肪酸的揮發損失，加入 200μL 正己烷，劇烈渦旋提取 3min ，離心 （4‰，10000r/min 條件下離心 15min ）取上清液（ 100～150μL 即可），用于GC-MS分析。GC-MS條件為：HP-5毛細管柱， 30m×0.25mm×0.25μm ;初始溫度 70% ，保持3min ;然后以 10°C/min 的速率升溫至 130^c ，以 30^c/min 的速率升溫至 280^°C ，保持 2min ;進樣口溫度：250^°C ，進樣方式：分流進樣（分流比為30：1）;載氣：氮氣;離子化方式：電子轟擊源（EI）;離子源溫度： 230°C ;傳輸線溫度： 290^°C ；電離能量： 70eV ;溶劑延遲： 7min ;采用選擇離子模式（SIM）掃描。借助于氣質色譜定量軟件Masshunter，建立標準曲線。

2.6 可溶性膳食纖維干預便秘的人體試驗納入及分組

人體試驗由中國人民解放軍第303 醫院倫理委員會批準（批件號GXCDC/QBG38-07-002（07）），在醫院內具體實施，受試者納入標準包括每周排便少于3次者以及習慣性便秘者，排除腸道器質性病變患者、嚴重全身心疾病患者、短期內服用與受試功能有關的食物藥物影響結果者等不適宜人群。以上述入組標準共納入便秘人群 110例，其中，對照組56例（男26例，女30例），膳食纖維組54例（男 28例，女26 例）。

2.7 可溶性膳食纖維干預便秘的人體試驗方法

試驗人群共服用樣品10d，期間按照原有飲食習慣正常飲食。試驗開始后每日記錄排便次數以及飲食情況。試驗期間，膳食纖維組服用可溶性膳食纖維每次 5g ，每天2次，服用形式為粉末自行以 100mL 沖服。對照組服用安慰劑糊化淀粉，劑量與服用方式均與膳食纖維組一致。根據受試者排便情況，按照以下積分標準，統計和計算排便困難程度積分值，見表1～2。

表1排便困難程度積分標準

Table 1Scoring criteria regarding severity of defecation difficulty

表2布里斯托糞便性狀分類積分標準[]

Table 2Fecal consistency scoring criteria based on the Bristol stool chart[11]

在服用試驗后檢測血常規、糞便常規、尿常規、血壓、肝腎功能等指標

2.8 統計學方法

使用Graphpadprism7.0軟件進行作圖，實驗結果均采用（均值 ± 標準差）表示，顯著性差異通過Students'T-test雙尾非成對檢驗， Plt;0.05 視為具有顯著性差異。

3 實驗結果

3.1 可溶性膳食纖維干預對小鼠體質量和排便情況的影響

可溶性膳食纖維作為低能量物質，被報道長期服用具有減重和降低體脂率等作用[5]。我們在7d實驗過程中，監測了正常對照組、便秘模型組以及膳食纖維組各組小鼠體質量，如圖1所示，結果顯示各組小鼠體質量沒有顯著差異和變化，區別于文獻[5中減重實驗所采用的4～10周的長期作用，我們研究表明，短期服用魔芋低聚木糖可溶性膳食纖維，對小鼠體質量沒有顯著影響。

如圖2所示，給予含有綠色色素的食物灌胃后，正常對照組 140min 左右排出第一顆綠色糞便，而便秘模型組耗時 300min 左右，模型組便秘特征明顯，表明模型構建成功。而同時服用可溶性膳食纖維的便秘小鼠，首次排便時間相比便秘模型組顯著縮短，糞便排出速度顯著更快（ Plt;0.05） 。繼續觀察 6h ，統計小鼠排便數量，膳食纖維組小鼠排便數量平均28顆，顯著高于模型組，改善幅度接近 50% ，實驗表明，小鼠服用7d可溶性膳食纖維，可以顯著預防和緩解小鼠的腸道便秘，與文獻報道結果一致[12]。

圖1各組小鼠體質量情況

Fig.1Body mass of the mice in each of the three groups

圖2小鼠首次排便時間和排便數量

Fig.2Time of initial defecation and quantity of defecation in mice

3.2 可溶性膳食纖維對小鼠腸道菌群的影響

通過基因測序實驗方法鑒定小鼠腸道細菌，根據實驗方法對所有樣本進行數據處理和物種注釋，并計算特征序列的豐度信息，進一步分析和繪制各組小鼠腸道菌群在科水平（Family）（圖3）和屬水平（Genus）的相對豐度（圖4）。結果表明，服用可溶性膳食纖維可以顯著提高小鼠腸道菌群中副擬桿菌屬（Parabacteroides）和聯合乳桿菌屬（Ligilactobacills）的水平。副擬桿菌屬細菌是人類腸道微生物群的核心成員，在人群腸道樣本數據庫中檢出率大于 90% ，而且發現在百歲老人腸道中顯著富集，在生理功能方面，副擬桿菌屬細菌有助于消化我們無法以其他方式處理的高纖維飲食，并且在高膳食纖維飲食中豐度增加[13]。腸道菌群數據結果顯示，無論在菌科水平還是菌屬水平，可溶性膳食纖維均顯著提高了副擬桿菌和聯合乳桿菌等益生菌的豐度，有利于抵御有害細菌的增殖。我們進一步通過功能注釋工具對不同組小鼠腸道菌群的功能進行注釋和富集，見圖5，結果顯示，便秘模型組腸道菌群與疾病顯著相關，提示我們便秘發生時，與疾病有關的細菌豐度顯著上升，而膳食纖維組腸道菌群與細胞代謝過程緊密相關，說明可溶性膳食纖維可能影響腸道菌群甚至腸道上皮細胞的代謝活動，改善腸道微生態。

圖3小鼠腸道菌群科水平菌群豐度熱圖

Fig.3Heatmap of the family-level bacterial abundance within the mouse gut microbiota

圖4小鼠腸道菌群菌屬豐度柱狀圖

Fig.4Histogram of the genus-level bacterial abundance within the mouse gut microbiota

圖5小鼠腸道菌群功能注釋熱圖

Fig.5Annotated heatmap of the mouse gut microbiota functions

3.3 可溶性膳食纖維對小鼠腸道短鏈脂肪酸水平的影響

短鏈脂肪酸是由腸道菌群通過發酵不可消化碳水化合物（如膳食纖維）而產生的一類有機酸。主要包括乙酸、丙酸和丁酸三種。這些短鏈脂肪酸在人體內發揮著重要的生理作用，包括為腸道細胞提供能量、維持腸道屏障功能、調節免疫系統和影響腸道動力[14]。因此，我們通過氣相色譜-質譜聯用儀對各組小鼠腸道短鏈脂肪酸水平進行了測定，首先通過制備短鏈脂肪酸標準液上機測定，繪制得到短鏈脂肪酸的標準曲線見圖6，線性相關系數 R² 均高于0.99，顯示線性范圍良好。按照上述實驗方法檢測小鼠糞便中的短鏈脂肪酸，結果顯示，相比正常對照組，便秘模型組的短鏈脂肪酸水平顯著下降，而服用可溶性膳食纖維的小鼠腸道乙酸濃度和短鏈脂肪酸總量顯著高于便秘模型組（圖7）。

圖6短鏈脂肪酸標準曲線

Fig.6Standard curves of short-chain fattyacids

3.4 可溶性膳食纖維對小鼠腸道組織緊密蛋白的影響

腸道上皮緊密連接結構及功能的紊亂是腸道疾病等很多臨床疾病共同的病理生理學特點。細胞間緊密連接是一種復雜的分子結構，主要包括 ZO-1、occludin、claudins 等蛋白結構，它們的作用是保持腸道上皮細胞及內皮細胞間結構的完整性，同時形成一種高度極化性的屏障來維持動物體內微環境的穩定，維持良好的腸道屏障[15-16]。我們提取了各組小鼠腸道組織中的mRNA以及蛋白質，分別通過qPCR 和免疫印跡的實驗手段對緊密連接蛋白ZO-1、occludin、claudins 的表達進行了測定，結果顯示，便秘模型組的小鼠腸道緊密蛋白的mRNA表達量（圖8）和蛋白表達量（圖9）相比正常對照組顯著下降，而同時服用可溶性膳食纖維的小鼠，緊密連接蛋白表達量相比模型組得到有效修復，表明可溶性膳食纖維可以調控腸道緊密連接蛋白的表達，有助于維持良好的腸道屏障。

圖8小鼠緊密連接蛋白mRNA相對表達量

Fig.8Relative mRNA expression of tight junction proteins in mice

圖9小鼠緊密連接蛋白的蛋白表達情況

Fig.9Protein expression of tight junction proteins in mice

3.5 可溶性膳食纖維對便秘人群的影響

試驗開始前招募便秘人群受試者120例，隨機分為對照組和膳食纖維組。試驗過程中因個人原因中斷試驗10例，最終進入有效統計對照組56例，膳食纖維組54例。試驗前，兩組便秘人群排便次數和便秘程度均無統計學差異。采用可溶性膳食纖維干預10d后，膳食纖維組平均排便次數顯著高于對照組（ Plt;0.01? ，平均增加率 67% ，而且排便困難度和糞便性狀打分情況顯著好于對照組，平均下降 30% 左右，見表3～5。同時，試驗第11天，檢測受試者血壓、心率并采集患者血液樣本，開展血液學檢測。通過比較兩組人群的血生化指標、血細胞計數和血壓心率等安全性指標，結果顯示兩組人群均無顯著性差異（見圖10），表明可溶性膳食纖維對受試者無顯著不良影響，安全度較高。

表3可溶性膳食纖維對便秘人群每日排便次數的影響

Table 3The efect of soluble dietary fiber on the frequency of defecation in constipated human populations

表4可溶性膳食纖維對便秘人群的排便困難度的影響

注：對照組 n=56 ;膳食纖維組 n=54 。

Table 4The effct of soluble dietary fiber on the difficulty of defecation in constipated human populations

表5可溶性膳食纖維對便秘人群的糞便性狀的影響

Table 5The effect of soluble dietary fiber on the stool properties of constipated human populations

注：對照組 n=56 ;膳食纖維組 n=54 。

圖10人體試驗安全性指標組間對比（ Pgt;0.05 ）

Fig.10Comparison of safety indicators between groups involved in human trials （ （Pgt;0.05 ）

4 結論與討論

本研究通過構建便秘模型小鼠，深入探討了可溶性膳食纖維對便秘小鼠的排便情況、腸道菌群結構、短鏈脂肪酸的產生，以及腸道屏障緊密連接蛋白基因和蛋白表達的影響，并在人體試驗中確證了可溶性膳食纖維對便秘的緩解作用。本研究主要關注可溶性膳食纖維發揮便秘緩解作用的分子機制，因此直接采用了文獻報道的起效劑量[10]，并未設置多個劑量組，此為不足之處。研究結果表明，可溶性膳食纖維能有效緩解小鼠的便秘癥狀，與文獻報道一致[10，1-8]?？扇苄陨攀忱w維除了可以增加糞便體積，還能夠增加小鼠腸道中如副擬桿菌和聯合乳桿菌屬等益生菌的數量，這些益生菌對維持腸道健康和促進腸道蠕動具有重要作用。此外，可溶性膳食纖維還能顯著提升小鼠腸道中短鏈脂肪酸，尤其是乙酸的生成量。這些短鏈脂肪酸具備多種生理功能，包括刺激腸道蠕動和維持腸道pH平衡等[15，19]。同時，可溶性膳食纖維還能促進緊密連接蛋白基因和蛋白的表達，有利于維護腸道屏障的完整性。通過本研究的開展，加深了我們對可溶性膳食纖維促進腸道健康作用機制的認識，進一步確證了可溶性膳食纖維在便秘人群中的應用價值，為腸道研究和產品開發提供了科學依據。

參考文獻：

[1]熊理守，王藝霖，陳旻湖.慢性便秘的定義和流行病學[J].臨床消化病雜志，2013，25（4）：230-235.DOI：10.3870/lcxh.j.issn.1005-541X.2013.04.15.

[2]穆白雪，張成普.老年人常見未分化疾?。罕忝氐牧餍胁W及診治進展[J].實用老年醫學，2022，36（3）：228-231.DOI：10.3969 /j.issn.1003-9198.2022.03. 004.

[3]鄭麗華，賈蘭斯.治療便秘藥物的合理選擇[J].中國臨床醫生雜志，2007，35（4）：62-63.DOI：10.3969/j.isn.1008-1089.2007.04.027.

[4]VUKSANV，JENKINSDJ，SPADAFORAP，etal.Konjac-mannan（glucomannan）improves glycemiaandotherassociatediskfactors forcoronary heart disease intype2diabetes.Arandomizedcontroledmetabolictrial[J].Diabetes Care，199，22（6）：913-919. DOI： 10.2337/diacare.22.6.913.

[5]薛麗華，陳繼承，馮瑞，等.魔芋葡甘聚糖減肥作用及其機理研究進展[J]．海峽科學，2012（8）：47-9.DOI：10.3969/j.isn.1673-8683.2012.08.016.

[6]尤志富，范玉寶.小麥纖維素治療成人便秘臨床療效觀察[J]．浙江醫學，2009，31（1）：102-103.DOI：10.3969/j.issn.1006-2785.2009.01.044.

[7]黃明發，張盛林.魔芋膳食纖維保健作用研究進展[J].中國食物與營養，2010，16（5）：75-77.DOI：10.3969/j.ssn.1006-9577.2010.05.021.

[8]金娉婷，張伶燕，趙紅波，等.飲水添加螺旋藻和益生菌對小鼠生長、免疫及糞中菌群的影響[J]．中國畜牧雜志，2020，55（4） ： 155-60. D01：10.19556/j.0258-7033.20181019-02.

[9]LUOJ，WANGT，LIANG S，etal.IngestionofLactobacilusstrainreducesanxietyandimprovescognitivefunctioninthehyperammonemia rat[J].Science China Life Sciences，2014，57（3）： 327-335.DOI： 10.1007/s11427-014-4615-4.

[10]POLYMEROS D，BEINTARISI，GAGLIA A，etal.Partialy hydrolyzed guar gum acceleratescolonic transit time andimprovessymptoms inadults withchronic constipation[J].Digestive Diseasesand Sciences，2014，59（9）：2207-214.DOI：10.007/s10620-014-3135-1.

[11]蒲秋霞，李紅偉，宏亞麗，等.國外布里斯托大便分類法的應用現狀及其啟示[J]．護理研究，2019，33（9）：152-1555.DOI： 10.12102/j.issn.1009-6493.2019.09.020.

[12]LUYY，ZHANGJX，ZHANGZ，etal.Konjacglucomannan withprobioticsactsasacombination laxativetorelieveconstipationinmicebyincreasing short-chainfatyacidmetabolismand5-hydroxytryptaminehormonerelease[J].Nutrition，2021，84：111112. D01： 10.1016/j.nut.2020.111112.

[13]王芳.廣西巴馬長壽老人腸道菌群及其與膳食纖維多糖飲食關聯性研究[D].南寧：廣西大學，2015.

[14]KANG DW，DBAISEJK，ILHANZE，etal.Gut microbialandshort-chainfatyacid profilesinadults withchroniccostipationbefore and after treatment with lubiprostone[J].Anaerobe，2015，33：33-41.DOI：10.1016/j.anaerobe.2015.01.005.

[15]ANDRANM，BORGHETTIP，RVANETTIF，etal.Acetateand propionate efects inresponse toLPSinaporcineintestialco-culture model[J]. Porcine Health Management， 2023，9（1） ： 23. DOI： 10.1186/s40813-023-00316-y.

[16]WANGLL，CENS，WANGG，etal.Aceticacidandutyricacidreleasedinlargeintestineplaydiferentrolesintheaeviationof constipation[J]. Journal of Functional Foods，2020，69：103953.DOI：10.1016/j.jff.2020.103953.

[17]HUMM，FANGCQ，LIUYQ，etal.Comparative studyof the laxativeeffectsof konjac oligosaccharides and konjacglucomannanonloperamide-inducedconstipationinrats[J].Foodamp;Function，2021，12（17）：7709-7717.DOI：10.1039/d1fo01237a.

[18]LOENING-BAUCKEV，MIELEE，STAIANOA.Fiber（glucomannan）isbeneficial inthetreatmentof childhoodconstipation[J]. Pediatrics，2004，113（3 Pt 1） ： e259-e264.DO1： 10.1542/peds.113.3.e259.

[19]DELEUS，ARNAUSK，DPREZL，etal.Highacetatecocentrationprotectsintestinalbarierandexertsanti-inflaatoryefectsnorganoid-derivedepithelialmonolayerculturesfrompatientswithulcerativecoitisJ].InterationalJouralofMolecularSciences，2023，24（1） ： 768.DOI：10.3390/ijms24010768.

（上接第13頁）

[14]YOKOSUKAA，MMAKIY，SAKAGAMIH，etal.Newdiarylheptanoidsanddiaryheptanoid glucosidesfromtherhizomesofTacca chantrieriandtheircytotoxicactivity[J].Journal of NaturalProducts，2002，65（3）：283-289.DOI：10.1021/np010470m.

[15]CHALLINOR VL，SMITHDM，DE VOSSJJ.Steroidal saponins isolated froman Australianyam Dioscoreasp.[J].AustralianJournal of Chemistry，2011，64（5）：545.DO1：10.1071/ch11056.

[16]ZHAO PJ，WANG HX，LIGH，et al.Secondary metabolites from endophytic Streptomyces sp.Lz531[J]. Chemistryamp;Biodiversity，2007，4（5） ： 899-904.D01： 10.1002/cbdv.200790078.

[17］胡毓元.親水性β-谷甾醇糖基衍生物的酶法制備及其降膽固醇特性研究[D].鄭州;河南工業大學，2023.DOI：10.27791/d.cnki.ghegy.2023.000010.

[18]DUD，J，ZHAGR，etal.PhenoliccompoundsisolatedfroDscoreaingiberesis protectagaistpancreaticaciaelsnecrosis induced bysodium taurocholate[J].Biorganicamp;Medicinal Chemistry Leters，2017，27（6）：1467-1470.DOl：10.1016/j.bmcl.2017.01.014.

[19]PRADIKAY，PRANOWOD，MATSJEHS.Synthesisof4-（5-bromo-4-hydroxyphenyl-3-methoxy）-2-butanoneandtheactivitytestasfruitfliesatractant[J].KeyEngieeing Materials，2020，840：13-117.DOI：10.4028/www.scientific.net/kem.840.113.