The Application and Optimization of High-Performance Liquid Chromatography in the Detection of Veterinary Drug Residues in Animal-Derived Food

PANXiaoxia （Guangxi Chemical Research Institute Co.，Ltd.， Nanning 53oooo， China）

Abstract： High-performance liquid chromatography （HPLC） plays a crucial role in the detection of veterinary drugresidues inanimal-derived foodsdue to itshighseparation efciency，sensitivity，and selectivity.HPLCisan essential tool forveterinary drug residue detection，quality control，and pharmacokinetic studies，and is also one of the key technologies for ensuring food safety.This article discusses the basic principles，technical features，and advantages of HPLC，itsapplicability in veterinary drug testing，and explores the application of HPLC in this field. It also proposes optimization strategies for HPLCin veterinary drug testing to enhance the accuracy and reliability of drug detection， thereby ensuring the safety of animal-derived foods.

Keywords： high performance liquid chromatography; veterinary drug residues; quality control; optimization strategy

隨著畜牧業的快速發展，獸藥在動物養殖中的使用日益廣泛，有效提高了養殖效率和動物健康水平。獸藥的不當使用或過量使用會引發殘留問題，這些殘留物質通過肉、蛋、奶等動物源性食品進入消費市場，對人們的健康構成了嚴重的潛在威脅。準確、快速地檢測食品中獸藥殘留，是保障食品安全、維護消費者健康的關鍵環節。同時，確保獸藥質量和評估其藥代動力學特性，對從食品源頭控制殘留風險也顯得尤為重要。高效液相色譜法（HighPerformance Liquid Chromatography，HPLC）作為一種先進的分離分析技術，憑借其獨特的技術優勢，在食品獸藥檢測領域發揮著不可替代的作用。

1高效液相色譜法概述

1.1高效液相色譜法的基本原理

高效液相色譜法的核心在于利用不同物質在固定相和流動相之間的分配差異實現分離。流動相作為攜帶樣品通過色譜柱的液體，其選擇對分離效果至關重要。固定相則附著在色譜柱內壁或填充于柱中，與流動相相互作用，使樣品中的各組分以不同的速度通過色譜柱，從而實現分離。色譜柱作為HPLC的核心部件，其材質、粒徑、長度都會直接影響分離效率和分辨率。在HPLC系統中，高壓泵負責將流動相以穩定的流速推送通過色譜柱，而檢測器則負責檢測從色譜柱流出的樣品組分，將其轉化為電信號進行記錄和分析。

1.2高效液相色譜法的技術特點與優勢

得益于獨特的技術特點，HPLC在分析化學領域占據著重要地位。HPLC具有極高的分離效能，能夠分離出復雜混合物中的微量組分，甚至是一些性質相近、難以用其他方法分離的化合物。HPLC的靈敏度極高，能夠檢測到極低濃度的樣品組分，對于獸藥殘留等微量分析尤為重要。此外，HPLC還具有高選擇性，可通過調整流動相、固定相和檢測器參數等色譜條件，選擇性地分離和檢測目標化合物。這些特點使得HPLC成為分析化學中的強有力工具，廣泛應用于藥物分析、環境監測、食品安全等多個領域。

1.3高效液相色譜法在獸藥檢測中的適用性

高效液相色譜法特別適用于獸藥檢測，主要得益于其技術特點與獸藥分子特性的良好匹配。獸藥分子通常具有高分子量、高沸點、熱穩定性差和強極性等特點，使得傳統分析方法難以有效分離和檢測。而HPLC能夠通過調整流動相的極性、pH值，以及選擇合適的固定相，有效地分離和檢測這些獸藥分子[。例如，對于熱穩定性差的獸藥，HPLC可以在較低的溫度下進行分離，避免目標組分分解；對于強極性的獸藥，HPLC可以通過選擇極性較強的流動相和固定相，提高分離效率和選擇性。

2高效液相色譜法檢測獸藥在食品安全領域的應用

2.1食品中的獸藥殘留檢測

因直接關系到消費者的健康安全，食品中的獸藥殘留問題日益受到關注。獸藥在動物養殖中的廣泛使用，雖然有效提高了養殖效率和動物健康水平，但不當使用容易導致獸藥殘留于動物組織或產品中。這些殘留物通過食物鏈進人人體，特別是通過消費肉、禽、蛋、奶、水產品等動物源性食品，可能引發過敏反應、誘導細菌耐藥性，甚至對肝腎功能等造成慢性損害。例如，為控制水產品的死亡率，部分商家違法使用工業燃料孔雀石綠對水體進行消毒，問題曝光后極大地影響了水產品市場。

高效液相色譜法在食品獸藥殘留檢測中發揮著重要作用。以抗生素、磺胺類、喹諾酮類等常見獸藥為例，HPLC能夠準確、快速地檢測這些獸藥在動物組織、尿液或血液中的殘留量。對于抗生素，HPLC能夠分離并定量多種不同類型的抗生素，如 β- 內酰胺類、大環內酯類等，為評估動物源性食品中抗生素使用情況和殘留風險提供數據支持?；前奉愃幬镆蚪Y構相似，分離難度較大，通過優化流動相和固定相的選擇，能夠有效實現對這類藥物的分離和檢測。喹諾酮類藥物則因具有熒光特性，常采用熒光檢測器提高檢測的靈敏度和選擇性。

在進行獸藥殘留檢測時，樣品前處理和色譜條件優化是關鍵步驟。 ① 針對肌肉、肝臟、牛奶、雞蛋等不同基質的樣品，在處理時需采取不同的提取、凈化等步驟，去除樣品中的干擾物質，提高檢測的準確性和可靠性。例如，對于動物組織樣品，常采用固相萃取或液液萃取等方法進行提取和凈化。 ② 色譜條件優化則涉及流動相的選擇、色譜柱的類型、檢測器的設置等參數，這些參數的選擇直接影響分離效果和檢測靈敏度[]。不斷優化這些條件，可以建立穩定、可靠的食品獸藥殘留檢測方法，以滿足食品安全監管需求。

2.2 獸藥質量控制

獸藥質量控制是確保獸藥安全性和有效性的重要環節，關系到動物食品的源頭安全性。高效液相色譜法在獸藥質量控制中發揮著不可替代的作用。 ① 利用HPLC對獸藥活性成分進行定量分析，可以準確測定獸藥中的有效成分含量，確保獸藥產品符合質量標準。 ② HPLC還能夠檢測獸藥中的雜質，如有關物質、殘留溶劑等，為獸藥的質量評估提供全面、準確的數據。 ③ HPLC還可以用于建立獸藥指紋圖譜，實現獸藥質量的一致性評價。指紋圖譜是一種能夠反映目標產品整體特征的圖譜，通過比較不同批次獸藥的指紋圖譜，可以評估其質量的一致性。HPLC具有高分辨率和高靈敏度的特點，能夠準確測定獸藥中的多種成分，為建立指紋圖譜提供可靠的數據支持。通過指紋圖譜的建立和比較，可以有效監控獸藥的質量變化，確保獸藥產品的穩定性和可靠性。

2.3 獸藥藥代動力學研究

獸藥藥代動力學是研究獸藥在動物體內吸收、分布、代謝和排泄過程的一門學科。高效液相色譜法在獸藥藥代動力學研究中發揮著重要作用。利用HPLC測定獸藥在動物體內的血藥濃度，可以了解獸藥在動物體內的動態變化過程，為制訂合理的用藥方案提供依據，確保動物源性食品的安全性。

在研究藥物吸收過程時，HPLC可以測定動物給藥后不同時間點的血藥濃度，繪制藥時曲線，評估藥物的吸收速率和吸收程度。在分布研究中，HPLC可以檢測動物不同組織或器官中的藥物濃度，了解藥物在體內的分布情況。在代謝研究中，HPLC可以分離并鑒定藥物在體內的代謝產物，揭示藥物的代謝途徑和代謝機制[3]。在排泄研究中，HPLC可以測定動物尿液、糞便等排泄物中的藥物濃度，了解藥物的排泄過程和排泄途徑。

將高效液相色譜法應用于獸藥藥代動力學研究，可以全面了解獸藥在動物體內的動態變化過程，為臨床合理用藥提供科學依據。例如，可以根據藥物的吸收、分布、代謝和排泄特點，制訂合理的給藥方案，既確保藥物在動物體內達到有效的治療濃度，又避免藥物在體內蓄積或產生毒性反應，從而保障食品的安全性。

3高效液相色譜法在獸藥檢測中的優化策略

3.1 色譜柱與流動相的優化

色譜柱作為高效液相色譜法的核心組件，其材料、粒徑和長度對獸藥分離效果具有顯著影響。 ① 色譜柱材料的選擇至關重要。硅膠基色譜柱因良好的耐熱性和化學穩定性，廣泛應用于獸藥分離。對于某些在極端pH值條件下穩定的獸藥，聚合物基或混合基色譜柱可能更為合適，因其提供了更寬的pH值適用范圍和更好的分離選擇性。例如，在分析含有酸性或堿性官能團的獸藥時，選擇能夠耐受相應pH值范圍的色譜柱材料，可以有效提高分離效果。 ② 色譜柱的填料粒徑也是影響分離效率的關鍵因素。較小的粒徑能提供更高的柱效和分辨率，但會增加柱壓，對儀器要求更高。較大的粒徑雖能降低柱壓，但分離效果可能受損。在選擇填料粒徑時，需綜合考慮分離需求、儀器性能和樣品特性。對于獸藥檢測，通常選擇適中粒徑的色譜柱，以平衡分離效率和儀器負擔。 ③ 色譜柱的長度同樣對分離效果有所影響。較長的色譜柱能提供更好的分離度，但分析時間也會延長。在獸藥檢測中，若需分離多種組分且對分離度要求較高，可選擇較長色譜柱。若樣品組分簡單或需快速分析，則選擇較短色譜柱更為合適。

流動相的選擇和優化同樣對獸藥檢測的靈敏度和選擇性至關重要。流動相的組成、pH值和離子強度均可影響獸藥的分離和檢測。 ① 流動相組成需根據獸藥的化學性質進行選擇。例如，極性獸藥在極性流動相中分離效果更佳，而非極性或弱極性獸藥則適合在非極性或弱極性流動相中分離。調整流動相中有機溶劑的比例，可以優化獸藥的分離效果和檢測靈敏度。 ② 流動相的pH值對獸藥分離和檢測的影響不容忽視。某些獸藥在特定 pH 值下具有更好的分離效果或更高的檢測靈敏度[4]。在選擇流動相時，需考慮獸藥的酸度系數和酸堿性質，選擇合適的pH值以優化分離條件。 ③ 離子強度對獸藥分離的選擇性也有顯著影響。在流動相中加入適量鹽類可以調節離子強度，從而改變獸藥在色譜柱上的保留行為，可以實現獸藥的選擇性分離和檢測，提高分析的準確性和可靠性。

3.2 檢測器的選擇與優化

檢測器是高效液相色譜儀的關鍵部件，其選擇和優化直接影響獸藥檢測的靈敏度和準確性。 ① 紫外檢測器利用獸藥分子對紫外光的吸收特性進行檢測，是獸藥檢測中最常用的檢測器之一，具有靈敏度高、操作簡便等優點。紫外檢測器的選擇性相對較低，可能難以區分結構相似的獸藥。 ② 熒光檢測器則具有更高的選擇性和靈敏度。某些獸藥分子具有熒光特性，可以直接通過熒光檢測器進行檢測。對于不具有熒光特性的獸藥，可以通過衍生化反應使其具有熒光特性，從而提高檢測的靈敏度和選擇性。 ③ 電化學檢測器則利用獸藥分子在電極上發生氧化還原反應產生的電流進行檢測，具有靈敏度高、選擇性好等優點。電化學檢測器的應用范圍相對較窄，僅限于具有電化學活性的獸藥。

在選擇檢測器時，需根據獸藥的化學性質和檢測需求進行選擇。通過優化檢測器的參數如波長、電壓等，可以進一步提高檢測的靈敏度和準確性。

3.3 樣品前處理技術的優化

樣品前處理是獸藥檢測中的重要步驟，直接影響檢測的準確性和可靠性。 ① 固相萃取是一種常用的樣品前處理技術，利用固相萃取柱對獸藥進行選擇性吸附和洗脫，從而實現獸藥的分離和富集。通過優化固相萃取柱的填料類型、洗脫溶劑的組成和洗脫條件等參數，可以提高固相萃取的效率和選擇性。 ② 液液萃取是一種常用的樣品前處理技術，利用獸藥在不同溶劑中的溶解度差異進行分離和富集。通過選擇合適的萃取溶劑和萃取條件，可以提高液液萃取的效率和準確性。液液萃取過程中可能存在乳化現象，影響萃取效果，在實際操作中需注意控制萃取條件和操作技巧。 ③ 超聲提取是一種新興的樣品前處理技術。利用超聲波的空化作用破壞樣品細胞結構，釋放獸藥分子，從而提高提取效率。通過優化超聲提取的時間、功率和溶劑組成等參數，可以實現高效、快速的獸藥提取。

在優化樣品前處理步驟時，需綜合考慮獸藥的化學性質、樣品基質和檢測需求等因素。選擇合適的樣品前處理技術和優化處理條件，可以提高獸藥檢測的準確性和可靠性。

3.4洗脫方式的優化

洗脫方式是高效液相色譜法中的另一個重要參數，直接影響獸藥的分離效果和檢測效率。

梯度洗脫是通過在分離過程中逐漸改變流動相的組成，以實現不同保留時間的獸藥分子的有效分離[5]。梯度洗脫具有分離效率高、峰形好等優點，特別適用于復雜樣品的分離。在獸藥檢測中，梯度洗脫可以優化獸藥的分離效果，提高檢測的靈敏度和準確性。調整梯度洗脫的起始濃度、終止濃度、梯度時間和梯度形狀等參數，可以優化獸藥的分離效果。

等度洗脫則是在整個分離過程中保持流動相組成不變，具有操作簡便、重現性好等優點，適用于簡單樣品的分離或特定獸藥的檢測。在特定獸藥檢測中，等度洗脫可以提供穩定的分離條件和準確的檢測結果。優化等度洗脫的流動相組成、流速和溫度等參數，可以實現獸藥的高效、準確檢測。

在實際應用中，需根據獸藥的化學性質、樣品復雜性和檢測需求等因素選擇合適的洗脫方式。優化洗脫方式和相關參數，可以提高獸藥檢測的分離效率和檢測準確性

4結語

高效液相色譜法憑借其卓越的性能，在保障食品安全，特別是在應對動物源性食品中獸藥殘留挑戰方面展現出強大的技術優勢。本文探討HPLC在獸藥殘留檢測、質量控制及藥代動力學研究中的具體應用，展示其在確保獸藥安全性和有效性方面的重要作用。針對色譜柱與流動相、檢測器、樣品前處理技術以及洗脫方式等，提出切實可行的優化策略，以提高獸藥檢測的準確性和可靠性。隨著科技的發展和研究的深入，高效液相色譜法在獸藥檢測領域的應用將更加廣泛，為保障人類健康和促進畜牧業可持續發展貢獻更大力量。

參考文獻

[1]常磊，高森，付曉鶴，等.動物性食品中獸藥殘留 及實驗室常規檢測[J].中國禽業導刊，2025，42（2）：40-42.

[2]李春昊.畜產品安全檢測中色譜技術的應用[J].今日畜牧獸醫，2025，41（1）：74-76.

[3]馬超越，靳玉珠，左英芳，等.畜產品中獸藥殘留的快速檢測方法及相關研究[J].畜禽業，2025，36（1）：23-25.

[4]湯曜名，范偉煊.高效液相色譜法測定果蔬汁中的安賽蜜[J].中國食品工業，2025（10）：75-77.

[5]劉洪霞.高效液相色譜法在食品安全檢驗中的應用分析[J].實驗室檢測，2025，3（9）：79-81.