合肥地區某醫院2020年一2023年成人血培養病原菌分布及耐藥分析

中圖分類號：R978.1 文獻標志碼：A 文章編號：1001-8751（2025）03-0211-07

Distribution and Drug Resistance Analysis of Pathogenic Bacteria in Adult Blood Culturesfrom 2020 to 2023 ata Hospital in Hefei Area

Wang Juan，XiaXiu-san，WangXin，XuLi-hui （DepartmentofClinical Laboratory，People's HospitalofLujiang County，Anhui Province，Hefei）

Abstract： ObjectiveThe distribution and drug sensitivity of common isolates were gathered，the composition of positive isolates and drug sensitivity data were compiled，and the blood culture results of adult inpatients at a hospital in the Hefei region were examined.MethodsThis retrospective study was conducted at our hospital from January 2020 to December 2023.Specimens for blood culture testing and reporting from adult inpatients were selected，and the isolates cultured after machine-reported positivity were identifiedand analyzedfordrugsensitivity. 3 246 test results were included for statistical analysis after contaminated specimens and duplicate specimens of the same strain that had been isolated from the same patient within a week were eliminated.ResultsA total of 466 strains of pathogens were detected， with a blood culture positivity rate of 14.36%（466/3246） . Among them， 287 Gram-negative bacteria and 171 Gram-positive bacteria were detected， accounting for 61.59%（287/466） and （20 36.70%（171/466） ，respectively. There were 5 strains of anaerobic bacteria， accounting for 1.07%（5/466） ；2 strains of fungi， accounting for 0.43%（2/466） ；and1 strainof Gram-positive Corynebacterium，accounting for 0.21%（1/466） The top three pathogensWere Escherichia coli（172 strains， 59.93% ），Klebsiella pneumoniae（65strains， 22.65% ，and Staphylococcus aureus（44 strains， 25.73% ）. Escherichia coli showed a resistance rate of less than 8% to carbapenems， piperacillin/tazobactam，cefoperazone/sulbactam，and amoxicillin/clavulanicacid，while Klebsiella pneumoniae showed a resistance rate of less than 7% to these drugs. In the statistics of important drug-resistant strains， a total of 2strains ofcarbapenemantibioticresistantEscherichiacoli（CR-ECO），2strainsof Enterobactercloacaeresistantto carbapenems （CR-ECL），1 strainof carbapenemresistant Klebsiell pneumoniae（CR-KPN），11 strains ofoxacillinresistant Staphylococcus aureus（MRSA）. Conclusion The pathogens isolated from blood cultures in our hospital weremainlyGram-negativebacteria，especiallyEscherichiacoli.Bacterialresistancetoantibioticsvaried，and in order to prevent the growth of dug-resistant bacteria as aresult ofirrational antibiotic use，antibiotic sensitivity results should be fully taken into account when using antibiotics.Combination therapy with antibiotics can be considered for drug-resistant strains to achieve therapeutic goals.

Key words： blood culture； pathogenic bacteria；drug-resistant bacteria；distribution of positive bacteria;antibiotics； drug resistance rate

血流感染（Bloodstreaminfection，BSI）是指病原微生物進入血液引起的播散感染，是危及人類生命的全身性感染疾病[1]。主要由細菌或真菌等微生物及產生的毒素侵入血液引起的感染，有些如導管相關性感染可無明顯的毒血癥狀，但是大部分BSI可引起發熱寒戰，肝脾部位出現腫大，全身出現皮疹，心跳加快，呼吸急促等一系列全身性炎癥反應的臨床癥狀，嚴重者甚至可引起感染性休克甚至死亡[2]。近年來隨著免疫抑制劑、廣譜抗菌藥物和激素類藥物的廣泛應用以及侵入性操作的廣泛開展[3-4]，血流感染的發病率有逐年增高趨勢。有資料研究顯示我國每年血流感染病例超過20萬人，病死率高達 28.7%^[5] ，發生血流感染病死率較高，膿毒癥帶來的感染性休克病死率可高達 60%^[[6]] ，危害較大。因此當患者伴隨有發熱和寒戰等癥狀，需診斷患者是否發生血流感染，及時送檢血培養[7]，早期診斷血流感染，明確病原菌，選用合適的抗菌藥物，合理使用抗菌藥物，了解本地區病原菌分布及耐藥趨勢和特點，對患者治療具有重要意義。本文通過對地區某醫院連續4年成人住院患者血培養分離出的陽性菌數量、菌種分布特征及藥敏結果進行總結分析，為臨床在血流感染初期的抗菌藥物選擇提供科學參考。

1資料與方法

1.1 標本來源

回顧性收集地區某醫院2020年1月—2023年12月期間（年齡 ?18 歲的成人）的住院患者，血培養陽性瓶分離的菌株標本共3261份（同一患者僅統計第一次分離菌株信息），根據2022年《血液培養技術用于血流感染診斷臨床實踐專家共識》[8]和《臨床微生物實驗室血培養操作規范》[9]，結合臨床資料判斷，去除15份污染標本，污染率為 0.46%（15/3261） ，共計3246份檢測結果納入統計分析，其中陽性標本466份，陰性標本2780份，血培養陽性率為 14.36%（466/3246） 。

1.2血培養流程

根據《臨床微生物實驗室血培養操作規范》，疑似患者為血流感染，即在抗菌藥物應用之前抽取雙側雙套血培養標本（即2套4瓶，部分病例由于依從性原因采集1套2瓶），每瓶 8～10mL 。

1.3儀器和試劑

血培養儀器為碧迪公司（Becton，Dickinsonandcompany）的Bactec9050全自動血培養儀，微生物鑒定儀器為北京毅新博創生物科技有限公司的Clin-TOFⅡ飛行時間質譜儀，藥敏實驗儀器為生物梅里埃中國有限公司的Vitke2-Compact全自動細菌鑒定藥敏儀。血培養瓶為碧迪公司的成人需氧微生物培養瓶和厭氧微生物培養瓶。鑒定試劑為北京毅新博創生物科技有限公司的Clin-TOFII飛行時間質譜儀標本處理液。

藥敏試劑為生物梅里埃中國有限公司的革蘭陰 性桿菌GN13藥敏卡、革蘭陰性桿菌GN334藥敏卡、 革蘭陰性桿菌GN335藥敏卡和革蘭陽性菌GP68藥敏 卡。培養基選用天達診斷試劑有限公司的哥倫 比亞血瓊脂培養基、非選擇性巧克力瓊脂培養基、 麥康凱瓊脂培養基和沙保羅瓊脂培養基。

1.4方法

1.4.1血培養陽性標本處理

血培養儀出現陽性報警后，取出培養瓶，記錄報警時間及觀察生長曲線。在生物安全柜內使用無菌注射器抽取瓶中培養物 2～3 滴進行革蘭染色涂片，同時根據鏡檢結果在哥倫比亞血瓊脂培養基、非選擇性巧克力瓊脂培養基、麥康凱瓊脂培養基和沙保羅瓊脂培養基中選擇相應的培養基進行轉種，放入 35^°C 、 5% 二氧化碳培養箱內培養 18～24h ，若未見細菌生長則繼續培養。

1.4.2 細菌鑒定

采用北京毅新博創生物科技有限公司的ClinTOFⅡI飛行時間質譜儀進行質譜法鑒定。

1.4.3 藥敏試驗

采用生物梅里埃中國有限公司的Vitke2-Compact鑒定藥敏儀進行分離菌的藥敏試驗，藥敏折點結果判讀依據美國臨床實驗室標準化協會（CLSI）第33版《抗菌藥物敏感性試驗執行標準》。

1.4.4質控菌株

大腸埃希菌ATCC25922、大腸埃希菌ATCC35218、銅綠假單胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603、金黃色葡萄球菌ATCC29213、糞腸球菌ATCC29212、肺炎鏈球菌ATCC49619和白念珠菌ATCC14053，均為本實驗室常備菌株。

1.5血培養污染判斷

根據2022年《血液培養技術用于血流感染診斷臨床實踐專家共識》和《臨床微生物實驗室血培養操作規范》，結合臨床資料對本文統計的檢出菌中污染菌做出判斷，共計有15份污染標本，污染率為0.46%（15/3261）

1.6 統計學方法

采用瑞美系統統計功能以及Whonet5.6軟件對菌株分布及藥敏結果進行數據處理及統計分析。

2結果

2.1血培養分離病原菌的構成及分布

剔除一個星期內重復檢測分離出的菌株及15份污染標本后，本研究共納入分析病原菌466株，本文將分離出的病原菌按照革蘭染色性及病原菌類別結合起來分組統計。統計出需氧及兼性厭氧革蘭陰性桿菌287株，占比 61.59% ，需氧革蘭陽性球菌171株，占比 36.70% ，其他類型病原菌8株，占比1.72% 。在需氧及兼性厭氧革蘭陰性桿菌和需氧革蘭陽性球菌里，根據細菌名稱或種屬分類列出各類病原菌數量，分別再計算各自的占比，具體情況如表1＼～表3所示。

2.2不同科室血培養結果

血培養送檢標本數以感染性疾病科最多（1651例），其次為腎內科（293例）、呼吸與危重癥科（202例）、重癥醫學科（163例）和心血管內科（143例）等。陽性菌率分離率較高的科室依次是肝膽外科 （29.01%） 、腎內科 （26.96% 、消化內科 （18.75%） 、神經外科1 （17.24%） 和泌尿外科 （14.04% 等。上述科室的患者具有病情危重、基礎疾病、存在感染、營養不良以及有創治療等特點，導致其他部位的病原菌通過各種管路或機體屏障入侵血液系統的機會增多，研究提示不同科室患者血培養陽性率比較差異有統計學意義，詳見表4。

2.3各類病原菌耐藥情況

2.3.1主要革蘭陰性菌耐藥情況

在碳青霉烯類藥物敏感實驗中，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌均保持著較高的敏感率，其中大腸埃希菌對厄他培南和亞胺培南的耐藥率均僅為 1.16% 。肺炎克雷伯菌對厄他培南和亞胺培南的耐藥率分別為 3.08% 和 1.54% 。上述兩種菌對哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦和阿莫西林/克拉維酸等藥物的耐藥率也比較低，均在 8% 以下。但是兩種菌對氨芐西林或氨芐西林/舒巴坦耐藥率均較高，其中大腸埃希菌對氨芐西林或氨芐西林/舒巴坦耐藥率分別為79.07% 和 60.98% 。見表5。

2.3.2 碳青霉烯耐藥腸桿菌目細菌（CRE）檢出及耐藥 情況

通過對267株需氧革蘭陰性桿菌進行碳青霉烯類藥物的藥敏試驗，我們統計出對碳青霉烯耐藥腸桿菌目細菌（CRE）共檢出5株，檢出率為 1.87%（5/267） 其中耐碳青霉烯類大腸埃希菌（CR-ECO）2株，耐碳青霉烯類陰溝腸桿菌（CR-ECL）2株，耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌（CR-KPN）1株。CRE對大多數臨床常用抗菌藥物呈高度耐藥，對加酶抑制劑的復合制劑以及第三、四代頭孢菌素類藥物的耐藥率均在 100% ，但是對阿米卡星有較高的敏感性，5株CRE均對阿米卡星表現為敏感，耐藥率為0，見表6。

2.3.3 主要革蘭陽性菌耐藥情況

在檢出的44株金黃色葡萄球菌中，對苯唑西林耐藥的金黃色葡萄球菌（MRSA）共計11株，耐藥率為 25.00%（11/44） 。在檢出的77株凝固酶陰性葡萄球菌中，對苯唑西林耐藥的凝固酶陰性葡萄球菌（MRSCON）共計48株，耐藥率為 62.34%（48/77） 。本文對這兩類葡萄球菌的藥敏結果進行分析，發現苯唑西林耐藥的葡萄球菌，對紅霉素、克林霉素、左氧氟沙星、莫西沙星和慶大霉素等抗菌藥物的耐藥性均高于苯唑西林敏感的葡萄球菌，這與邵俊杰等[10]研究結果相同，詳情見表7和表8。

3討論

近年來，隨著侵入性手術的不斷增加以及廣譜抗菌藥物和皮質類固醇的不合理使用，BSI的發病率和病死率逐年上升，尤其以肺炎克雷伯菌引起的血流感染病死率較高[1]。對于血流感染診斷的金標準還是血培養，提高血培養檢測效率不但對于明確病原菌，進而盡快知曉其耐藥情況對于明確病原學診斷及治療具有重要意義。本研究共收集成人血培養標本3246份，其中陽性標本466份，陰性標本2780份，血培養陽性率為 14.36% 。Gao等[12]收集大連市中心醫院住院患者血培養數據，共計檢測24786份，陽性率為 7.15% ，與本文收集的樣本陽性率略有不同。提示各種病原菌的分布差異可能與不同醫院病種組成不同有關[13]。

抗菌藥物是臨床治療血流感染的首選藥物，但由于抗菌藥物的濫用，致病菌的耐藥問題日益嚴重。作為血流感染的金標準，血培養在診斷病原菌，并知曉其耐藥情況，進而合理應用抗菌藥物快速控制感染中，起著不可或缺的作用。本次研究發現居前三位病原菌分別是大腸埃希菌172株，占總病原菌比率為 36.91%（172/466） 、肺炎克雷伯菌65株，占總病原菌比率為 13.95%（65/466） 、金黃色葡萄球菌44株，占總病原菌比率為 9.44%（44/466） ，這與王揚等[14]研究統計結果接近。亞胺培南、美羅培南、厄他培南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦和阿莫西林/克拉維酸等對于革蘭陰性桿菌均具有良好的抑制作用。根據CLSIM100第31版建議，臨床應考慮優先選用哌拉西林/他唑巴坦和阿莫西林/克拉維酸等藥物。本文革蘭陰性桿菌的藥敏試驗中發現氨芐西林或氨芐西林/舒巴坦耐藥率均較高，其中大腸埃希菌對氨芐西林或氨芐西林/舒巴坦耐藥率分別為79.07% 和 60.98% 。臨床應避免使用該類藥物。CRE對大多數臨床常用抗菌藥物呈高度耐藥，對加酶抑制劑的復合制劑以及第三、四代頭孢菌素類的耐藥率均在 100% ，但對阿米卡星有較高的敏感性，與關佳灝等[15]研究結果一致，可用碳青霉烯類藥物聯合阿米卡星治療，可望降低病死率[16]。

本次統計分析中，凝固酶陰性葡萄球菌共77株，占需氧革蘭陽性球菌比率為 45.03% 。凝固酶陰性葡萄球菌是引起導管相關血流感染的重要病原菌[7]，但也是血培養最常見的污染菌，判斷凝固酶陰性葡萄球菌是否為致病菌，需充分考慮患者的臨床癥狀及危險因素，同時結合白細胞、降鈣素原和急性時相反應蛋白（即在機體發生炎癥、感染、心肌梗死及腫瘤等情況下，血漿濃度發生顯著變化的一類蛋白質）等感染性指標來綜合判斷[18]。一般無發熱或可歸因地發熱，且無明顯感染體征，或多次培養出不同菌株，或抗感染治療無效時，即便培養確定細菌，臨床均判斷為污染菌，包括凝固酶陰性葡萄球菌、棒狀桿菌、芽孢桿菌屬、微球菌屬和痤瘡丙酸桿菌等，培養檢出為污染菌的可能性較大。當然如果多次培養出同種上述菌或有血管置管等高危因素時，不應輕易判定為污染，而應仔細鑒別[19]。本次研究中，利福平和慶大霉素對葡萄球菌的耐藥率均較低，喹諾酮類藥物在苯唑西林耐藥的葡萄球菌中耐藥率明顯高于苯唑西林敏感的葡萄球菌，目前尚未檢出對萬古霉素和利奈唑胺耐藥的金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌。

由上述研究可知，我院患者的BSI病原菌復雜多樣，耐藥性不同。大量研究表明，雙側雙瓶能有效提高檢出率，并幫助我們判斷所檢出的細菌污染菌的可能性[20]。所以臨床應重視血培養雙瓶送檢，同時還應該關注雙瓶陰性率及報警時間。及時對病原菌分布及耐藥現狀進行監測，根據藥敏結果合理選擇有效藥物，改善BSI轉歸，提高治療效果。

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