天青地白對2型糖尿病小鼠降血糖的研究

Study on the Hypoglycemic Effect of Gnaphalium on Type 2 Diabetic Mice

CHEN Xia， ZHOU Meng -ting，YANG Hao （HunanMedicalCollege，Huaihua418ooO，China）

【Abstract】Objective：To explore the hypoglycemic efect of aqueous extract （TQ）of Gnaphaliumon type 2 diabetes mellitus（T2DM）. Methods：After 40KM male mice were adaptively raised for one week，1O were randomly selectedas thecontrol group.Theremaining mice wereraised with high sugarandhigh fatcombinedwith tail vein injection of streptozotocin （STZ）at 40mg/kg to establish the T2DM mouse model. The mice with successful modeling were randomly divided into a model group，a positive group and an experimental group.The experimental group was given the aqueous extract of Gnaphalium at 8g/kg ，the positive group was given metformin at 0.03g/kg ，and the control groupandthe model were given thesame volume of distilled water.After continuous intragastric administration for 4 weeks，the random blood glucose，triglycerides and total cholesterol ofthe mice in each group weredetected.The changes in the body weight，food intakeand water intake of the mice were recorded.Results：Compared with that of the normal group，the levelsof bloodglucose，triglyceridesand total cholesterol in the model group were significantly increased （ Plt;0.01 ），the body weight was significantly decreased （ Plt;0.01 ），and the food intake and water intake increased.Compared with theof the model group，the levelsof blood glucose and triglycerides in the experimental group were significantly decreased （ Plt;0.05 ， Plt;0.01 ），the weight increased，and the food intake and water intake decreased. Conclusion： This study found that Gnaphaliumcan reduce the blood glucose and triglyceride levels of type 2 diabetic mice and improve the symptoms of diabetes.

【Key Words】Gnaphalium； Herbal Medicine of Dong Nationality； Diabetes； Hypoglycemic ； Streptozotocin

近年來，由于生活水平的提高、飲食結構的改變以及日趨緊張的生活節奏方式等諸多因素的影響，2019年國際糖尿病聯盟指出20歲～79歲的成年人中，患有糖尿病（Diabetesmellitus，DM）的人數已達4.63億，我國這一數據也達到了1.164億，已成為糖尿病\"第一大國”[]。糖尿病是一種由于胰島素分泌不足和（或）作用缺陷引起的，以慢性高血糖為特征的代謝性疾病[2]在眾多的糖尿病患者中，2型糖尿病的比例約占 90%～95% 。表現為胰島素分泌相對缺乏或產生了胰島素抵抗，高血糖，且出現多飲多食多尿、體重下降等現象。隨著我國人口老齡化程度持續加深，中、青、少年長期處于緊張焦慮狀態并缺乏體育鍛煉，以車代步，這些都預示著我國的糖尿病患者數量會持續增長，糖尿病的控制顯得愈發重要[3-4]。天然植物蘊含大量降糖活性成分，是開發降糖相關保健食品與藥品的重要資源。天青地白（Gnaphaliumja-ponicumThunb.）來源為菊科植物細葉鼠曲草的全草，據《中華本草》記載，有毛女兒菜、翻底白等22 個別名，春季開花后采收，曬干或鮮用。味甘、淡，性微寒。能疏風清熱，利濕，解毒[5]。《中國侗族醫藥》湖南省侗醫常用驗方記載，治“糖尿病”方：天青地白適量，洗凈切碎煎水當茶喝，1＼～2月為1療程[6]。本文根據書籍中記載的天青地白藥效，利用我國南方常見的侗藥天青地白研究其對2型糖尿病模型小鼠降血糖的作用，以期為開發安全性好、藥效明確且成本低廉的民族醫藥提供依據。

1材料與方法

1.1實驗動物、主要試劑和儀器清潔級KM雄性小鼠40只，8周齡，體重（ 30±5）g ，購于沅江市惠源科教工程有限公司，動物生產許可證號：SCXK（湘）2019-0011，飼養于湖南醫藥學院動物實驗中心，飼養室溫 22^°C～24^°C ，相對濕度 40%～55% ，自由攝食、飲水，適應性飼養1周。維持飼料由湖南醫藥學院實驗動物中心提供，高糖高脂飼料（在維持飼料中添加 15% 蔗糖、 15% 豬油， 1% 蛋黃粉和谷氨酸鈉）[7-8]。STZ（批號：20230207）、檸檬酸（批號：20230415）和檸檬酸鈉（批號：20230415）購自北京博愛港生物技術有限公司。血糖儀及同批號血糖試紙購自三諾生物，甘油三酯和總膽固醇測定試劑盒（批號：141723001；批號141623008）購自深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司，旋轉蒸發儀（型號：RE52-99）購自上海亞榮生化儀器廠，德國BertholdLB942多功能酶標儀。

1.2天青地白供試液的制備取天青地白鮮草（3＼～

5月于花、草、葉茂盛時采摘），水煎3次，每次 30min

過濾，合并水提物， 80^°C 水浴濃縮至 （生藥） /mL 滅菌放入冰箱冷藏[1]，實驗前用蒸餾水配置至所需濃度。

1.3建立2型糖尿病小鼠模型、分組與給藥方式取40只KM小鼠適應性喂養一周后，隨機分為正常組（10只）和造模組（30只）。其中正常組給予基礎飼料喂養，造模組給予高糖高脂飼料喂養，為期4周。4周后，小鼠禁食、不禁水12h，造模組連續3天尾靜脈注射 20mg/mL 的鏈脲佐菌素（STZ）溶液，注射當量為 80mg/kg 。 72h 后禁食12h斷尾取血，測空腹血糖，血糖值 gt;11.1mmol/L 認為造模成功[9-10]，不合格者棄去，期間給予高糖高脂飼料（空白組給予普通飼料）。將造模成功的小鼠隨機分成3組，分別為模型組（ n=10 ）、實驗組（ 8g/kg 天青地白水提物灌胃）（ n=10 ）、陽性組（ （0.03g/kg 二甲雙胍灌胃）（ n= 10），正常組和模型組灌胃蒸餾水，以上各組每日灌胃1次。連續灌胃4周。用藥干預期間各組糖尿病大鼠每日飼以高糖高脂飼料，正常組給予普通飼料[]

1.4指標檢測

1.5統計學方法采用GraphpadPrism8統計軟件對數據進行分析，實驗數據以 表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較用LSD檢驗，以Plt;0.05 為差異有統計學意義。

2結果

2.1各組小鼠一般情況正常組小鼠毛色光滑亮澤，精神狀態良好，對外界環境刺激反應靈敏，動作迅速。模型組小鼠毛色焦枯，精神萎靡，反應遲緩，出現多飲多食多尿表現。實驗過程中模型組、陽性組、實驗組均陸續有小鼠死亡。與模型組比較，陽性組和實驗組小鼠毛色、精神狀態、體重、攝食量及飲水量均有所改善。

2.2各組小鼠體重水平正常組小鼠體重水平較為穩定，與正常組比較，模型組、陽性組體重低于正常組且呈下降趨勢，差異有統計學意義（ ；實驗組體重低于正常組呈增加趨勢，差異有統計學意義（ Plt;0.01） 。與模型組比較，實驗組體重增加，陽性組體重降低，差異均無統計學意義（ Pgt;0.05 。見表2。

2.3各組小鼠攝食量正常組小鼠攝食量較為穩定，與正常組比較，模型組、陽性組和實驗組攝食量明顯增加。與模型組比較，實驗組攝食量降低，陽性組攝食量增加。見表3。

2.4各組小鼠飲水量正常組小鼠飲水量較為穩定，與正常組比較，模型組、陽性組和實驗組飲水量明顯增加。與模型組比較，陽性組、實驗組飲水量降低。見表4。

2.5各組小鼠隨機血糖水平與正常組比較，模型組、陽性組和實驗組血糖明顯升高（其中第0周是空腹血糖，第1＼～4周是隨機血糖）。與模型組比較，實驗組第1＼～2周和第4周血糖明顯降低，差異有統計意義（ ?Plt;0.05 ）。見表5。

2.6各組小鼠血脂水平與正常組比較，模型組、陽性組和實驗組甘油三酯和總膽固醇明顯升高，（其中第0周是空腹血脂，第1＼～4周是隨機血脂）。與模型組比較，實驗組第2周和第4周甘油三酯明顯降低，差異有統計意義（ Plt;0.05） 。見表6。與模型組相比，陽性組和實驗組總膽固醇水平呈降低趨勢，差異無統計意義（ Pgt;0.05 ，見表7。

3 討論

糖尿病是目前全世界第三大嚴重威脅人類健康的慢性非傳染性疾病，尤其是2型糖尿病，而且發病率在持續地增長。2型糖尿病的發病機制主要是由于機體代謝紊亂，導致胰島素抵抗及胰島功能障礙，胰島素分泌減少、敏感性降低，使機體糖脂代謝異常[12]。很多中草藥中的功效成分具有調節血糖代謝的作用，但侗藥天青地白只在侗醫驗方中有記載，沒有降血糖的文獻報道。

本研究在給予高糖高脂喂養并聯合尾靜脈注射STZ后， FBGgt;11.1mmol/L ，小鼠體重明顯降低，出現多飲多食多尿癥狀，表明2型糖尿病模型小鼠復制成功。本研究結果顯示：給予天青地白水提物灌胃后，2型糖尿病模型小鼠在造模后第1周和第2周血糖和甘油三酯水平上升程度出現了緩解，第4周血糖水平明顯降低，總膽固醇水平呈降低趨勢，體重呈增加趨勢，攝食量和飲水量呈減少趨勢，表明天青地白水提物具有調節2 型糖尿病模型小鼠血糖、改善血脂水平和改善糖尿病“三多一少”癥狀的作用。由于注射STZ后，血糖水平會出現先急速降低再攀升的過程，模型組小鼠血糖變化規律與這個過程相符合；跟模型組相比，陽性組小鼠血糖水平明顯降低，體重降低，與二甲雙胍作用機制相符合；跟模型組相比，實驗組小鼠血糖和甘油三酯水平明顯降低，體重增加，提示天青地白水提物降糖作用可能與保護小鼠胰島細胞免受STZ破壞，改善小鼠胰島素水平相關。

本研究初步驗證了天青地白水提物降血糖的作用，有助于提升侗醫藥的科學性和實用性；可以激發更多的人來整理和保存民間珍貴的醫學知識，有助于侗醫藥的傳承和保護。

綜上所述，天青地白水提物可有效降低2型糖尿病模型小鼠血糖和甘油三酯水平，改善糖尿病“三多一少”癥狀，可為2型糖尿病的輔助治療提供幫助，并為研究民族醫藥提供一定的價值。

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（收稿日期：2024-09-13）