參葛補(bǔ)腎膠囊中淫羊藿的薄層色譜鑒別研究

Studyon ThinLayer ChromatographyIdentificationof Epimediumbrevicornu Maxim. inShenge Bushen Capsule

CHENMo，HAOJuan，WANGHanbin，WANGFanhong，LIZhen （Ramp;DCenter，XinjiangHuachunBiologicalPharmaceuticalCo.，Ltd.，Urumqi83oooo，Xinjiang，China）

Abstract：ObectieTostablishnperable，secfccurateandelableualityontrolethodforEpiedmbrevicouMaiinenge Bushencapsulebyeteminingtetialtilyerhromatogaphyondios.MetodsWithEpimedmbrevicouMaxieferencdicial materialsdicaieeceusancesdexomponentsthactofngeBuhnasuleasspotedomatogapated theefectsofdevelopingagentandtestsolventonthinlayerchromatographyanalysiswereinvestigatedtosreenoutthebestthinlayer chromatograpoosultsllGplatessirofoaaer7）teot sprayed with 1 % aluminum chloride ethanol solution，and examined under a ultraviolet lamp.The chromatographic spots were clear，the separationofoptsdtsoftoreosongiosol medicinalmatelsConcusinhisetodaeusedforealitatietfatiofEpimedevouMaxiinngssule Keywords：ShengeBshcapsule；EpimdiubrevicouMaxim.；ThilyerhomatographidentficatioExpanderChomogenicent

參葛補(bǔ)腎膠囊的主要原料為太子參、葛根和淫羊藿，功能主治為益氣，養(yǎng)陰，補(bǔ)腎[2。適用于輕、中度抑郁癥中醫(yī)辨證屬氣陰兩虛、腎氣不足證，癥見情緒低落、多思善慮、言語動(dòng)作減少、目光遲滯、健忘、食少、心悸膽怯、少寐多夢、心煩，舌質(zhì)淡紅或偏紅、舌苔白或花剝，脈細(xì)弱等[3-5]。淫羊藿（EpimediumbrevicornuMaxim.）為小檗科淫羊藿屬的多年生草本植物，為補(bǔ)命門、益精氣、強(qiáng)筋骨、補(bǔ)腎壯陽之要藥8]。臨床常用于治療男子陽痿不舉、滑精早泄、小便不禁以及女子不孕等癥-，還有降壓降血糖、利尿、鎮(zhèn)咳祛痰的作用[12-15]。淫羊藿是參葛補(bǔ)腎膠囊中的主要成分，與參葛補(bǔ)腎膠囊的功能主治有密切關(guān)系。故需建立淫羊藿的定性方法作為參葛補(bǔ)腎膠囊的質(zhì)量控制指標(biāo)。本文對(duì)展開劑優(yōu)化、供試品溶劑和顯色方法等方面進(jìn)行了系統(tǒng)研究，建立專屬性強(qiáng)、耐用性良好的淫羊藿的定性方法，作為參葛補(bǔ)腎膠囊的質(zhì)量控制指標(biāo)。

1材料與方法

1.1儀器與材料AB135-S電子天秤（梅特勒托利多設(shè)備有限公司）；HH-2數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州普天儀器制造有限公司）。Milli-QAdvantageA10超純水系統(tǒng)（Millipore公司）；TLCSCANBER3薄層掃描儀（CAMAG）； 1 0 × 1 0 雙槽薄層色譜展開缸（上海信誼儀器廠）； 0 . 3×1 0 0 定量點(diǎn)樣毛細(xì)管（上海長城科學(xué)儀器有限公司）；規(guī)格為 ，薄層層析硅膠G板（青島海洋化工廠）。

1.2藥材與試劑參葛補(bǔ)腎膠囊，批號(hào)：23005，來源于華春生物藥業(yè)股份有限公司；淫羊藿對(duì)照藥材，批號(hào)為121632-202103，來源于中國食品藥品檢定研究院；淫羊藿苷對(duì)照品；批號(hào)為110737-對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（中國藥典2020年版通則0502）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各 1 μ l ，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按照表1所列展開劑展開，取出，晾干，噴以 1 % 三氯化鋁乙醇溶液，置 紫外光燈下檢視。在供試品色譜中，觀察與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯示斑點(diǎn)的情況，依據(jù)觀察結(jié)果，對(duì)比不同展開系統(tǒng)的色譜圖的斑點(diǎn)顯示效果，確定最優(yōu)展開劑的種類及配比。

1.3.2 供試品溶劑考察取參葛補(bǔ)腎膠囊內(nèi)容物 加入表2所示溶劑 熱溶 ，濾過，濾液作為供試品溶液。淫羊藿對(duì)照藥材和淫羊藿苷對(duì)照品按照上述處理方法制成對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液。以三氯甲烷-甲醇-水按照體積比為7：2.5：0.25組成的混合溶劑為展開劑展開，取出，晾干，噴以 1 % 三氯化鋁乙醇溶液，置 紫外光燈下檢視。

1.3.3 顯色劑體系考察取參葛補(bǔ)腎膠囊內(nèi)容物 4 0 m g 加 80 % 乙醇 熱溶 ，濾過，濾液作為供試品溶液。淫羊藿對(duì)照藥材和淫羊藿苷對(duì)照品按照上述處理方法制成對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液。以三氯甲烷-甲醇-水按照體積比為7：2.5：0.25組成的混合溶劑為展開劑展開，混合溶劑為展開劑展開，取出，晾干，噴以表3所示混合溶劑作為顯色劑，置3 6 5 n m 紫外光燈下檢視，

2結(jié)果

2.1展開劑體系考察結(jié)果由圖1可知，展開系統(tǒng)1熒光斑點(diǎn)信息豐富，各組分分離效果好，且在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；展開劑系統(tǒng)2、11和17熒光斑點(diǎn)信息較少，在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，有些能顯示相同顏色的熒光斑點(diǎn)，樣品雖能分離，但顯色效果較展開劑系統(tǒng)1差，不符合預(yù)期效果；展開劑系統(tǒng)3＼～10、12＼～16明顯可視熒光斑點(diǎn)很少，各組分分離效果很差，供試品色譜拖尾嚴(yán)重。因此，選擇展開系統(tǒng)1（三氯甲烷、甲醇和水按照體積比為7：2.5：0.25組成的混合溶劑）作為參葛補(bǔ)腎膠囊中淫羊藿薄層鑒別的展開劑。

注：1：參葛補(bǔ)腎膠囊，點(diǎn)狀點(diǎn)樣；2：淫羊藿對(duì)照藥材，點(diǎn)狀點(diǎn)樣；3：淫羊藿苷，點(diǎn)狀點(diǎn)樣；4：參葛補(bǔ)腎膠囊，條狀點(diǎn)樣；5：淫羊藿對(duì)照藥材，條狀點(diǎn)樣；6：淫羊藿苷，條狀點(diǎn)樣。

2.2供試品溶劑考察結(jié)果由圖2可知，供試品溶劑1＼～8的供試品色譜中，熒光斑點(diǎn)信息豐富，各組分分離效果好，且在與對(duì)照藥材色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。因此， 2 0 % 2100 % 的乙醇溶液和 4 0 % ～ 1 0 0 % 的甲醇溶液均可作為溶解供試品的有機(jī)溶劑。

2.3顯色劑體系考察結(jié)果由圖3可知，顯色劑系統(tǒng)2雖能看到熒光斑點(diǎn)，熒光斑點(diǎn)信息少，且顯色效果較差，不符合預(yù)期效果。因此， 1 % 三氯化鋁乙醇溶液適合用作參葛補(bǔ)腎制劑中淫羊藿的薄層色譜檢測方法中的顯色劑。

注：1：參葛補(bǔ)腎膠囊，點(diǎn)狀點(diǎn)樣；2：淫羊藿對(duì)照藥材，點(diǎn)狀點(diǎn)樣；3：淫羊藿苷，點(diǎn)狀點(diǎn)樣；4：參葛補(bǔ)腎膠囊，條狀點(diǎn)樣；5：淫羊藿對(duì)照藥材，條狀點(diǎn)樣；6：淫羊藿苷，條狀點(diǎn)樣。

注：1：參葛補(bǔ)腎膠囊，點(diǎn)狀點(diǎn)樣；2：淫羊藿對(duì)照藥材，點(diǎn)狀點(diǎn)樣；3：淫羊藿苷，點(diǎn)狀點(diǎn)樣；4：參葛補(bǔ)腎膠囊，條狀點(diǎn)樣；5：淫羊藿對(duì)照藥材，條狀點(diǎn)樣；6：淫羊藿苷，條狀點(diǎn)樣。

3討論

本研究對(duì)參葛補(bǔ)腎膠囊中淫羊藿的薄層鑒別條件進(jìn)行了考察和優(yōu)化。由于《中國藥典》2020年版）6淫羊藿鑒別方法中，供試品顯現(xiàn)斑點(diǎn)顏色較淺，存在一定拖尾、擴(kuò)散、邊緣效應(yīng)等現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)結(jié)果不穩(wěn)定，重現(xiàn)性差。文英會(huì)等針對(duì)扶正解毒散中淫羊藿苷進(jìn)行了定性鑒別的方法研究，但其斑點(diǎn)顯色差。陳茹芳8報(bào)道了淫羊藿定性鑒別方法，但專屬性較差。田洪星等采用TLC法對(duì)淫羊藿破壁飲片中淫羊藿苷進(jìn)行薄層鑒別，其色譜圖斑點(diǎn)不清晰，且存在嚴(yán)重拖尾。本研究在色譜系統(tǒng)中考察了展開劑系統(tǒng)、供試品溶劑和顯色劑種類對(duì)淫羊藿薄層色譜分析的影響，從而確定了最佳或最佳范圍內(nèi)的薄層色譜檢測條件。本研究結(jié)果表明，采用硅膠G薄層板，用 20 % ～1 0 0 % 的乙醇溶液或 4 0 % ～ 1 0 0 % 的甲醇溶液均溶解供試品，以淫羊藿和淫羊藿苷為對(duì)照，在三氯甲烷、甲醇和水按照體積比為7：2.5：0.25組成的混合溶劑中展開，噴 1 % 三氯化鋁乙醇溶液顯色，置 紫外光燈下檢視，該色譜斑點(diǎn)清晰，各組分分離效果好，且在與對(duì)照品和對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，均顯相同顏色的斑點(diǎn)，結(jié)果證明上述的薄層鑒別方法可作為參葛補(bǔ)腎膠囊中太子參的質(zhì)量控制方法，有利于參葛補(bǔ)腎膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立和整體評(píng)價(jià)。另外，該方法還具有耗時(shí)短、操作簡單、靈敏度高、分辨率高、設(shè)備成本低以及成本低等優(yōu)點(diǎn)。

淫羊藿是參葛補(bǔ)腎制劑中主要成分，與參葛補(bǔ)腎制劑的功能主治有密切關(guān)系，因此對(duì)其進(jìn)行定性鑒別，可在一定程度上反映其質(zhì)量。但中藥成方制劑通常由多味藥組成，其藥效是多種活性物質(zhì)綜合作用的結(jié)果，若只對(duì)單味藥或單一成分進(jìn)行檢測，難以全面控制制劑的內(nèi)在質(zhì)量。因此，本研究后續(xù)應(yīng)考慮增加參葛補(bǔ)腎膠囊的含量測定指標(biāo)，及其他主成分的定性和定量鑒別指標(biāo)，從而能更好地控制制劑的質(zhì)量。

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收稿日期：2024-05-28；修回日期：2024-06-17