煙草莖腐病防治藥劑篩選試驗

摘要：

本試驗通過抑菌法、盆栽及苗床防治試驗測定了10%苯醚甲環(huán)唑EC、12.5%腈菌唑EC、98%惡霉靈原藥、58%甲霜靈錳鋅WP共4種殺菌劑對煙草莖腐病的防治效果。結(jié)果表明，4種供試藥劑中，12.5%腈菌唑EC對煙草莖腐病具有良好的防治效果，毒力室內(nèi)測定EC50為7.3 μg/mL，盆栽相對防效達(dá)93.3%，苗床防治效果為78.7%，在煙草生產(chǎn)中具有較好的推廣應(yīng)用價值。

關(guān)鍵詞：煙草莖腐病；藥劑；篩選試驗

中圖分類號：S435.72 文獻識別碼：A 文獻編號：1005-6114（2025）01-054-03

煙草莖腐病是由半知菌亞門灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea Pevs.）引起的一種苗期根莖病害，受害煙苗莖部腐爛，植株凋萎死亡，病莖、病葉表面密生灰色霉層，高溫高濕或陰雨連綿的天氣有利于發(fā)病，傳播速度較快，特別是在當(dāng)前大棚漂浮育苗過程中，若防治不及時或用藥不當(dāng)將對煙苗培育及大田生產(chǎn)帶來重大損失。煙草育苗大棚的多年連續(xù)使用，導(dǎo)致苗棚內(nèi)病原菌存量增加，煙草莖腐病發(fā)病率有逐年上升的趨勢［1，2］。

目前化學(xué)防治仍是煙草病害最為快速、有效的防治措施。筆者前期對福建煙區(qū)烤煙根莖類病害進行藥劑篩選和防治試驗，發(fā)現(xiàn)10%苯醚甲環(huán)唑 EC和12.5%腈菌唑EC及其復(fù)配劑對煙草立枯絲核菌、煙草炭疽病菌、煙草根腐尖孢鐮刀菌均具有較強的抑制作用［3］。 王秋萍等研究發(fā)現(xiàn)，甲霜·錳鋅和中生菌素與煙草專用肥混合施用對煙草病害具有較好的防治效果，并且可以提高煙葉產(chǎn)量。但是長期施用單一的化學(xué)藥劑，會增加病原菌的抗藥性，導(dǎo)致防效降低［4］。本試驗通過藥劑室內(nèi)毒力測定、盆栽及苗床防治試驗，開展煙草莖腐病防治藥劑篩選，以期為有效防治該病害及化學(xué)藥劑的輪換施用提供科學(xué)依據(jù)，培育健壯煙苗，保障大田生產(chǎn)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試藥劑：10%苯醚甲環(huán)唑EC，中國科學(xué)院植保所廊坊農(nóng)藥中試廠；12.5%腈菌唑EC，山東省聯(lián)合農(nóng)藥工業(yè)有限公司；98%惡霉靈原藥，延邊綠洲化工有限責(zé)任公司；58%甲霜靈錳鋅WP，西安美邦藥業(yè)有限公司。

供試菌株：灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea Pevs.）。

1.2 試驗方法

1.2.1 藥劑室內(nèi)毒力測定

1.2.1.1 菌株接種活化

將供試菌株在PSA培養(yǎng)基平板上接種活化，置于溫度26℃、 濕度70%的恒溫恒濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

1.2.1.2 活化菌株致病性測定

選取生長健壯的4～6葉期煙苗種植在黑色花盆中，緩苗后，采用刺傷接種法進行活化菌株致病性測定。將煙苗莖基部用消毒的針輕微刺傷，挑取1.2.1.1中活化3 d的帶培養(yǎng)基的菌株貼于煙苗傷口處，并用濕棉布保濕，以貼不帶菌株的純培養(yǎng)基為對照，刺傷接種病菌和對照處理各3次重復(fù)，每一重復(fù)10株煙苗，放置于室內(nèi)培養(yǎng)，保持室內(nèi)溫度26℃，3 d后觀察處理煙株的生長及發(fā)病情況。

1.2.1.3 毒力測定

參照蔣家珍等［5］采用菌落生長測定法，將上述各藥劑經(jīng)過濾滅菌后加于溶解冷卻至45℃左右的PSA培養(yǎng)基中，使其有效濃度分別為5、10、20、30、40 μg/mL，每一培養(yǎng)皿倒入上述含藥培養(yǎng)基15 mL，以加無菌水為對照，共6個處理，每一處理3次重復(fù)，每一重復(fù)3皿。培養(yǎng)基凝固后在培養(yǎng)皿中央接1 mm×1 mm大小活化的菌塊，置于26℃恒溫箱中培養(yǎng)36 h，測定菌落徑向線性生長量，計算藥劑對菌落生長的抑制率。通過菌絲生長抑制概率值和藥劑濃度對數(shù)值之間的線性回歸分析，求出各藥劑對病菌的有效抑制中濃度（EC50值）。

1.2.2 盆栽防治試驗

1.2.2.1 灰葡萄孢菌孢子懸浮液的制備

將單孢分離物在PSA平板上培養(yǎng)5 d，用內(nèi)徑6 mm的打孔器打取菌餅，接種到Bilays培養(yǎng)液中，每250 mL培養(yǎng)液接種4個菌餅，于26℃、120 r/min搖床上振蕩培養(yǎng)8 d。將培養(yǎng)好的病菌懸浮液經(jīng)2層紗布過濾，在顯微鏡下采用血球計數(shù)法計孢子數(shù)，配成濃度約1×105個/mL的孢子懸浮液。

1.2.2.2 帶菌育苗基質(zhì)的制備

參照李艷瓊等［6］的方法，取常規(guī)育苗基質(zhì)進行高壓滅菌，將上述配制的孢子懸浮液與滅菌基質(zhì)攪拌混勻，制備孢子濃度為150個/g的帶菌育苗基質(zhì)。

1.2.2.3 藥液配制

A.10%苯醚甲環(huán)唑EC 1 500倍液；B.12.5%腈菌唑EC 2 000倍液；C.98%惡霉靈原藥3 000倍液；D.58%甲霜靈錳鋅WP 800倍液。

1.2.2.4 防治處理

采用規(guī)格為60 cm×24 cm×4 cm的育苗盤，用70%（v/v）乙醇表面消毒，填上1.2.2.2中制備的帶菌育苗基質(zhì)，使之與孔穴邊緣齊平，播種。將化學(xué)藥劑與營養(yǎng)液混配為1.2.2.3中的藥液，以添加等量清水為對照，共5個處理，每一處理3個育苗盤，每盤種植10株煙苗。將育苗盤放置于裝有藥液及對照處理的搪瓷盤內(nèi)，置于20～26℃的溫室內(nèi)光照培養(yǎng)，每隔7 d換一次含藥劑的營養(yǎng)液。待煙苗4～6片葉時候觀察、統(tǒng)計不同處理煙苗發(fā)病率及危害程度。

1.2.3 苗床防治試驗

選取同一育苗大棚內(nèi)煙苗生長較為一致的相鄰漂浮育苗池進行試驗，在煙苗大十字期，分別在試驗苗池中加入上述藥劑，使苗床中營養(yǎng)液藥劑濃度分別為10%苯醚甲環(huán)唑EC 1 500倍液、12.5%腈菌唑EC 2 000倍液、98%惡霉靈原藥3 000倍液、58%甲霜靈錳鋅WP 800倍液，以不添加任何藥劑的苗池作為對照，共5個處理，每處理1個育苗池，其余均按照常規(guī)漂浮育苗技術(shù)進行培育［7，8］。在成苗期移栽前6 d觀察、記錄不同處理苗床煙苗發(fā)病情況。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)處理利用DPS 2000數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，Microsoft Excel XP進行統(tǒng)計分析。用Duncans新復(fù)極差分析比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 活化菌株致病性測定

活化菌株致病性測定結(jié)果顯示，接種活化菌株的煙苗發(fā)病率為100%，接種煙苗莖部腐爛，植株凋萎死亡，病莖、病葉表面密生灰色霉層，與大棚集約化漂浮育苗發(fā)病癥狀一致，僅貼純培養(yǎng)基的對照煙苗沒有出現(xiàn)發(fā)病癥狀，生長狀況良好。由此可見，保存菌株經(jīng)活化后保持良好的致病性。

2.2 藥劑室內(nèi)毒力測定

藥劑毒力測定結(jié)果表明，12.5%腈菌唑EC具有良好的抑菌效果，EC50值最小，為7.3 μg/mL；98%惡霉靈原藥和58%甲霜靈錳鋅WP次之，EC50分別為11.5 μg/mL和15.8 μg/mL；10% 苯醚甲環(huán)唑EC的EC50值為21.7 μg/mL，抑菌效果較差（表1）。

2.3 盆栽防治效果

試驗結(jié)果表明，所有供試藥劑對煙草莖腐病均有一定的防治效果，煙苗發(fā)病率與對照差異顯著（表2）。4種藥劑中，12.5%腈菌唑EC 2 000倍液對煙草莖腐病相對防效最佳，施藥后10 d煙苗發(fā)病率為6.7%，相對防效達(dá)93.3%；98%惡霉靈原藥3 000倍液和58%甲霜靈錳鋅WP 800倍液對煙草莖腐病防治效果次之，煙苗發(fā)病率分別為16.7%和36.7%，相對防效分別為83.3%和63.3%；10%苯醚甲環(huán)唑EC 1 500倍液防治效果最差，煙苗發(fā)病率高達(dá)93.3%。

2.4 苗床防治效果

4種供試殺菌劑對煙草莖腐病均具有一定的防效，在成苗期移栽前6 d觀察，12.5%腈菌唑EC 2 000倍液對煙草莖腐病防治效果最佳，煙苗發(fā)病率為3.2%，病情指數(shù)為5.4，相對防效為78.7%；98%惡霉靈原藥3 000倍液處理煙苗發(fā)病率為5.6%，病情指數(shù)為7.4，相對防效為70.8%；58%甲霜靈錳鋅WP 800倍液處理煙苗發(fā)病率為6.8%，病情指數(shù)為9.2，相對防效為63.6%；10%苯醚甲環(huán)唑EC 1 500倍液處理煙苗發(fā)病率為9.4，病情指數(shù)為12.4，相對防效為51%，對煙草莖腐病防治效果較差（表3）。試驗中供試煙苗均生長正常，無藥害現(xiàn)象發(fā)生。

3 結(jié)論

本試驗結(jié)合平板抑菌、盆栽及苗床防治試驗，對12.5%腈菌唑EC等4種殺菌劑對煙草莖腐病的防治效果進行測定。室內(nèi)毒力測定結(jié)果顯示，不同殺菌劑對煙草莖腐病菌（灰葡萄孢菌）均有一定的抑制效果，以12.5%腈菌唑EC抑菌效果最為顯著，室內(nèi)毒力測定EC50值為7.3 μg/mL；盆栽防治試驗結(jié)果表明，4種殺菌劑對煙草莖腐病均具有一定的防效，其中12.5%腈菌唑EC 2 000倍液處理表現(xiàn)最佳，施藥后7 d相對防效達(dá)93.3%；苗床防治試驗結(jié)果表明，4種殺菌劑在大棚育苗過程中對煙草莖腐病均具有一定的防效，以12.5%腈菌唑EC 2 000倍液最明顯，相對防效為78.7%。綜上，12.5%腈菌唑EC在室內(nèi)毒力測定、盆栽及苗床試驗中，對煙草莖腐病具有顯著的防效，均優(yōu)于其它3種供試藥劑，具有較好的推廣應(yīng)用價值。

參考文獻

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