臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革探索

摘" 要" 為提高醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)教學(xué)水平，強(qiáng)化學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作技能，對臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)進(jìn)行改進(jìn)，優(yōu)化教學(xué)方法，豐富實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，突出技能訓(xùn)練，把手工法和儀器法相結(jié)合，制作模擬標(biāo)本等。通過幾年的教學(xué)探索與實(shí)踐，取得良好的效果，使學(xué)生獲得全面專業(yè)的實(shí)踐訓(xùn)練，增強(qiáng)了動手能力、綜合能力，培養(yǎng)出各方面能力突出、技術(shù)過硬的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)人才。

關(guān)鍵詞" 臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)；實(shí)驗(yàn)教學(xué)；手工法；儀器法；顯微鏡

中圖分類號：G642.423" " 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：1671-489X（2024）21-0-05

0" 引言

臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)的主干課程，具有很強(qiáng)的實(shí)踐性和應(yīng)用性，教學(xué)內(nèi)容包括血液檢驗(yàn)、尿液檢驗(yàn)、糞便檢驗(yàn)、體液檢驗(yàn)、血型血庫等。實(shí)驗(yàn)教學(xué)需要培養(yǎng)學(xué)生的動手能力，培養(yǎng)學(xué)生完成各種檢驗(yàn)項(xiàng)目的操作技能。隨著2013年全國醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)本科教育由五年改為四年，教學(xué)課程做了相應(yīng)調(diào)整，臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)也隨之做了調(diào)整[1]。依據(jù)專業(yè)特點(diǎn)，以學(xué)生為核心，改進(jìn)教學(xué)方法，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，增強(qiáng)學(xué)生動手能力，同時(shí)培養(yǎng)學(xué)生具有初步的科研能力，具有觀察、分析、解決問題的能力，能夠開展各項(xiàng)特異、靈敏、有效的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目，為各級醫(yī)療衛(wèi)生單位培養(yǎng)技能嫻熟、綜合實(shí)踐能力強(qiáng)、安心本職工作、留得住用得上的專業(yè)醫(yī)衛(wèi)人才[2]。

1" 優(yōu)化實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，加強(qiáng)基礎(chǔ)訓(xùn)練，緊跟臨床發(fā)展步伐

現(xiàn)在醫(yī)院檢驗(yàn)科都已普遍實(shí)現(xiàn)儀器自動化檢測，學(xué)校的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目很多還是采用手工法，兩者出現(xiàn)脫節(jié)現(xiàn)象。那么，是否有必要開設(shè)這些傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目？成都醫(yī)學(xué)院的教師多次走訪附屬醫(yī)院、實(shí)習(xí)基地，與實(shí)習(xí)學(xué)生、醫(yī)院帶教教師面對面交流，了解了大量實(shí)際情況，之后根據(jù)學(xué)科特點(diǎn)，重新修訂實(shí)驗(yàn)大綱，對臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容做了調(diào)整重組，使教學(xué)內(nèi)容緊扣臨床工作，將臨床上最常用、最能培養(yǎng)學(xué)生技能的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目作為教學(xué)內(nèi)容，淘汰臨床上不常做的部分實(shí)驗(yàn)，如胃液、十二指腸液、羊水以及其他體液檢查。豐富實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，力求一個實(shí)驗(yàn)?zāi)芘囵B(yǎng)學(xué)生的多種實(shí)驗(yàn)技能，一個典型病例能覆蓋多個學(xué)科知識。修訂后的實(shí)驗(yàn)教學(xué)項(xiàng)目把手工法與儀器檢測有機(jī)地結(jié)合起來，兩者并不沖突排斥。

剛接觸課程的學(xué)生，頭腦中對實(shí)驗(yàn)操作一片空白，實(shí)驗(yàn)教學(xué)就是要強(qiáng)化其基本技能訓(xùn)練，使其能夠完成三大常規(guī)檢查，在完成手工實(shí)驗(yàn)操作的同時(shí)，能夠進(jìn)行常規(guī)儀器操作。在授課前，教師專門錄制規(guī)范操作的視頻，在上實(shí)驗(yàn)課時(shí)進(jìn)行播放，指導(dǎo)學(xué)生正確操作。同時(shí)，發(fā)揮學(xué)生的能動性，允許學(xué)生用手機(jī)拍攝自己的實(shí)驗(yàn)操作，并把一些錯誤操作拍攝下來制成視頻，經(jīng)學(xué)生同意后作為反面教材在實(shí)驗(yàn)課上播放，提醒學(xué)生注意哪些操作是正確的、哪些操作有錯誤。實(shí)驗(yàn)課結(jié)束后，很多學(xué)生表示實(shí)驗(yàn)效果不夠好，需要加強(qiáng)訓(xùn)練。在適當(dāng)時(shí)間開放實(shí)驗(yàn)室，讓學(xué)生根據(jù)具體情況，選擇不夠熟悉的實(shí)驗(yàn)反復(fù)練習(xí)，強(qiáng)化基本功的訓(xùn)練，使學(xué)生的動手能力得到質(zhì)的飛躍，部分操作能力達(dá)到熟練水平[3]。

2" 生物安全與小組團(tuán)隊(duì)

學(xué)生第一次進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時(shí)，帶教教師需要在課前反復(fù)強(qiáng)調(diào)安全意識，實(shí)驗(yàn)課使用的標(biāo)本有來自病人的，有學(xué)生群體和教師模擬制作的，某些標(biāo)本不可避免地含有傳染性的病原體。上實(shí)驗(yàn)課等同于在醫(yī)院檢驗(yàn)科工作，必須注意交叉感染的威脅，避免被感染的可能。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須穿專用白大衣，戴一次性口罩和一次性手套，使用儀器必須按照規(guī)定進(jìn)行操作，使學(xué)生養(yǎng)成良好的操作習(xí)慣，把實(shí)驗(yàn)風(fēng)險(xiǎn)降到最低。教導(dǎo)學(xué)生在實(shí)驗(yàn)操作過程中萬一被銳器刺傷、割傷的處理方式。實(shí)驗(yàn)完畢后，清潔器材、對廢棄物分類處理、實(shí)驗(yàn)室消毒都需要按照規(guī)定進(jìn)行。帶教教師必須履行職責(zé)、全程指導(dǎo)，不可離開實(shí)驗(yàn)室，保證學(xué)生安全完成實(shí)驗(yàn)操作[4]。

臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的操作性很強(qiáng)，需要小組團(tuán)隊(duì)合作，需要培養(yǎng)學(xué)生的團(tuán)隊(duì)合作精神。在實(shí)驗(yàn)課前，由學(xué)生自愿組合，每四個人組成一個小組，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。每次實(shí)驗(yàn)課之前，各小組以實(shí)驗(yàn)助理身份輪流參與實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備，配合教師進(jìn)行器材擺放、試劑準(zhǔn)備、完成預(yù)實(shí)（驗(yàn)）。實(shí)驗(yàn)過程中，以小組為一個單位進(jìn)行合作實(shí)驗(yàn)，每次實(shí)驗(yàn)前明確每個成員的職責(zé)，充分發(fā)揮每個成員的能動性，共同把任務(wù)完成。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，小組成員一起打掃衛(wèi)生，完成清潔工作，有皮膚破損者安排其他安全無污染的工作。這樣安排可以讓學(xué)生感受集體的溫暖，以后樂于團(tuán)隊(duì)合作[5]。

3" 采血、推片、細(xì)胞形態(tài)觀察

3.1" 采血

毛細(xì)血管采血是臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)的第一次實(shí)驗(yàn)課，也是基本技能的第一關(guān)，采血成功與否影響整個實(shí)驗(yàn)?zāi)芊襁M(jìn)行。在實(shí)驗(yàn)課前，教師用廢舊輪胎自制手指模型，實(shí)驗(yàn)課時(shí)發(fā)給每個學(xué)生，讓學(xué)生用手指模型進(jìn)行練習(xí)，反復(fù)訓(xùn)練，逐漸熟悉毛細(xì)血管采血技術(shù)。學(xué)生是第一次接觸乳膠吸管，用碘酒代替血液，讓學(xué)生用乳膠吸管吸取、擠出碘酒，感受乳膠頭的控制力度，逐漸熟練使用拇指、食指、中指操作乳膠吸管。靜脈采血也先采用模型練習(xí)，用輸液管代替血管，外面覆蓋紗布，學(xué)生用注射器刺穿紗布和輸液管，模仿靜脈抽血。經(jīng)過練習(xí)后，學(xué)生再進(jìn)行實(shí)際操作，一個學(xué)生充當(dāng)患者，另一個學(xué)生充當(dāng)采血人員，其余兩人協(xié)助配合，模擬心理疏導(dǎo)，克服緊張情緒，然后互換角色。

3.2" 推片

血液采集完畢后進(jìn)行推片，這都是需要學(xué)生反復(fù)練習(xí)才能掌握的基本功。實(shí)驗(yàn)授課前，教師先錄制視頻，直觀表現(xiàn)推片過程的動作要領(lǐng)、具體細(xì)節(jié)以及玻片的清潔度、血滴大小、退片時(shí)的角度與速度對血涂片質(zhì)量的影響。學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，教師在實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場操作、親自指導(dǎo)，督促學(xué)生操作，及時(shí)解答學(xué)生的疑問，糾正錯誤的實(shí)驗(yàn)操作。學(xué)生練習(xí)結(jié)束后，教師再播放推片不成功的視頻，分析推片失敗的原因，如玻片不清潔，血涂片過薄或過厚，推片有停頓，力度、速度、角度掌握不好等。學(xué)生一邊觀看視頻一邊對比自己的血涂片，能更好地尋找失誤原因，提高推片技能。

3.3" 細(xì)胞形態(tài)觀察

推片結(jié)束后，每位學(xué)生挑選三張血涂片進(jìn)行瑞氏染色，顯微鏡觀察血涂片。觀察血涂片實(shí)驗(yàn)，除了常規(guī)辨別各種細(xì)胞，還特地讓學(xué)生自己動手驗(yàn)證一些課堂知識。比如觀察血涂片不同部位進(jìn)行分類計(jì)數(shù)，親眼看到血涂片頭部小細(xì)胞多，尾部和兩側(cè)大細(xì)胞多，這樣通過實(shí)踐驗(yàn)證的方式比單純記憶教科書現(xiàn)成知識的認(rèn)識效果更好。另外，教師準(zhǔn)備一些涂片染色失敗的血涂片作為反面教材，供學(xué)生鏡檢觀察。觀察因推片原因出現(xiàn)的假橢圓形紅細(xì)胞、高滲環(huán)境出現(xiàn)的皺縮紅細(xì)胞、水分干擾出現(xiàn)的面包圈形紅細(xì)胞、擱置過久出現(xiàn)的老化細(xì)胞、染液偏酸或偏堿出現(xiàn)的紅染或藍(lán)染現(xiàn)象、染色劑沉渣導(dǎo)致的血涂片顆粒狀沉渣現(xiàn)象等，這樣可以豐富實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，讓學(xué)生通過真實(shí)的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證單純的理論知識。

4" 血常規(guī)檢驗(yàn)

顯微鏡細(xì)胞計(jì)數(shù)都是采用牛鮑氏計(jì)數(shù)板進(jìn)行，基本原理都是稀釋標(biāo)本，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定容積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量，然后換算出血液細(xì)胞數(shù)。傳統(tǒng)教材編排有白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)和血常規(guī)分析儀檢測，這幾個實(shí)驗(yàn)內(nèi)容有重復(fù)，但又不可取消，學(xué)生普遍認(rèn)為現(xiàn)在都已經(jīng)使用儀器檢測，手工法過時(shí)落伍了。針對這一現(xiàn)象，教研室研究決定對顯微鏡細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行增容，除了基本的技能訓(xùn)練，增加一些綜合性實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。

4.1" 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

該實(shí)驗(yàn)使用顯微鏡在牛鮑氏計(jì)數(shù)板上計(jì)數(shù)紅細(xì)胞，學(xué)生完成實(shí)驗(yàn)，熟悉操作，數(shù)出紅細(xì)胞數(shù)量。教師引導(dǎo)學(xué)生思考一些問題，如自己的實(shí)驗(yàn)操作有無出現(xiàn)問題，如果出現(xiàn)問題是什么原因?qū)е碌模龑?dǎo)學(xué)生正確分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，培養(yǎng)提高綜合分析能力。比如兩次計(jì)數(shù)結(jié)果差距較大，主要原因有：1）混合不均勻；2）錯誤辨認(rèn)；3）兩次間隔時(shí)間過長，部分紅細(xì)胞被破壞。解決這一問題的方法是多次充池，反復(fù)計(jì)數(shù)，數(shù)得越多，誤差越小。再如，紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果偏高，主要原因有：1）稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)確，取血過多或稀釋液過少；2）錯誤辨認(rèn)，把氣泡雜質(zhì)誤認(rèn)為紅細(xì)胞。紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果偏低，主要原因有：1）稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)確，取血過少或稀釋液過多；2）紅細(xì)胞被破壞；3）藥物影響。

4.2" 白細(xì)胞計(jì)數(shù)

該實(shí)驗(yàn)包括三個內(nèi)容：牛鮑氏計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)白細(xì)胞總數(shù)、瑞氏染色白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)和三分類血常規(guī)分析儀檢測。把這三個內(nèi)容安排在一起，構(gòu)成一個綜合性實(shí)驗(yàn)，讓學(xué)生比較兩種方法（手工法和儀器法），了解其優(yōu)缺點(diǎn)，通過實(shí)踐思考理解實(shí)驗(yàn)的目的。把各個血液標(biāo)本分發(fā)到各個小組，讓學(xué)生用牛鮑氏計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)白細(xì)胞總數(shù)，完成瑞氏染色白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，然后用三分類血常規(guī)分析儀檢測，看看兩種方法檢測結(jié)果差距大不大，小組各成員之間手工計(jì)數(shù)結(jié)果差距如何。通過實(shí)踐，學(xué)生知道儀器法不只是按電鈕，了解知識實(shí)驗(yàn)的來龍去脈、前因后果，知道手工操作并不與臨床實(shí)踐脫節(jié)。帶教教師還可預(yù)先在顯微鏡下的一個視野內(nèi)找到兩三個不同白細(xì)胞，讓學(xué)生依次辨認(rèn)，然后公布答案并分析緣由，這樣能激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)熱情，增強(qiáng)教學(xué)效果。

4.3" 血小板計(jì)數(shù)

血小板的實(shí)驗(yàn)教學(xué)重難點(diǎn)是血小板的形態(tài)辨認(rèn)，血小板在顯微鏡下與塵埃、細(xì)菌、細(xì)胞碎片、雜質(zhì)很類似，初學(xué)者難以識別。帶教教師在授課時(shí)注意悉心指導(dǎo)，幫助學(xué)生一一識別，通過細(xì)調(diào)顯微鏡后對折光性、大小形態(tài)的觀察，提高對血小板的辨認(rèn)能力。完成手工法計(jì)數(shù)血小板之后，再把同一血標(biāo)本上機(jī)檢測，比較兩種方法的檢測結(jié)果。儀器法采用電阻抗原理，不能辨別細(xì)胞碎片、塵埃細(xì)菌以及聚集血小板，因此需要用手工法計(jì)數(shù)對儀器法可疑結(jié)果進(jìn)行校正。另外，教科書上明確指出毛細(xì)血管采血的第一滴血應(yīng)擦去不用，檢測第二滴血，絕大部分學(xué)生只是機(jī)械記憶，并未探究其原因。實(shí)驗(yàn)課時(shí)，特地采集第一滴血和第二滴血，分別計(jì)數(shù)血小板，比較兩滴血的數(shù)量變化，讓學(xué)生通過自己的操作理解為何應(yīng)擦掉第一滴血，檢測第二滴血。

4.4" 五分類血細(xì)胞分析儀

五分類血細(xì)胞分析儀的操作是非常簡單的，檢驗(yàn)工作人員不僅需要學(xué)會操作儀器提供檢測數(shù)據(jù)，還需要學(xué)會綜合分析，能看懂白細(xì)胞的直方圖和散點(diǎn)圖，處理異常報(bào)警，為臨床提供更好的服務(wù)。實(shí)驗(yàn)中，為學(xué)生提供真實(shí)典型病例的血液標(biāo)本，讓學(xué)生嘗試分析白細(xì)胞檢測的若干結(jié)果，如中性粒細(xì)胞異常增高、淋巴細(xì)胞異常降低的數(shù)據(jù)、直方圖和散點(diǎn)圖，探析這些數(shù)據(jù)彼此之間的相互聯(lián)系，尋找圖形數(shù)據(jù)不一致時(shí)的解決方法。通過反復(fù)練習(xí)，學(xué)生逐漸具備正確分析白細(xì)胞的數(shù)據(jù)、直方圖和散點(diǎn)圖的能力。檢測結(jié)果出現(xiàn)異常報(bào)警，符合顯微鏡復(fù)檢規(guī)則，就進(jìn)行顯微鏡復(fù)檢。通過實(shí)驗(yàn)，加強(qiáng)學(xué)生對血細(xì)胞分析儀的認(rèn)識，讓學(xué)生明白儀器不是萬能的，不能完全替代手工法，特別是形態(tài)學(xué)方面，依然是以手工為主；以后在醫(yī)院工作，必須強(qiáng)化質(zhì)量意識，遇到儀器報(bào)警必須復(fù)檢，只有復(fù)檢后才能發(fā)出合格的檢查報(bào)告。

5" 血型鑒定和交叉配血

實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括ABO、Rh血型鑒定和交叉配血。血型鑒定的理論復(fù)雜，但實(shí)驗(yàn)操作簡單，理論課中學(xué)生已經(jīng)系統(tǒng)學(xué)習(xí)血型鑒定的原理，而血型鑒定的實(shí)驗(yàn)操作是學(xué)生需要掌握的基本技能。帶教教師首先按照正規(guī)的操作流程進(jìn)行示范操作，然后讓學(xué)生按照實(shí)驗(yàn)操作流程動手實(shí)驗(yàn)，分別采用正向定性和反向定性的方法鑒定血液標(biāo)本的血型。實(shí)驗(yàn)教學(xué)時(shí)，帶教教師巡視學(xué)生操作，指導(dǎo)學(xué)生正確操作，解答學(xué)生的疑問，分析原因、解決問題。

進(jìn)行交叉配血實(shí)驗(yàn)時(shí)，教師先回顧交叉配血的理論知識和操作流程，講解操作要點(diǎn)，然后給每組隨機(jī)發(fā)放兩支血型樣品。學(xué)生按照實(shí)驗(yàn)操作流程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，分別用鹽水介質(zhì)法和低離子聚凝膠介質(zhì)法進(jìn)行交叉配血。操作完成后，每組學(xué)生匯報(bào)陳述本組兩種方法交叉配血的結(jié)果，帶教教師挑選有不完全抗體的標(biāo)本，分別用鹽水介質(zhì)法和低離子聚凝膠介質(zhì)法進(jìn)行交叉配血，讓學(xué)生分別觀察兩種不同方法的結(jié)果，并對比分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，既能夠了解不同配血方法的原理，又可以熟悉不同配血方法的優(yōu)缺點(diǎn)，加深對完全抗體和不完全抗體的認(rèn)識[6]。最后，帶教教師適時(shí)播放一些教學(xué)視頻——與輸血配血相關(guān)的某些醫(yī)療事故，通過這樣的案例警醒學(xué)生要有責(zé)任心，強(qiáng)化樹立嚴(yán)謹(jǐn)負(fù)責(zé)的工作作風(fēng)。

6" 尿液檢驗(yàn)

6.1" 尿液標(biāo)本制作

尿液檢查的難點(diǎn)在于病理標(biāo)本不易保存，在醫(yī)院收集的病人典型尿液標(biāo)本難以保存到學(xué)生上實(shí)驗(yàn)課時(shí)。學(xué)院在多年實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，通過自制標(biāo)本代替真實(shí)標(biāo)本，取得良好的教學(xué)效果。自制標(biāo)本基本能滿足尿液化學(xué)檢查和尿液顯微鏡檢查所需。

6.2" 尿蛋白檢測

教師在基礎(chǔ)尿液中加入蛋白注射液，混勻制成不同濃度的蛋白尿，同時(shí)另取兩管蛋白尿分別加入Na2CO3和青霉素，分別制成堿性蛋白尿和富含青霉素的蛋白尿[7]。實(shí)驗(yàn)課時(shí)，學(xué)生用干化學(xué)試帶法、加熱乙酸法和磺基水楊酸法分別檢測這些蛋白尿，用實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)對三種實(shí)驗(yàn)方法的靈敏度作出真實(shí)的評價(jià)，學(xué)習(xí)正確選擇實(shí)驗(yàn)方法克服堿性尿和藥物的干擾。

6.3" 尿糖檢測

教師在基礎(chǔ)尿液中加入葡萄糖制成模擬糖尿，學(xué)生用班氏法和試紙法檢測糖尿。完成尿糖檢測實(shí)驗(yàn)之后，另外配制三管有干擾物的糖尿，分別是尿酸鹽、銨鹽和蛋白，讓學(xué)生通過實(shí)驗(yàn)排除這些干擾物質(zhì)的影響。含尿酸鹽的尿液在冷卻后觀察結(jié)果；含銨鹽的尿應(yīng)加堿煮沸除去銨鹽，避免氧化亞銅沉淀被抑制；含蛋白的尿應(yīng)用加熱乙酸法除去蛋白質(zhì)，避免影響銅鹽的沉淀。

6.4" 尿液顯微鏡檢查

尿液顯微鏡檢查尿沉渣是實(shí)驗(yàn)教學(xué)的重要內(nèi)容，需要學(xué)生鏡檢辨認(rèn)白細(xì)胞、紅細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型、結(jié)晶等成分。尿液標(biāo)本來自臨床患者，提前一個月在附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科收集典型病理尿液標(biāo)本，加甲醛在4 ℃冰箱中保存，屆時(shí)可滿足學(xué)生實(shí)驗(yàn)所需。學(xué)生可以觀察到各種管型、結(jié)晶、上皮細(xì)胞、黏液絲等有形成分，實(shí)驗(yàn)課時(shí)一一對照圖譜進(jìn)行辨認(rèn)，遇到難以辨別的成分舉手請帶教教師進(jìn)行辨認(rèn)。尿液標(biāo)本的紅細(xì)胞形態(tài)變化較大，可預(yù)先在尿液中加血，調(diào)節(jié)滲透壓，制備成高滲、低滲尿，學(xué)生從顯微鏡中就能觀察到皺縮紅細(xì)胞、幼紅細(xì)胞等。

7" 糞便檢驗(yàn)

糞便分析工作站已經(jīng)逐漸配置到一些醫(yī)院，它具有自動、快速、衛(wèi)生等特點(diǎn)，減輕了檢驗(yàn)人員的工作強(qiáng)度，但大多數(shù)基層醫(yī)院尚未普及，有些標(biāo)本依然需要人工檢測，故顯微鏡形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)依然是學(xué)生必須強(qiáng)化和重視的內(nèi)容。糞便標(biāo)本來自附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，實(shí)驗(yàn)課前經(jīng)人工處理后再使用。在糞便標(biāo)本中加入濃縮白細(xì)胞，混合后供學(xué)生鏡檢，不直接加血液，避免紅細(xì)胞過多。學(xué)生能從糞便中鏡檢到白細(xì)胞、紅細(xì)胞，還有糞便標(biāo)本中的食物殘?jiān)⒅镜蔚瘸煞帧＜S便隱血實(shí)驗(yàn)，淘汰愈創(chuàng)木酯法、氨基比林法等方法，僅選擇鄰甲聯(lián)苯胺法和單克隆膠體金法，安排學(xué)生用這兩種方法分別檢測含人血和含動物血的糞便標(biāo)本。兩種方法的原理不同，檢測人血和動物血的糞便標(biāo)本結(jié)果也不同，通過這個實(shí)驗(yàn)，學(xué)生自然學(xué)會用免疫學(xué)知識和化學(xué)知識分析解釋兩種檢測結(jié)果。

8" 漿膜腔積液檢驗(yàn)

漿膜腔積液分為滲出液和漏出液：滲出液為炎性，細(xì)胞較多，富含三種粒細(xì)胞；漏出液為非炎性，主要含淋巴、間皮細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)課時(shí)，讓學(xué)生通過實(shí)驗(yàn)鑒別這兩種積液，用血液分析儀和手工法同時(shí)操作，對兩種方法進(jìn)行比較。漿膜腔積液來自附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，學(xué)生首先在血液分析儀上測定待檢積液的細(xì)胞數(shù)，然后用牛鮑計(jì)數(shù)板測定積液細(xì)胞總數(shù)并完成瑞氏涂片細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。操作完成之后，經(jīng)常發(fā)現(xiàn)兩種方法的測定結(jié)果并不完全一致，帶教教師進(jìn)行講解分析。大多數(shù)情況下，血液分析儀與手工法的測定值差異較小，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是血液分析儀的電壓閾值、溶血素、檢出限、細(xì)胞計(jì)數(shù)重合損失等都是針對血液設(shè)計(jì)，用血液分析儀檢測漿膜腔積液，測得的間皮細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等其他非白細(xì)胞數(shù)略低于真實(shí)值。通過實(shí)驗(yàn)，學(xué)生掌握了漿膜腔積液的檢測方法，能夠?qū)煞N檢測方法做出最優(yōu)的選擇，對檢測結(jié)果作出正確的分析解釋。

9" 腦脊液檢驗(yàn)

由于腦脊液標(biāo)本比較難獲得，帶教教師用生理鹽水、血清、白細(xì)胞懸液制作模擬腦脊液。實(shí)驗(yàn)課開始時(shí)，先播放采集腦脊液和檢測腦脊液的視頻，使學(xué)生對檢測操作有直觀認(rèn)識，然后讓學(xué)生用手工法完成白細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)，用潘氏實(shí)驗(yàn)測定蛋白含量。完成操作之后，帶教教師展示一些常見疾病的腦脊液檢驗(yàn)化驗(yàn)單，并讓學(xué)生判斷分析是化膿性腦炎還是結(jié)核性腦炎，或病毒性腦炎，隨后讓學(xué)生分析檢測的模擬腦脊液對應(yīng)哪種腦炎。學(xué)生通過現(xiàn)場分析學(xué)以致用，提升學(xué)習(xí)興趣。

10" 問卷調(diào)查

課程結(jié)束后，通過問卷星對學(xué)校近三年的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)學(xué)生發(fā)布調(diào)查問卷，了解學(xué)生對實(shí)驗(yàn)課的評價(jià)，累計(jì)發(fā)布問卷517份，回收503份，有效問卷回收率為97.29%，問卷調(diào)查結(jié)果見表1。從調(diào)查問卷可以看出，大部分學(xué)生對臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)課還是比較滿意的，特別是“加深對手工檢測和儀器檢測的認(rèn)識”，學(xué)生的認(rèn)可度達(dá)到100%，均認(rèn)同提高了動手能力和分析解決問題的能力，擴(kuò)大了知識面；但不足的是有部分學(xué)生覺得實(shí)驗(yàn)內(nèi)容占時(shí)太多，這需要在以后的實(shí)驗(yàn)教學(xué)中注意改進(jìn)。

11" 結(jié)束語

經(jīng)過幾年的探索與實(shí)踐，在臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)上積累了一些經(jīng)驗(yàn)，對適應(yīng)學(xué)科發(fā)展、改善傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)與臨床脫節(jié)的狀況做了很有意義的嘗試，例如：制作模擬標(biāo)本，提高教師的業(yè)務(wù)水平，使實(shí)驗(yàn)更加真實(shí)；強(qiáng)化采血液推片鏡檢，把手工法與儀器法結(jié)合，選擇不同種方法檢測干擾標(biāo)本，提高學(xué)生的動手能力；引導(dǎo)學(xué)生分析各種檢測結(jié)果，提高其綜合分析能力。在實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中也出現(xiàn)種種尚未克服的困難和制約因素，比如學(xué)生使用的顯微鏡質(zhì)量較差，資金不足致使教學(xué)儀器陳舊老化等。在今后的教學(xué)實(shí)踐過程中將繼續(xù)改進(jìn)教學(xué)方式、完善實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，讓學(xué)生更好地學(xué)到知識，加強(qiáng)動手能力、分析能力、知識運(yùn)用能力，與國內(nèi)各院校一起，為培養(yǎng)出高素質(zhì)的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)人才而繼續(xù)努力。

12" 參考文獻(xiàn)

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*項(xiàng)目來源：成都醫(yī)學(xué)院教育教學(xué)項(xiàng)目“臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革探索實(shí)踐”（項(xiàng)目編號：JG2022073）。

作者簡介：周小東，副教授；彭克軍，通信作者，成都醫(yī)學(xué)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院臨床檢驗(yàn)學(xué)教研室主任，教授。