牛棘球蚴病的診斷與防治

摘要：牛棘球蚴病是一種嚴(yán)重危害人和牛群健康安全的人獸共患病，牛棘球蚴病的發(fā)生對(duì)養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展造成了嚴(yán)重威脅，該病的診斷與防治至關(guān)重要。本文就牛棘球蚴病的診斷與防治進(jìn)行綜述，以期為牛棘球蚴病的研究提供理論基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：牛棘球蚴病；診斷；防治

棘球蚴病，也被稱為包蟲(chóng)病，屬于較為常見(jiàn)且危害嚴(yán)重的人獸共患病，其病原是寄生于犬、狼、狐貍等動(dòng)物小腸內(nèi)的棘球蚴（棘球絳蟲(chóng)中絳期）[1]。目前被世界衛(wèi)生組織認(rèn)為該病是17種容易忽略的熱帶病之一[2]。棘球蚴感染牛后寄生在肝肺等器官內(nèi)，由于蚴體生命力旺盛且體型偏大，周?chē)M織容易被壓迫而導(dǎo)致萎縮，出現(xiàn)功能障礙，同時(shí)極易引發(fā)其他感染。一旦蚴體包囊破裂，極易導(dǎo)致宿主的過(guò)敏反應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)可危及宿主生命。該病的發(fā)生對(duì)養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展和養(yǎng)牛戶的健康安全構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。

牛棘球蚴病在人群中的感染率較高，特別是那些與牛和犬接觸較多的人群，如獸醫(yī)、農(nóng)民等。牛棘球蚴病的臨床癥狀包括發(fā)熱、肌肉疼痛、頭痛、乏力等，嚴(yán)重的感染還可能引發(fā)肺部炎癥、肝臟病變以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害。牛棘球蚴病的癥狀與其他寄生蟲(chóng)病有相似之處，正確的診斷對(duì)于及時(shí)治療和控制疫情具有重要意義。因此，牛棘球蚴病的診斷與防治對(duì)于養(yǎng)牛業(yè)的持續(xù)穩(wěn)定健康發(fā)展具有重要意義。

1 病原

棘球絳蟲(chóng)（echinococcus multilocularis）是帶科棘球?qū)俚某蓡T之一，也被稱作包生絳蟲(chóng)。細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)（echinococcus granulosus）、多房棘球絳蟲(chóng)（echinococcus multilocularis）是我國(guó)境內(nèi)分布較為廣泛的兩個(gè)品種，少結(jié)棘球絳蟲(chóng)（echinococcus oligarthrus）、福氏棘球絳蟲(chóng)（echinococcus vogeli）主要分布在南美洲[1]。牛、綿羊等動(dòng)物體內(nèi)也有多房棘球蚴，然而一般無(wú)法生長(zhǎng)至感染階段。目前，細(xì)粒棘球蚴是導(dǎo)致牛只患此病的主要病原。

細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的成蟲(chóng)體長(zhǎng)僅有3.6 mm。頭節(jié)直徑約為0.3 mm，近似梨狀，頭節(jié)上分布頂突和4個(gè)吸盤(pán)。頂突有肌肉組織，故伸縮能力非常強(qiáng)，有兩圈放射狀排列小鉤，而在頂突的頂部，頂突腺可分泌有抗原性的特殊物質(zhì)。蟲(chóng)體包括頭節(jié)、頸部、幼節(jié)、成節(jié)、孕節(jié)，有的還會(huì)多出1～2節(jié)，節(jié)片形狀狹長(zhǎng)。棘球蚴為細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的幼蟲(chóng)，呈圓形的囊狀體，包括囊壁、囊內(nèi)含物兩部分。它是單房性囊，有些帶有子囊和孫囊，直徑1～10 cm不等。角質(zhì)層位于外層，生發(fā)層位于內(nèi)層，二者組成整個(gè)囊壁。角皮層內(nèi)側(cè)有一生發(fā)層，具有細(xì)胞核，囊液充滿整個(gè)囊腔，也叫棘球蚴液。細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)主要寄生在犬、狼、狐貍等動(dòng)物的小腸內(nèi)，而牛、羊等家畜是中間宿主，終末宿主將蟲(chóng)卵和孕節(jié)排出體外，孕節(jié)因活動(dòng)能力強(qiáng)大，導(dǎo)致周?chē)笃h(huán)境受到污染。牛如果誤食了這些蟲(chóng)卵和孕節(jié)，在體內(nèi)被消化液消化，幼蟲(chóng)就會(huì)脫殼而出成為六鉤蚴，孵出后進(jìn)入腸壁，通過(guò)血液循環(huán)侵入肝臟和肺部，發(fā)育3～5個(gè)月，最終形成棘球蚴。

2 流行情況

世界各國(guó)均有細(xì)粒棘球蚴病的流行，放牧地區(qū)最為嚴(yán)重。我國(guó)大多數(shù)省（市）區(qū)都曾報(bào)道，其中西北、內(nèi)蒙古、西藏和四川4個(gè)地區(qū)發(fā)病較為頻繁，尤其新疆的細(xì)粒棘球蚴病形勢(shì)最為嚴(yán)峻。細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)有很強(qiáng)的宿主適應(yīng)性，該病可感染人，人感染的主要原因是直接接觸已感染的動(dòng)物，后經(jīng)口感染。高明艷等[3]在青海省西寧地區(qū)針對(duì)當(dāng)?shù)赝涝着５募蝌蕶z出率為3.38%，郭璐等[4]在新疆部分縣（市）調(diào)查得到牛細(xì)粒棘球蚴感染率為3.02%。牛棘球蚴病在一年中的不同季節(jié)都有發(fā)生，但通常在春季和夏季出現(xiàn)高峰期。這主要是因?yàn)樵谶@個(gè)時(shí)期，犬科動(dòng)物的糞便更容易傳播到牛群中。牛對(duì)該病的感染率雖然不高，可始終沒(méi)有凈化。

3 癥狀與病變

牛棘球蚴病的臨床表現(xiàn)是多樣化的，主要包括病程長(zhǎng)、癥狀輕、隱藏性強(qiáng)等特點(diǎn)。牛感染棘球蚴后，蟲(chóng)體數(shù)量較少時(shí)不表現(xiàn)出明顯癥狀，短期內(nèi)不易發(fā)現(xiàn)。隨病程延長(zhǎng)，病牛會(huì)出現(xiàn)食欲減退、體重驟然下降、咳嗽、呼吸困難等消化系統(tǒng)癥狀和呼吸系統(tǒng)癥狀。病牛發(fā)生劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)會(huì)使癥狀加重，如頭痛、頭暈、精神不振等神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，還伴有產(chǎn)奶量下降等情況。感染棘球蚴病的牛群多種系統(tǒng)功能受損，消耗牛體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和能量，致使免疫力下降，繼而容易感染其他疾病。當(dāng)囊泡破裂時(shí)，可造成強(qiáng)烈的過(guò)敏反應(yīng)，導(dǎo)致患牛突發(fā)死亡，解剖檢查時(shí)可以觀察到肝、肺等處體積異常增大，體內(nèi)多處存在囊腫，分布于肌肉、皮下等各處。叩診病變部位產(chǎn)生半濁音區(qū)，聽(tīng)診肺部時(shí)肺泡音減弱或消失，肝臟受蟲(chóng)體侵害時(shí)觸診有疼痛。由于棘球蚴對(duì)牛的內(nèi)臟功能產(chǎn)生負(fù)面影響，導(dǎo)致牛肉中的營(yíng)養(yǎng)成分受損，從而影響了肉制品的質(zhì)量。如肉質(zhì)變硬、口感和味道變差等。

4 診斷

牛棘球蚴病在生前多無(wú)明顯癥狀，診斷難度較大。采用間接血凝試驗(yàn)、皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)、ELISA等檢測(cè)手段在被棘球蚴感染致病的動(dòng)物和人類中有較高檢出率。病牛感染嚴(yán)重致死后，進(jìn)行剖檢時(shí)才能確診為棘球蚴病，可以結(jié)合癥狀及免疫學(xué)方法進(jìn)行初步判斷。目前我國(guó)已有10余種免疫檢測(cè)方法，多數(shù)用透析棘球蚴囊液做抗原，或用親和層析和聚丙烯酰胺凝膠電泳方法來(lái)濃集和分離抗原。以下論述幾種常見(jiàn)的棘球絳蟲(chóng)（蚴）檢測(cè)方法。

4.1 影像學(xué)檢測(cè)

1）X線檢測(cè)。X線檢測(cè)是否感染棘球蚴病，只有被棘球蚴感染的動(dòng)物出現(xiàn)鈣化灶時(shí)，才能顯現(xiàn)鈣化影[5]。棘球蚴囊腫的表現(xiàn)形式復(fù)雜，呈現(xiàn)形式多樣。囊腫發(fā)生破裂后，空氣有時(shí)會(huì)進(jìn)入外囊，呈現(xiàn)出弧形，狀如彎月。內(nèi)囊若有氣體進(jìn)入，致使內(nèi)外囊同時(shí)咳出囊液，呈現(xiàn)出粗糙的液態(tài)平面。內(nèi)囊和外囊一旦都破裂，空氣進(jìn)入兩者中間，形成雙弓形[6]；當(dāng)囊液和囊壁全部隨咳嗽排出體外，則表現(xiàn)為“水上浮蓮”狀[7]。

2）超聲檢查。超聲檢查具有便捷、迅速、檢出率高、無(wú)創(chuàng)傷的特點(diǎn)。根據(jù)超聲檢測(cè)結(jié)果，肝囊型包蟲(chóng)病包括囊型病灶、單囊型、多子囊型、破裂型、實(shí)變型和鈣化型6種[8]。肝泡型包蟲(chóng)病包括浸潤(rùn)型、病灶液化空洞型、病灶鈣化型3種[6]。超聲檢查可以較容易呈現(xiàn)出棘球蚴囊腫的大小，數(shù)量以及位置。但是要注意鑒別診斷，如原發(fā)性肝癌、血管瘤等。

3）斷層掃描技術(shù)。斷層掃描技術(shù)具有較高的分辨率和清晰的病灶細(xì)節(jié)顯示，對(duì)術(shù)前的定性診斷具有指導(dǎo)意義，能直觀地觀察到囊腫的形態(tài)、數(shù)目和位置以及病變周?chē)M織的狀態(tài)。根據(jù)斷層掃描技術(shù)的結(jié)果，可以將肝棘球蚴分為4種類型：囊腫型、鈣化型、實(shí)變型和混合型[6]。

4）磁共振技術(shù)（MRI）。沒(méi)有發(fā)生鈣化的棘球蚴病診斷可應(yīng)用此項(xiàng)技術(shù)，尤其適用于棘球蚴病傷及膽管系統(tǒng)時(shí)，識(shí)別膽道與病灶之間的關(guān)系，也可用于觀察棘球蚴與氣管、支氣管之間的關(guān)系。

5）分子影像學(xué)技術(shù)。分子影像學(xué)技術(shù)是數(shù)據(jù)處理、圖像處理、分子生物化學(xué)、納米技術(shù)的綜合應(yīng)用。在臨床上，可以對(duì)腫瘤發(fā)生過(guò)程中的關(guān)鍵標(biāo)記分子進(jìn)行捕捉，從而了解腫瘤在活體內(nèi)的病理生理變化和特征，包括疾病起因、發(fā)生、發(fā)展等都可以得到很好的觀察。目前，棘球蚴病病灶邊緣的生長(zhǎng)能力的研究，主要采用分子影像學(xué)技術(shù)指導(dǎo)根治。

6）三維重建系統(tǒng)。三維重建系統(tǒng)是利用計(jì)算機(jī)建立三維數(shù)字模型，構(gòu)建可視立體肝臟模型，對(duì)棘球蚴囊腫精確定位，提高手術(shù)安全性和精確性。在保留健康肝臟組織的前提下，完整切除病灶，不會(huì)對(duì)周?chē)M織造成傷害，降低術(shù)后肝臟功能衰竭的風(fēng)險(xiǎn)。

4.2 免疫學(xué)檢測(cè)

1）皮內(nèi)實(shí)驗(yàn)（IDT）。皮內(nèi)試驗(yàn)為速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，便捷，檢出率高，但檢測(cè)結(jié)果較容易呈假陽(yáng)性，而且抗原標(biāo)準(zhǔn)化難度高、特異性差，個(gè)別動(dòng)物體會(huì)出現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)，需要其他診斷方式輔助鑒別。

2）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）。用已知抗原與待測(cè)樣品結(jié)合，形成復(fù)合物，可通過(guò)囊液檢測(cè)出囊腫IgM。該方法陽(yáng)性檢出率約80%～90%，但也存在囊腫切除半年后，或者棘球蚴已經(jīng)死亡時(shí)，該試驗(yàn)結(jié)果的可靠性會(huì)變差，甚至可能呈現(xiàn)陰性[9]。

3）間接血凝試驗(yàn)（IHA）。IHA是一種將抗原（或抗體）覆蓋在紅細(xì)胞上，使其變成致敏的載體，進(jìn)而與相應(yīng)的抗體（或抗原）結(jié)合，通過(guò)觀察凝集反應(yīng)來(lái)判斷樣品是否為陽(yáng)性的方法。一般使用戊二醛醛化紅細(xì)胞進(jìn)行致敏試驗(yàn)。此實(shí)驗(yàn)具備出色的特異性和敏感性，艾山江·塔斯坦等[10]在伊寧周邊地區(qū)對(duì)感染棘球蚴病的綿羊進(jìn)行間接血凝試驗(yàn)，陽(yáng)性檢出率98%以上。

4）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。是一種利用酶對(duì)抗體進(jìn)行標(biāo)記，再觀察標(biāo)記物判定試驗(yàn)結(jié)果的方法，即把已知的抗原或抗體吸附，對(duì)特異性抗原或抗體進(jìn)行定量定性測(cè)定，通過(guò)顯色來(lái)判斷結(jié)果，此方法的檢出率較高，且能排除非特異性抗體的干擾。鄧燦新等[11]利用此類方法，組成羊棘球蚴間接ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，應(yīng)用于Eg95亞單位的疫苗免疫接種后的抗體效價(jià)評(píng)價(jià)。

5）免疫膠體金技術(shù)。以微孔濾膜做固相載體，膠體金作指示劑，對(duì)抗原、抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)進(jìn)行顯色。反應(yīng)直觀，操作簡(jiǎn)單，無(wú)毒無(wú)害。楊智勇等[12]采用膠體金法試劑盒，用于棘球蚴病血清學(xué)診斷，該方法敏感性和特異性較好，但是需要用肉眼觀察，容易產(chǎn)生誤差。

4.3 分子生物學(xué)檢測(cè)

1）環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法（LAMP）。環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法是利用一種鏈置換DNA 聚合酶在等溫條件保溫30～60 min，完成核酸擴(kuò)增的方法。該方法對(duì)實(shí)驗(yàn)要求較低，僅需要水浴鍋等簡(jiǎn)單儀器，也無(wú)需進(jìn)行電泳、溫度循環(huán)、模板的熱變性及紫外觀察等過(guò)程，在基層的獸醫(yī)臨床檢測(cè)中廣為應(yīng)用。蔣巧燕等[13]通過(guò)對(duì)多房/細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)兩種蟲(chóng)體ND2進(jìn)行設(shè)計(jì)，基于LAMP技術(shù)，建立起一種分子生物學(xué)方法，可以鑒別該病原的不同分型。

2）實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）。實(shí)時(shí)熒光PCR在傳統(tǒng)PCR中加入具有熒光基因的特殊物質(zhì)，通過(guò)觀察熒光信號(hào)在整個(gè)反應(yīng)過(guò)程中的積累，進(jìn)行定性和定量的分析方法。相比傳統(tǒng)PCR，qPCR特異性更高，敏感性更好，可對(duì)DNA定量評(píng)估。

3）多重PCR。與傳統(tǒng)PCR有所不同，反應(yīng)體系中包含兩對(duì)及以上引物，可以一次檢測(cè)多種目的基因，實(shí)際應(yīng)用中可以判斷是否存在細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)、多房棘球絳蟲(chóng)與其他絳蟲(chóng)同時(shí)感染的可能。

4）重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)（RPA）。RPA能夠定位雙鏈DNA中的同源序列，是一種利用重組酶連接引物，使其成為蛋白-DNA復(fù)合物來(lái)實(shí)現(xiàn)的檢測(cè)方法。同源序列一旦被引物定位，鏈交換反應(yīng)就會(huì)發(fā)生，DNA合成隨之啟動(dòng)，并對(duì)目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增，這種技術(shù)目前可應(yīng)用于現(xiàn)場(chǎng)的診斷。

5）重組酶介導(dǎo)等溫核酸擴(kuò)增技術(shù)（RAA）。是一種在等溫條件下借助單鏈結(jié)合蛋白、重組酶、DNA聚合酶進(jìn)行核酸擴(kuò)增的方法，這種技術(shù)具有快速檢測(cè)大量樣品的優(yōu)點(diǎn)。丁昕等[14]建立了一種細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)熒光RAA檢測(cè)方法，39 ℃下20 min，能夠完成對(duì)細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)基因組DNA特異性擴(kuò)增，含靶序列的重組質(zhì)粒DNA最低檢測(cè)量為10拷貝/？滋L，細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)基因組DNA樣本0.1 ng/？滋L。

5 治療

目前，牛棘球蚴病的治療應(yīng)先進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)，必要時(shí)進(jìn)行手術(shù)。

5.1 藥物治療

1）阿苯達(dá)唑。按照90 mg/kg·bw給藥[15]。

2）吡喹酮。根據(jù)病牛體重按比例給藥，每次按照50 mg/kg·bw比例喂藥，間隔5～10 d進(jìn)行下一次給藥，喂藥5～6次即可有較好效果[16]。

3）三氯苯達(dá)唑。推薦口服，該藥物應(yīng)遵循循序漸進(jìn)的原則，逐步加大藥量，根據(jù)病牛體重調(diào)整藥量，推薦劑量10～15 mg/kg·bw[17]。

5.2 手術(shù)治療

手術(shù)前，應(yīng)準(zhǔn)備好一系列工具，如剪毛剪、手術(shù)刀、止血鉗、縫合針（線）和直剪等，同時(shí)準(zhǔn)備好麻醉藥和消毒藥。在手術(shù)開(kāi)始前，首先要對(duì)病牛進(jìn)行固定，針刺包囊法為常見(jiàn)方法[15]。需要特別注意的是，病牛的顱骨常因病原體的寄生而變薄，因此通過(guò)觸診可以確定手術(shù)位置，治愈效果會(huì)比較好。在手術(shù)過(guò)程中，還需要關(guān)注患病牛的病情程度，以便在手術(shù)過(guò)程中進(jìn)行嚴(yán)格的消毒處理，并做好一切準(zhǔn)備工作，以防病情惡化時(shí)進(jìn)行緊急救治。

6 預(yù)防

加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，保持牛舍的清潔衛(wèi)生，定期清理糞便和消毒，提供干凈飲水和飼料，避免牛群接觸棘球蚴的感染源，尤其注意避免動(dòng)物混養(yǎng)，防止牛群接觸到犬的糞便導(dǎo)致感染棘球蚴病。同時(shí)合理控制牛群數(shù)量和密度，避免過(guò)度擁擠，減少牛群之間的接觸機(jī)會(huì)，降低感染風(fēng)險(xiǎn)。還要定期進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)，使用有效的抗蟲(chóng)藥物，如阿苯達(dá)唑等，可獲得較為顯著的預(yù)防效果。

建立免疫防護(hù)制度也具有重要意義。建立牛群的免疫防護(hù)制度，可以提高抗病能力，降低感染風(fēng)險(xiǎn)。加強(qiáng)牛群的監(jiān)測(cè)和診斷，定期對(duì)牛群進(jìn)行體檢和糞便檢測(cè)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)棘球蚴感染的病例，采取相應(yīng)的治療和管理措施。以及定期進(jìn)行抗體檢測(cè)，了解牛群中棘球蚴感染的情況，及時(shí)發(fā)現(xiàn)感染源并采取相應(yīng)的控制措施。最后，加強(qiáng)飼養(yǎng)人員的培訓(xùn)和管理，增強(qiáng)防病意識(shí)和提高操作技能，確保各項(xiàng)防病措施得到有效執(zhí)行。

7 結(jié)語(yǔ)

牛棘球蚴病是一種嚴(yán)重危害養(yǎng)牛業(yè)的寄生蟲(chóng)病，準(zhǔn)確的診斷和全面的防治對(duì)于防止疾病的傳播和控制疫情至關(guān)重要。目前我國(guó)已有多種檢測(cè)方法應(yīng)用于棘球蚴病的診斷，有效促進(jìn)了該病的診治，防止疾病的擴(kuò)散和蔓延。未來(lái)，應(yīng)繼續(xù)加強(qiáng)對(duì)該疾病的研究和監(jiān)測(cè)，提高診斷和防治水平，以減少人類和動(dòng)物的感染風(fēng)險(xiǎn)，有效降低牛棘球蚴病給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)的巨大損失。同時(shí)需增強(qiáng)預(yù)防意識(shí)，及時(shí)采取科學(xué)有效的安全措施，降低牛棘球蚴病的發(fā)生概率，維護(hù)公眾健康。■

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收稿日期：2023-07-25

作者簡(jiǎn)介：趙心悅（2000.10— ），女，大學(xué)本科，研究方向?yàn)榧倚笠卟z測(cè)。

*通信作者：賈偉娟（1996.10— ），女，碩士研究生，研究方向?yàn)榧倚笠卟z測(cè)。