豬流行性腹瀉滅活疫苗臨床應用研究

摘要：PEDV（porcine epidemic diarrhea virus）引起的產房仔豬腹瀉是目前危害養豬業的主要三大傳染病（ASF、PRRS、PED）之一，給養豬業造成巨大的經濟損失。疫苗免疫仍然是防控PEDV的主要手段。為了進一步驗證改進后止瀉威對PED的防控效力，本研究在湖南瀏陽某發病豬場評價了其在臨床上對產房仔豬的保護效果。從產房仔豬腹瀉率及抗體水平分析，止瀉威疫苗免疫具有良好的免疫保護效力，表明該疫苗為產房仔豬PED的防控提供了更有效的措施。

關鍵詞：PED；PEDV；疫苗

自2011年底，由豬流行性腹瀉病毒（porcine diarrhea virus，PEDV）GⅡ群引起的豬流行性腹瀉（PED）在我國河南暴發以來，PEDV GⅡ快速蔓延至全國各大小豬場，目前已成為危害養豬業的三大傳染病（ASF、PRRS、PED）之一。該病主要危害新生仔豬，臨床表現為嘔吐、水樣腹瀉、脫水、消瘦、死亡，以7日齡內仔豬發病最為嚴重，發病率與死亡率可高達100%[1]。生長育肥豬感染后偶有發病，死亡率低[2-3]，但可能長期排毒，是豬場發病的病毒來源之一。對于PED的防控，疫苗免疫是比較經濟實惠的手段。

湖南瀏陽某豬場，為6層樓房養豬，存欄基母約6 000頭。自2023年1月份開始發生PED，2、3月份產房死亡率達30%，經過長達6個月的反復感染，情況有所改善，但產房一直存在約10%仔豬出現腹瀉（如圖1），采樣檢測仍然為PEDV感染致病。經協商，推薦使用廣東溫氏大華農生物科技有限公司止瀉威進行免疫防控，2023年11月開始，止瀉威產品進入豬場。

1 材料與方法

1.1 材料

疫苗：大華農止瀉威（批號：20235223，有效期至20240911）60瓶。

1.2 方法

1）免疫方案：2樓、3樓、4樓、5樓、6樓均免疫止瀉威疫苗，重點跟蹤2樓的防控數據。生產方式為6天批，每周一個單元母豬上產床生產。

自2023年11月20日開始使用止瀉威疫苗免疫，并與前期競品疫苗免疫豬進行對比，免疫方案如表1。

2）腹瀉情況觀察：母豬產仔后，觀察2樓各產房的仔豬流行性腹瀉發病情況，統計發病仔豬窩數。

3）血清/初乳采集：在4單元產房隨機采10頭產前3～6天母豬血清，在開產后，隨機采集10頭母豬初乳，分別檢測PEDV IgG與IgA抗體水平。IgG、IgA抗體檢測委托長沙愛科博生物科技有限公司執行。

2 結果

2.1 臨床觀察

競品疫苗免疫母豬所產仔豬陸續發生腹瀉（如圖2A），免疫止瀉威的母豬產仔后，產房腹瀉情況得到有效改善，基本未發現有豬流行性腹瀉仔豬（如圖2B）。

2.2 仔豬腹瀉數據統計

產仔后持續跟蹤哺乳仔豬腹瀉情況， 至12月25日，即仔豬15～20日齡，5、4單元（止瀉威免疫）仔豬均無腹瀉發生；而1、2、3單元（競品疫苗免疫）仔豬不同程度發生腹瀉（如表2），發病窩數分別為13、17、32，窩腹瀉率分別達到24.1%、31.5%、58.2%。

2.3 抗體檢測

1）PEDV IgG抗體（如圖3）：血樣抗體均為陽性 （+），平均SP值為3.228±0.037，變異系數為1.149%，抗體水平高且整齊。乳汁抗體均為陽性 （+），平均SP值為3.237±0.053，變異系數為1.633%，抗體水平高且整齊。

2）PEDV IgA抗體（如表3）： 兩次免疫止瀉威后的血清和乳汁中都有高水平的IgA抗體，乳汁中抗體稀釋到1/10000檢測依然為陽性。

3 討論與結論

PED作為危害養豬業的三大傳染病（ASF、PRRS、PED）之一，其防控仍然是讓人頭疼的大問題。目前行業內相對普遍的認知是：疫苗免疫效果不理想（仍然發病嚴重）；緊急時采用返飼方法快速處理，并處死1～2周內的新生仔豬斷尾求生，從而可以快速控制疫情。

筆者認為，不管在目前非洲豬瘟及其他疫病病原復雜的情況下，返飼用的材料比較難獲得，且風險增加，還是母豬在反復返飼后生產性能降低，每頭母豬產健仔數降低1～2頭/胎（數據從臨床了解獲得），說明反復返飼母豬的方式是不可取的。至于疫苗免疫效果不理想，主要還是疫苗的質量需要進一步提升。

通過工藝改進后，止瀉威的效力有效提升，在實驗研究階段證明，無論從二次免疫后2周血清中和抗體、初乳中SIgA抗體及初乳中和抗體三項指標評價，還是從哺乳5～7天初生仔豬的攻毒保護（仔豬腹瀉率、存活率及存活弱仔率）評價，豬病毒性腹瀉滅活疫苗免疫效力顯著優于競品疫苗，初生哺乳仔豬能獲得更優于競品疫苗的被動保護[4]。

本研究從臨床試驗驗證了改進后止瀉威的免疫效力大幅度提升。從臨床腹瀉數據分析，各免疫單元的產房仔豬的腹瀉率顯著降低，基本無腹瀉發生；而對照競品疫苗免疫的單元，產房仔豬仍然不同程度發生腹瀉，窩腹瀉率分別為24.1%、31.5%、58.2%，表明在發病豬場，止瀉威免疫后能快速穩定豬流行性腹瀉疫情，顯著降低死亡率。

從抗體檢測結果分析，免疫止瀉威疫苗后，母豬產生了高水平的IgG抗體與IgA抗體，離散度小，血清稀釋500倍及初乳稀釋10 000倍后，IgA抗體仍然為陽性，達到了相當高的水平，能有效保護仔豬不被PEDV感染。

總之，改進后的止瀉威應用于臨床能誘導高水平抗體，且在發病豬場應用時，能快速穩定豬流行性腹瀉疫情。

參考文獻：

[1] XIAOFENG R， PENGCHONG L. Development of reverse transcription loop-mediated isothermal amplification for rapid detection of porcine epidemic diarrhea virus[J].Virus Genes，2011， 42（2）：229-235.

[2] WANG D， FANG L， XIAO S. Porcine epidemic diarrhea in China[J].Virus Research， 2016：7-13.DOI：10.1016/j.virusres.2016.05.026.

[3] QIANG L， HUAIYU W. Porcine enteric coronaviruses： an updated overview of the pathogenesis， prevalence， and diagnosis.[J].Veterinary research communications，2021，45（2-3）：1-12.

[4] 何玲，孫華，鐘采靈，等.豬病毒性腹瀉滅活疫苗對仔豬保護力研究[J].中國動物保健，2023，25（12）：108-109.