一起“北牛黔調(diào)”引起的肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征的診治

摘要：近年來(lái)，貴州大力發(fā)展肉牛產(chǎn)業(yè)，“北牛黔調(diào)”“黔牛外調(diào)”情況普遍，2023年貴州省調(diào)進(jìn)肉牛16.37萬(wàn)頭，調(diào)出肉牛14.23萬(wàn)頭。肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征的發(fā)生嚴(yán)重影響動(dòng)物的健康和造成養(yǎng)牛戶(hù)的經(jīng)濟(jì)損失，一直是困擾貴州省肉牛發(fā)展的難題。2023年貴州省印江土家族苗族自治縣發(fā)生一起典型的肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征事件，因及時(shí)采取有效的綜合防治措施，降低了養(yǎng)殖戶(hù)的經(jīng)濟(jì)損失，供同行參考。

關(guān)鍵詞：肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征；診治

“肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征”指活牛因長(zhǎng)途調(diào)運(yùn)所致的多種應(yīng)激原導(dǎo)致機(jī)體抵抗力下降，引起呼吸道、消化道乃至全身病理性反應(yīng)的綜合征候群[1]。當(dāng)肉牛機(jī)體抵抗力下降時(shí)，病原會(huì)趁機(jī)侵入而發(fā)生感染。牛支原體感染就常常發(fā)生在肉牛運(yùn)輸、飼養(yǎng)管理、環(huán)境改變等應(yīng)激因素影響下，對(duì)動(dòng)物機(jī)體的免疫系統(tǒng)造成極大的破壞，引起其他病原的繼發(fā)感染加重病情[2]，處置不當(dāng)會(huì)致肉牛死亡，嚴(yán)重影響肉牛長(zhǎng)途調(diào)運(yùn)。

1 背景信息

1.1 調(diào)運(yùn)情況

2023年3月1日印江土家族苗族自治縣中興街道A牛場(chǎng)和沙子坡鎮(zhèn)B牛場(chǎng)同時(shí)從吉林省東豐縣那丹伯鎮(zhèn)購(gòu)進(jìn)肉牛各50頭（每頭約250 kg，8月齡左右），到場(chǎng)后，由售后技術(shù)人員開(kāi)展應(yīng)急處置，分別于到場(chǎng)的第7天、第15天、第20天全牛群按說(shuō)明書(shū)的2倍量肌注一次酒石酸泰樂(lè)菌素。從第20天起2個(gè)場(chǎng)的牛群先后出現(xiàn)發(fā)病死亡現(xiàn)象，調(diào)進(jìn)50 d內(nèi)，肉牛共發(fā)病85頭，治愈72頭，死亡13頭，直接經(jīng)濟(jì)損失22萬(wàn)余元。

1.2 臨床與解剖癥狀

第一，臨床癥狀。主要表現(xiàn)有三類(lèi)：一是重癥病牛，主要表現(xiàn)反復(fù)高燒，劇烈咳嗽，呼吸困難，不能站立，鼻盤(pán)干燥甚至有裂痕，流黃色膿性鼻涕，食欲廢絕，無(wú)反芻，肛溫40～43 ℃；二是較重病牛，主要表現(xiàn)反復(fù)發(fā)燒，鼻盤(pán)干燥，頻繁咳嗽，精神委頓，食欲下降，不吃或吃得很少，肚子脹氣，排深色球狀糞便，肛溫40～42 ℃；三是腹瀉牛，主要表現(xiàn)體溫正常，精神委頓，食欲下降，不吃或吃得很少，腸鳴音亢進(jìn)，排黃色稀便甚至是水樣泡狀稀便，尾部很臟，稀便黏附在尾根周?chē)拿希挥械谋憩F(xiàn)瘤胃脹氣，有的肚子干扁。

第二，解剖病變。解剖病死牛3頭，發(fā)現(xiàn)臨床表現(xiàn)心包積液，有大量淡黃色液體；心耳有點(diǎn)狀、斑塊狀出血；肺與胸膜有粘連，肺臟大面積出血瘀血，肺泡內(nèi)有大量灰白色彌漫性壞死結(jié)節(jié)干酪樣壞死；胸腔積膠凍樣黃色的滲出物或血色膿液，惡臭。有1頭牛的肺臟嚴(yán)重萎縮肉變、放入水里會(huì)下沉（圖1）。

2 材料與方法

2.1 樣品采集

牛血清87份，含肝素抗凝劑的牛全血87份，無(wú)菌采集病死牛心臟、肝臟、脾臟、肺臟、淋巴結(jié)各一份，組織樣品盡量取有明顯病變的部分。

2.2 主要試劑及儀器

布病虎紅平板凝集抗原（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所，生產(chǎn)批號(hào)2022006），牛分枝桿菌抗體ELISA試劑盒（國(guó)生生物，生產(chǎn)批號(hào)20230203），牛支原體抗體ELISA試劑盒試（國(guó)生生物，生產(chǎn)批號(hào)20230805），口蹄疫3ABC抗體ELISA試劑盒（武漢科前，生產(chǎn)批號(hào)20220502），口蹄疫O型抗體ELISA試劑盒（萊普生信息科技有限公司，生產(chǎn)批號(hào)TE220902-1），口蹄疫A型抗體ELISA試劑盒（萊普生信息科技有限公司，生產(chǎn)批E220602-1），DNA/RNA提取試劑盒購(gòu)自?xún)?yōu)聯(lián)生物有限公司，口蹄疫病毒熒光定量RT-PCR檢測(cè)試劑盒（蘭州獸研生物科技有限公司，生產(chǎn)批號(hào)20221007431），美國(guó)BioTek-酶標(biāo)儀Elx808，離心機(jī)（湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開(kāi)發(fā)有限公司TDZ5-WS），2級(jí)生物安全柜（上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠(chǎng)BSC-1300ⅡB2）。

2.3 細(xì)菌的分離培養(yǎng)

將樣本在超凈工作臺(tái)中處理，進(jìn)行觸片染色，細(xì)菌劃線(xiàn)接種于血平板培養(yǎng)基上，置37℃恒溫箱中24～48 h 后，觀(guān)察菌落生長(zhǎng)特性并在顯微鏡下觀(guān)察。

2.4 藥敏試驗(yàn)

采用藥敏紙片擴(kuò)散法，選取29種臨床常用藥進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。挑取肺臟組織分離純化后單菌落于37 ℃搖菌12～16 ｈ，取100 μＬ菌液用無(wú)菌涂布棒均勻涂抹于LB固體培養(yǎng)基中，用紙片法將藥敏紙片緊貼于平板上，37 ℃培養(yǎng)24 ｈ，記錄藥敏紙片的抑菌圈直徑，參照美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI2016）抗微生物藥物敏感試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分離菌藥物敏感性判斷。

2.5 血清學(xué)檢測(cè)

布病虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBT）、牛結(jié)核病體外檢測(cè)Y干擾素法、牛支原體抗體ELISA、非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC抗體間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（3ABC-I-ELISA）、口蹄疫O型抗體ELISA、口蹄疫A型抗體ELISA。

2.6 病原學(xué)檢測(cè)

熒光定量RT-PCR檢測(cè)牛口蹄疫病毒、牛支原體。

3 檢測(cè)結(jié)果

3.1 細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果

結(jié)果如圖2～圖5，顯示樣本中僅出現(xiàn)組織細(xì)胞形態(tài)未見(jiàn)菌體形態(tài)。培養(yǎng)24～48 h的血瓊脂培養(yǎng)基上未見(jiàn)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明本次送檢的樣本中不存在能在血平板中生長(zhǎng)的細(xì)菌。

3.2 藥敏試驗(yàn)

選取29種藥敏紙片進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，肺組織繼發(fā)感染細(xì)菌對(duì)頭孢哌酮、頭孢曲松、頭孢呋辛等16種抗菌藥敏感，對(duì)紅霉素和慶大霉素中度敏感，對(duì)氨芐西林、卡那霉素、苯唑西林等10種抗菌藥耐藥（見(jiàn)表1）。

3.3 血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果

對(duì)87份牛血清進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)，結(jié)果為布病抗體、牛分枝桿菌抗體和牛口蹄疫3ABC抗體均為陰性；牛支原體抗體、O型FMD抗體、A型FMD抗體檢出陽(yáng)性，見(jiàn)表2。

3.4 病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果

口蹄疫病毒核酸檢測(cè)結(jié)果為陰性。以支原體特異性引物進(jìn)行樣本PCR擴(kuò)增，目的片段大小約184 bp。結(jié)果肝臟、肺臟、心臟樣本的PCR產(chǎn)物條帶與預(yù)期一致，說(shuō)明本次送檢的樣本存在支原體的感染。

4 中西醫(yī)結(jié)合治療

按照臨床癥狀將病牛分為肺炎型和腹瀉型，采取不同治療方案進(jìn)行對(duì)癥治療。

第一，肺炎型。采取清熱解毒、抗菌消炎、止咳化痰、調(diào)理脾胃等對(duì)癥治療。對(duì)重癥牛和病情輕微牛實(shí)行不同治療方案。

重癥牛治療方案：一是0.9 %氯化鈉注射液500 mL+頭孢噻呋鈉3 g輸液，1次/d，連用5～7 d；二是10 %葡萄糖注射液300 mL+雙黃連40 mL輸液，1次/d，連用5～7 d；三是葦莖120 g，薏苡仁、冬瓜仁、山楂各60 g，桃仁40 g，神曲、麥芽各90 g，1頭牛的用量，1 劑/d，連用5～7 d。

病情輕微牛治療方案：一是頭孢噻呋鈉3 g+雙黃連40 mL，肌內(nèi)注射。1次/d，連用5～7 d；二是白藁60 g，魚(yú)腥草、車(chē)前草、枇杷葉（去毛）、葛根各45 g，金銀花、生姜、黃連各30 g，水煎服，連用5～7 d。

第二，腹瀉型。采取散寒除濕、和中止瀉、補(bǔ)液、健胃消食、預(yù)防酸中毒。

水樣腹瀉型：獸用蒙脫石散500 g，2次/d，連用3 d。

脹氣型：藿香正氣水，100 mL/次，2次/d，連用3 d。

對(duì)所有腹瀉牛喂自制生理補(bǔ)液鹽，配方是食鹽1 kg +紅糖2 kg+開(kāi)水100 L，溫?zé)釥顟B(tài)每頭牛每次喂5 L/次，3次/d，喂至不腹瀉為止。

5 討論

第一，肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征發(fā)病率高、危害大，處置不當(dāng)肉牛病死率高。本次疫情發(fā)病率85 %，病死率15.3 %，直接經(jīng)濟(jì)損失22萬(wàn)余元，給養(yǎng)殖戶(hù)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。近年來(lái)貴州“北牛黔調(diào)”比較普遍，2022年，貴州從外省調(diào)進(jìn)調(diào)出牛只28.3萬(wàn)頭，運(yùn)輸應(yīng)激綜合征導(dǎo)致數(shù)百萬(wàn)的經(jīng)濟(jì)損失。因此，政府部門(mén)要加強(qiáng)宣傳培訓(xùn)，提高養(yǎng)殖戶(hù)專(zhuān)業(yè)技術(shù)，掌握肉牛販運(yùn)前、中、后的一些抗應(yīng)激處理方法，比如起運(yùn)前保健、疫苗注射、鎮(zhèn)靜劑應(yīng)用、運(yùn)輸車(chē)速平緩和到場(chǎng)后處理等綜合防控措施，降低應(yīng)激反應(yīng)，減少病死牛的損失。

第二，調(diào)運(yùn)牛只來(lái)源復(fù)雜，有些牛只可能存在疾病隱性感染風(fēng)險(xiǎn)，又因吉林省與貴州省氣候差異大，北方干燥、南方潮濕。牛剛到場(chǎng)的時(shí)候恰逢倒春寒，氣候濕冷，牛出現(xiàn)水土不服，氣候不適現(xiàn)象。沙子坡鎮(zhèn)韓家村綜合開(kāi)發(fā)專(zhuān)業(yè)合作社牛舍呈完全開(kāi)放式，風(fēng)大，加重肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征癥狀，導(dǎo)致牛只免疫力下降，多種因素疊加致牛繼發(fā)感染其他疫病，出現(xiàn)發(fā)病死亡。及時(shí)給開(kāi)放牛舍增加擋風(fēng)布，增加干草墊，給病牛保暖保溫。應(yīng)激后的牛群需要飼喂良好的飼草飼料，A養(yǎng)殖場(chǎng)因飼喂霉變玉米秸稈，加重肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征病情。因此，長(zhǎng)途販運(yùn)的肉牛到場(chǎng)后一定要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，嚴(yán)禁飼喂霉變飼料、污水。飼喂優(yōu)質(zhì)牧草。飼料中添加黃芪多糖粉及電解多維提高牛只免疫力，避免冷風(fēng)吹，保持圈舍干凈衛(wèi)生。

第三，通過(guò)臨床癥狀初步判斷可疑病種，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)確診。病牛出現(xiàn)反復(fù)發(fā)燒，咳嗽，流膿性鼻涕，故檢測(cè)牛結(jié)核病、支原體感染；有的病牛出現(xiàn)發(fā)燒且口腔黏膜、舌面出現(xiàn)潰瘍，故檢測(cè)口蹄疫；病牛出現(xiàn)反復(fù)發(fā)燒，故檢測(cè)牛布病。通過(guò)臨床診斷和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)相結(jié)合，快速診斷疫病，選擇高敏藥物，快速地遏制疫病惡化，較短時(shí)間控制疫病，降低病死率。

第四，通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，本次疫病診斷為肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征，牛支原體核酸陽(yáng)性，牛支原體抗體陽(yáng)性率67.8 %（59/87），主要病因是牛支原體感染。本次送檢的牛組織樣本中檢測(cè)到支原體，沒(méi)有檢測(cè)到細(xì)菌，也有可能是因?yàn)槭褂么罅靠股睾笠种屏思?xì)菌的生長(zhǎng)。

第五，提高綜合防控措施。肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征的臨床常見(jiàn)有發(fā)熱、不吃、咳嗽、拉稀等多種癥狀，影響因素多，牛個(gè)體臨床表現(xiàn)程度也不同，有的嚴(yán)重發(fā)生死亡，有的表現(xiàn)輕微不使用任何藥物也會(huì)自愈。對(duì)發(fā)生肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征的養(yǎng)殖場(chǎng)，要做好病牛隔離、圈舍消毒、避免冷風(fēng)、飼喂優(yōu)質(zhì)草料和干凈水源，適量添加黃芪多糖粉、電解多維等，提高牛群機(jī)體抵抗力，這樣會(huì)大大降低因肉牛運(yùn)輸應(yīng)激綜合征帶來(lái)的損失。特別是癥狀明顯的牛，要及時(shí)進(jìn)行對(duì)癥藥物治療，采用中西醫(yī)結(jié)合治療效果會(huì)更好，并且不同癥狀要使用不同的治療方案，這樣治療效果會(huì)更快更好。

第六，口蹄疫是家畜重點(diǎn)防控的重大動(dòng)物疫病，牛群70 %免疫抗體合格率可有效預(yù)防口蹄疫的流行。本次調(diào)運(yùn)的牛只在起運(yùn)地吉林省已經(jīng)免疫過(guò)牛口蹄疫 O型、A型、亞洲 I 型三價(jià)滅活疫苗。本次共檢測(cè)87頭，O型FMD抗體陽(yáng)性率55 %（48/87）；A型FMD抗體陽(yáng)性率30 %（26/87），免疫抗體合格率遠(yuǎn)低于國(guó)家要求，存在很大的感染風(fēng)險(xiǎn)。建議肉牛調(diào)運(yùn)穩(wěn)定后，對(duì)所有牛只開(kāi)展口蹄疫免疫抗體檢測(cè)，對(duì)抗體不合格的牛只實(shí)施口蹄疫實(shí)施補(bǔ)免或加強(qiáng)免疫。

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