菌酶復合對葡萄枝葉青貯品質和瘤胃體外產氣特性的影響

收稿日期：2024-05-17；修回日期：2024-07-24

基金項目：吐魯番市重點研發專項“吐魯番市特色林果副產物飼料化微貯技術研究”；農業農村部國家現代農業產業技術體系項目（CARS-34）資助

作者簡介：霍志偉（2000-），男，漢族，新疆沙灣人，碩士研究生，主要從事牧草生產與加工研究，E-mail：826047623@qq.com；*通信作者Author for correspondence，E-mail：zhangfanfan@shzu.edu.cn；lghdjs@163.com

摘要：本研究旨在探究聯合添加植物乳桿菌（Lactiplantibacillus plantarum）與纖維素酶（cellulase）對葡萄（Vitis L.）枝葉青貯發酵品質的改善效果，為葡萄枝葉資源飼料化利用提供依據。試驗設置3個處理，CK處理（不添加任何菌劑）、PL處理（添加植物乳桿菌5×10⁵ cfu·g^-1 FM）、PLC處理（添加植物乳桿菌5×10⁵ cfu·g^-1 FM和纖維素酶0.3%FM）。發酵60 d后開袋檢測營養、發酵品質和主要微生物數量，進行體外發酵試驗評定其產氣特性。結果表明：（1）相比于CK處理，PLC處理中乳酸（Lactic acid，LA）、乙酸（Acetic acid，AA）含量和乳酸菌（Lactic acid bacteria，LAB）數量顯著增加（P<0.05），酸性洗滌纖維（Acid detergent fiber，ADF）含量和pH值、酵母菌（Yeast）和好氧細菌（Aerobic bacteria，AB）數量顯著降低（P<0.05）。（2）在青貯第60 d時PLC處理的有機物降解率、產氣量和產氣速率最高。由此可見，聯合添加植物乳桿菌與纖維素酶能夠顯著改善葡萄枝葉青貯發酵品質，減少營養物質損耗，提高飼喂價值。

關鍵詞：葡萄枝葉；植物乳桿菌；纖維素酶；發酵品質；產氣特性

中圖分類號：S816.53 文獻標識碼：A 文章編號：1007-0435（2024）10-3220-06

Effects of Fungal-enzyme Compound on the Quality of Vine Leaf Silage and the In vitro gas Production Characteristics of Rumen

HUO Zhi-wei¹， LI Hai-feng²， YAN Yun-feng^1，3， ZHENG Xiao-kai¹， LI Shuang-ming¹，

LIU Guo-hong^2*， ZHANG Fan-fan^1*

（1. School of Animal Science and Technology， Shihezi University， Shihezi， Xinjiang 832000， China; 2. Turpan Institute of Agricultural Science， Xinjiang Academy of Agricultural Sciences， Turpan，Xinjiang 838000， China;3. Jinzhou Vocational and Technical Education Center， Jinzhou， Hebei Province 052260， China）

Abstract：The purpose of this study was to investigate the effects of combined addition of Lactiplantibacillus plantarum and cellulase on the fermentation quality of Vitis L. branch and leaf silage，to provide a basis for the feed utilization of grape branch and leaf resources. Three treatments were set up，CK treatment （without adding any fungicide），PL treatment （adding Lactobacillus plantarum 5×10⁵ cfu·g^-1 FM），and PLC treatment （adding Lactobacillus plantarum 5×10⁵ cfu·g^-1 FM and cellulase 0.3%FM）. After 60 days of fermentation，the nutrients，fermentation quality and the number of main microorganisms were detected by opening the bag，and the gas production characteristics were evaluated by an In vitro fermentation test. The results showed that：1） Compared to the CK treatment，the contents of lactic acid，acetic acid and the number of lactic acid bacteria in PLC treatment were significantly increased （P<0.05），and the content and pH value of acid detergent fiber，yeast and aerobic bacteria were significantly decreased （P<0.05）. 2） At the 60th day of silage，the degradation rate of organic matter，gas production and gas production rate of PLC treatment were the highest. It can be seen that the combined addition of Lactobacillus plantarum and cellulase can significantly improve the fermentation quality of grape branch and leaf silage，reduce nutrient loss，and improve feeding value.

Key words：Grape branches and leaves；Lactiplantibacillus plantarum；Cellulase；Fermentation quality；In vitro gas production characteristics

新疆地區由于水資源短缺，農業生產模式偏向于經濟類作物等現狀，導致飼草資源遠不能滿足養殖需要^［1］。因此從現有農果產業中獲取飼草資源，可以作為新疆非常規飼草產業發展的新方向。目前，新疆葡萄栽培面積15萬hm²，產量350萬噸，產量和面積均居全國首位，葡萄產業具有明顯的資源和產業發展優勢^［2］。葡萄修剪主要分為入冬前和夏季修剪兩個階段，每年修剪的鮮枝條重量約200萬噸，這些枝葉往往被焚燒或粉碎還田，不僅造成資源嚴重浪費，且對農田生態環境造成諸多潛在危害。因此，將葡萄枝葉進行飼料化利用，不僅能提高廢棄資源利用效率，且有利于環境保護和養殖業發展^［3-4］，具有較大的應用價值。

葡萄枝葉中富含蛋白質、多糖、維生素等多種營養物質；但由于纖維含量高，且修剪后存放過程中易發霉變質，從而嚴重破壞飼料品質，致使反芻家畜利用效率大大降低，在生產中不適宜直接利用^［5］。青貯是由微生物驅動的發酵過程，其中乳酸菌起到了至關重要的作用^［6］。前人諸多研究表明，植物乳桿菌（Lactiplantibacillus plantarum）和纖維素酶（cellulase）聯合添加可以顯著改善飼料營養價值和飼用價值^［7］。其中，在青貯玉米、苜蓿等飼草中接種植物乳桿菌，可顯著降低pH值，提高乳酸含量，進而抑制霉菌等有害微生物活動，減少青貯原料營養成分的消耗，從而提高發酵品質^［8-10］。此外，接種不同發酵類型乳酸菌對青貯適口性和有氧穩定性等也有增益效果^［10］。在玉米秸稈青貯飼料中添加纖維素酶，可較大程度保留玉米秸稈的粗蛋白等營養物質，提高玉米秸稈青貯飼料的營養價值^［11］；復合纖維素酶還可以通過分解纖維素、半纖維素等物質來增加可溶性碳水化合物的含量，從而提高底物營養物質含量，促進乳酸菌對發酵底物營養物質的利用和轉化^［12］。因此，乳酸菌和纖維素酶復合添加的復合效應得到了大多數專家學者的共識^［13］。

目前，國內對葡萄產業廢棄物的利用研究大多集中在葡萄籽、葡萄皮渣方面，葡萄枝葉發酵方面的研究較少^［14］。因此，本研究通過添加植物乳桿菌和纖維素酶進行葡萄枝葉青貯，研究其對葡萄枝葉青貯品質的影響，為葡萄枝葉資源化利用及葡萄枝葉青貯的開發提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

選擇種植于新疆吐魯番市農業科學研究所試驗地（89°20′46″N，42°94′79″E）所種植鮮食葡萄‘無核白’的枝葉（2022年8月采集）作為青貯原料。試驗中采用的植物乳桿菌（Lactiplantibacillus plantarum，ACCC 11016）購買自中國農業微生物菌種保藏管理中心（ACCC）。纖維素酶Ⅱ（酶活≥5000 U·g^-1），粉末狀，購自滄州夏盛酶生物技術有限公司^［15］。

1.2 試驗設計

青貯前按鮮重的1%在原料表面噴灑尿素（含氮量46%）。青貯試驗共分三個處理，分別為CK處理（葡萄枝葉原料，空白處理），PL處理（添加5×10⁵ cfu·g^-1 FM植物乳桿菌），PLC處理（添加5×10⁵ cfu·g^-1 FM植物乳桿菌和0.3%FM纖維素酶），每個處理5個重復，采用單向排氣閥厭氧袋進行青貯，共計調制15袋。接種步驟：將各菌種分別在MRS、M17液體培養基中培養，平板計數后確定其數量，按比例配置菌液，以鮮重為基礎進行添加，CK處理噴灑等量的無菌水。發酵至第60 d取樣，測定樣品營養品質、發酵指標、微生物數量及瘤胃體外產氣情況。

1.3 測定指標及方法

1.3.1 營養品質與發酵品質測定 營養品質：將取出的樣品放置在105℃ 2 h，再轉入65℃下至恒重，計算干物質（Dry matter，DM）含量。隨后粉碎，過0.42 mm篩，用于測定營養成分。營養成分主要測定粗蛋白（Crude protein，CP）、可溶性碳水化合物（Water soluble carbohydrates，WSC）、中性洗滌纖維（Neutral detergent fiber，NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）、粗脂肪（Ether extract，EE）。其中CP使用自動凱氏定氮儀測定^［16］；WSC采用蒽酮-比色法測定；NDF和ADF使用全自動纖維分析儀測定；EE采用全自動脂肪分析儀測定^［17］。

發酵品質測定方法：取10 g鮮樣置于錐形瓶中，加入90 mL蒸餾水，搖勻后用保鮮膜封口，放置在4℃冰箱24 h后取出，立即使用pH計測定pH值^［3］。將浸提液經紗布過濾后，在12 000 r·min^-1離心10 min，用于檢測氨態氮（NH-N）、乳酸（LA）、乙酸（AA）、丙酸（Propionic acid，PA）、丁酸（Butyric acid，BA），NH-N采用苯酚-次氯酸比色法測定，有機酸采用高效液相色譜儀檢測。

1.3.2 微生物數量測定 微生物主要測定好氧細菌（AB）、乳酸菌（LAB）、酵母菌（Yeast）、霉菌（Mold），其中，乳酸菌和酵母菌分別采用MRS培養基和MEA（Malt extract agar）培養基，37℃厭氧培養48 h，好氧細菌和霉菌采用PCA（Plate count agar）培養基和SCDA（Salt czapek dox agar）培養基，28℃好氧培養48 h。培養結束后進行平板計數，計算各類微生物數量^［16］。

1.3.3 瘤胃體外產氣測定 在石河子大學動物科技學院獸醫院進行，瘤胃液來自3頭體重相近、身體健康，裝有永久瘤胃瘺管的哈薩克羊，于飼喂前1 h抽取瘤胃液。瘤胃液經過濾后，裝入已預熱且充有二氧化碳的保溫瓶內帶回試驗室，用于配置后續的混合液。人工瘤胃液按照Menke法配置^［18］，人工瘤胃液與瘤胃液按照2∶1的比例混合，配成混合人工瘤胃液（保持二氧化碳通入）。空白管僅加入人工瘤胃混合液，精準稱取各處理樣品0.2 g，緩慢放入玻璃注射器底部，加入混合人工瘤胃液30 mL（保持二氧化碳通入），將注射器內壁涂抹凡士林防止漏氣，將玻璃注射器放入39℃的恒溫振蕩培養箱，立刻開始計時。每個處理組設3個重復，同時設置3個空白組以校正發酵產氣量，在發酵的0（初始發酵時間），2，4，6，8，10，12，18，24，36，42，48 h，記錄各時間段產氣量，計算有機物消化率（OMD）、代謝能（ME）和產氣參數模型。

1.4 數據統計與分析

試驗數據采用Microsoft Office Excel 2021整理試驗數據，采用IBM SPSS Statistics 20軟件進行單因素方差分析（One-Way ANOVA），多重比較采用Duncan法，利用Origin 2017軟件進行繪圖^［3］。產氣參數模型采用DPSV 7.05軟件中一元非線性回歸模型（Gompertz模型）計算。計算公式^［19-20］：

OMD=0.986×GP+0.0606×CP+11.03；

ME＝0.1639×GP+0.0079×CP+0.0239×EE+0.04；

X=C×exp［-C×exp（-C×X）］。

式中：GP為24 h的產氣量（mL）；CP為粗蛋白質含量（%）；EE為粗脂肪含量（%）。X為產氣量（mL）；C為理論最大產氣量（mL）；C為產氣速率（mL·h^-1）；C為產氣延滯時間（h）；X為體外培養時間（h）^［16］。

2 結果與分析

2.1 添加植物乳桿菌和纖維素酶對葡萄枝葉青貯飼料營養品質、發酵品質和微生物數量的影響

由表1可知，各處理的NH-N/TN和LAB數量均顯著高于葡萄枝葉原料（P＜0.05）。CK和PL處理CP含量顯著低于PLC處理（P＜0.05）。PLC處理的NDF含量顯著低于CK處理和葡萄枝葉原料（P＜0.05）。PL和PLC處理的ADF含量顯著低于CK處理和葡萄枝葉原料（P<0.05）。在葡萄枝葉整個青貯過程中未檢測到BA。PLC處理的LA含量顯著高于CK和PL處理（P＜0.05）。CK和PL處理的AA含量顯著低于PLC處理（P＜0.05）。CK處理的PA含量顯著高于PL和PLC處理（P＜0.05）。PL和PLC處理的NH-N/TN顯著高于葡萄枝葉原料（P＜0.05）。PLC處理的乳酸菌數量顯著高于CK處理和PL處理（P＜0.05）。

2.2 不同處理對葡萄枝葉青貯飼料體外消化率的影響

體外產氣過程中，各處理產氣量均呈現上升態勢，在接近48 h均已達到最大產氣量。根據產氣規律分析，葡萄枝葉青貯在發酵過程中的產氣量均呈現出先上升后穩定的趨勢。

發酵60 d葡萄枝葉青貯體外產氣規律如圖1所示，發酵第2，4，6，8，10，12，18 h，各處理產氣量均極顯著高于CK處理（P＜0.01），PLC處理的產氣量均極顯著高于PL處理（P＜0.01）；發酵第24 h，PLC處理的產氣量極顯著高于CK處理和PL處理（P＜0.01）；發酵第30、36、42、48 h，各處理產氣量均極顯著高于CK處理（P＜0.01），PLC處理均極顯著高于PL處理的產氣量（P＜0.01）。

60 d葡萄枝葉青貯OMD和ME、產氣模型參數如表2所示，PLC處理的OMD、ME和產氣延滯時間均極顯著高于CK處理和PL處理（P＜0.01），PL處理和CK處理的OMD、ME和產氣延滯時間均無顯著差異；各處理的理論最大產氣量均極顯著高于CK處理（P＜0.01），PLC處理的理論最大產氣量極顯著高于PL處理（P＜0.01）；各處理產氣速度均極顯著低于CK處理（P＜0.01），PLC處理和PL處理的產氣速度差異不顯著。

3 討論

3.1 不同處理對葡萄枝葉青貯飼料營養品質、發酵品質和微生物數量的影響

有研究表明，隨著發酵時間的延長，各組葡萄枝葉的DM含量逐漸降低，這與發酵過程中LAB分解CP、WSC等發酵底物有關^［21］，LA大量產出pH值隨之降低，抑制有害菌的生長^［22］。Bao等^［23］發現，CK中DM含量較低，主要是因為多種微生物對有機物質的消耗。由于菌酶對各處理WSC含量下降，乳酸菌通過發酵作用分解青貯原料中的糖分，糖分逐漸減少，導致WSC含量下降。研究證明，植物乳桿菌可以降低青貯飼料的pH值^［24］，而青貯飼料的CP含量與pH值變化緊密關聯，隨著青貯進行pH值逐漸下降，PL和PLC處理在各個時間點的pH值均低于CK處理，說明添加植物乳桿菌和纖維素酶后，通過抑制雜菌和分解纖維類物質，使得pH值降低，隨著pH值降低抑制了蛋白酶活性，一定程度降低了CP損耗^［25］。

前人研究表明，在青貯中添加菌劑后，可顯著降低pH值，抑制有害雜菌繁殖促進發酵^［7］；添加酶制劑可以促進纖維素分解，降低NDF和ADF在青貯飼料中的含量^［26］，并將多糖分解為單糖，從而給微生物生長提供能源物質。本試驗中PLC處理的NDF和ADF最低，說明添加植物乳桿菌和纖維素酶后，促進了纖維素和半纖維素的降解，使得NDF含量降低，纖維素酶對木質纖維結構的破壞使得ADF含量相對較低，部分NDF會被轉化成有機酸，如LA和AA，從而進一步降低NDF含量，說明植物乳桿菌和纖維素酶聯合添加也起到相同的效果^［27］。LA含量越高，一定程度可表明青貯飼料發酵品質好^［28］。本試驗中各處理LA、AA含量和乳酸菌數量均高于CK處理，酵母菌、好氧細菌、霉菌數量和PA含量均低于CK處理，這可能是由于植物乳桿菌和纖維素酶發揮作用，大量產生乳酸，提供營養物質促進乳酸菌生長，且pH值降低抑制酵母菌、好氧細菌和有害微生物（霉菌）繁殖，從而改善青貯發酵品質^［29］。

3.2 不同處理對葡萄枝葉青貯飼料體外消化率的影響

降解率能夠反映青貯飼料在反芻動物瘤胃中降解的難易程度^［30］，有機物降解率的增加表明微生物活性更高，從而使得青貯發酵效果更佳^［31］。本試驗中，添加植物乳桿菌和纖維素酶處理的有機物降解率均顯著高于CK處理。這可能是因為植物乳桿菌的添加有助于優化青貯過程中的微生物環境，促進有益菌群的生長，而纖維素酶則直接作用于纖維素分子，將其分解為更易于動物吸收的小分子物質^［32］，從而提高了有機物的降解率。在葡萄枝葉青貯中，PLC處理的有機物降解率最高，達到46.03%。其次，在代謝能方面，添加植物乳桿菌和纖維素酶的處理也均顯著高于CK處理。這可能是因為植物乳桿菌促進了飼料中有益菌群的繁殖，改善了發酵環境，而纖維素酶則通過分解纖維素等難消化物質，增加了飼料中可利用的能量來源，從而提高動物對其的消化吸收能力^［33-34］。在葡萄枝葉青貯中，PLC處理的代謝能最高，達到5.92 MJ·kg^-1。最后，在產氣模型參數方面，添加植物乳桿菌和纖維素酶的處理均顯著高于CK處理。這可能是因為植物乳桿菌通過發酵作用產生LA等有益物質，調節飼料pH值，為纖維素酶的活性創造有利條件^［35］；纖維素酶則直接作用于纖維素等有機物，將其分解為更易于被微生物利用的小分子物質。這些分解產物不僅提高了飼料的營養價值，還為微生物的發酵作用提供了更多底物，從而加快了產氣速度^［36］。因此，添加植物乳桿菌和纖維素酶可顯著提高青貯飼料的有機物降解率和代謝能。

4 結論

聯合添加植物乳桿菌（5×10⁵ cfu·g^-1 FM）和纖維素酶（50 U·mg^-1）能夠通過提高乳酸和乙酸含量以最大化減少粗蛋白損失，同時有效降低酸性洗滌纖維含量以綜合改善葡萄枝葉青貯發酵品質。此外，有助于提高哈薩克羊對葡萄枝葉青貯中有機物的降解率和代謝能。

參考文獻

［1］江惠，王明利，勵汀郁，等. 新疆草原畜牧業轉型升級：發展現狀、現實困境與實現路徑［J］. 華中農業大學學報，2023，42（5）：42-52

［2］楊澤毅，張玉琳，楊寒珺，等. 葡萄枝葉自然青貯中優選乳酸菌的分離與鑒定［J］. 草地學報，2022，30（7）：1918-1924

［3］陳永成，楊澤毅，李肖，等. 海氏腸球菌與糖蜜聯合接種改善葡萄枝葉發酵品質及哈薩克羊養殖效果評價［J］. 動物營養學報，2023，35（3）：1771-1780

［4］廖堃宇，米日扎提·艾熱提，張俊瑜，等. 葡萄副產物在反芻動物生產中的應用進展［J］. 草食家畜，2024（2）：9-14

［5］楊澤毅. 乳酸菌調控葡萄枝葉青貯品質及其對育肥羊飼喂效果研究［D］.石河子：石河子大學，2022：343

［6］王偉，周天榮，肖燕子，等. 添加劑對天然牧草青貯品質的影響［J］. 中國草地學報，2023，45（6）：143-148

［7］王加黛，王利軍，王平，等. 植物乳桿菌與纖維素酶組合對玉米秸稈微貯品質的影響［J］. 飼料工業，2023，44（19）：90-94

［8］高燕春，袁凱，劉愛菊. 不同微生物發酵劑對青貯玉米營養成分、感官評定及發酵品質的影響［J］. 中國飼料，2024（2）：76-79

［9］GUO Y，HUANG R，NIU Y，et al. Chemical characteristics，antioxidant capacity，bacterial community，and metabolite composition of mulberry silage ensiling with lactic acid bacteria［J］. Frontiers in Microbiology，2024，15：1363256

［10］WU B，SUI H，QIN W，et al. Microbial community and fermentation quality of alfalfa silage stored in farm bunker silos in Inner Mongolia，China［J］. Fermentation，2023，9（5）：455

［11］段代祥，高春明，趙鳳娟，等. 不同處理方式對玉米秸稈青貯營養品質影響的研究進展［J］. 飼料研究，2023，46（23）：154-157

［12］王國郡，郭楠，祖曉偉，等. 菌酶復合青貯添加劑對紫花苜蓿青貯品質的影響［J］. 飼料研究，2024（8）：108-113

［13］席興軍，韓魯佳，原慎一郎，等. 添加乳酸菌和纖維素酶對玉米秸稈青貯飼料品質的影響［J］. 中國農業大學學報，2003（2）：21-24

［14］許遲，蔡坤. 葡萄籽渣對西門塔爾牛生長性能、抗氧化指標、抗炎能力及腸道微生物組成的影響［J］. 中國畜牧雜志，2023，59（12）：301-308

［15］張俊麗，高旭紅，梁小軍. 不同添加劑對干谷草秸稈發酵品質與營養價值的影響［J］. 飼料研究，2023，46（18）：108-113

［16］張玉琳，楊澤毅，李超程，等. 植物乳桿菌對全株雜交構樹青貯品質、有氧穩定性及瘤胃體外產氣特性的影響［J］. 動物營養學報，2021，33（11）：6320-6329

［17］盧哲丞，張春桃，成述儒，等. 體外產氣法評定不同蛋白飼料原料間的組合效應［J］. 中國飼料，2023（5）：30-35

［18］MENKE K，HRAAB LSALEWSKI A，et al. The es-timation of the digestility and metabolizable energycontent of ruminant feedingstuffs from the gas production when they are incubated with rumen liquor invitro［J］. The Journal of Agricultural Science，1979，93（1）：217-222

［19］MORAIS S，MIZRAHI I. The road not taken：The rumen microbiome，functional groups，and community states［J］. Trends in Microbiology，2019，27（6）：538-549

［20］SCHOFIELD P，PITT R E，PELL A N. Kinetics of fiber digestion from in vitro gas production［J］. Journal of animal science，1994，72（11）：2980-2991

［21］李楊，楊燕，王振南，等. 乳酸菌在畜禽營養與飼料中的應用［J］. 飼料工業，2024，45（5）：16-22

［22］劉婷，王騰飛，羅寬，等. 苜蓿青貯添加劑研究進展［J］. 飼料研究，2016（19）：12-14，22

［23］BAO X，FENG H，GUO G，et al. Effects of laccase and lactic acid bacteria on the fermentation quality，nutrient composition，enzymatic hydrolysis，and bacterial community of alfalfa silage［J］. Frontiers in Microbiology，2022，13：1035942-1035942

［24］張玉琳，楊寒珺，李超程，等. 不同乳酸菌處理對雜交構樹青貯營養品質、發酵特性和有氧穩定性的影響［J］. 動物營養學報，2023，35（4）：2702-2710

［25］羅攖寧，羅盈，包錦澤，等. 添加乳酸菌和香草醛對甜玉米籽實青貯飼料品質的影響［J］. 飼料工業，2020，41（19）：50-53

［26］劉逸超，賈玉山，降曉偉，等. 纖維素酶和糖蜜對天然牧草青貯品質和微生物組成的影響［J］. 中國草地學報，2022，44（12）：64-72

［27］HAOMING X，YANCHEN Z，ZHIYING W，et al. Effects of cellulase，lactiplantibacillus plantarum，and sucrose on fermentation parameters，chemical composition，and bacterial community of hybrid pennisetum silage［J］. Fermentation，2022，8（8）：356

［28］任海偉，黎金蓮，南亭植，等. 異常畢赤酵母和纖維素酶對甜高粱青貯質量及微生物多樣性的影響［J］. 動物營養學報，2023，35（6）：4011-4027

［29］易蘭蘭，朱俊紅，程文杰，等. 植物纖維的降解機制及菌酶協同發酵應用［J］. 動物營養學報，2024，36（3）：1361-1374

［30］PADSAKORN P，WARIN P，PASAKORN B，et al. Investigation of nutritional profile，protein solubility and in vitro digestibility of various algae species as an alternative protein source for poultry feed［J］.Algal Research，2023，72：103147

［31］CLARISSE U，VINCENT B，ANTHONY W，et al. Evaluation of chemical composition and;digestibility of stovers of different pearl millet varieties and their effect on the performance of sheep in the West African Sahel［J］.Acta Agriculturae Scandinavica，Section A-Animal Science，2021，70（2）：91-99

［32］KHOTA W，PHOLSEN S，HIGGS D，et al. Fermentation quality and in vitro methane production of sorghum silage prepared with cellulase and lactic acid bacteria［J］. Asian-Australasian Journal of Animal Sciences，2017，30（11）：1568

［33］鄭明揚，吳碩，郭香，等. 添加乳酸菌和纖維素酶對砂仁葉青貯品質的影響［J］. 草地學報，2021，29（5）：1113-1117

［34］李茂，字學娟，呂仁龍，等. 添加乳酸菌和纖維素酶對王草青貯品質和瘤胃降解率的影響［J］. 中國畜牧雜志，2020，56（7）：161-165

［35］張穎，郭祥月，李千禧，等. 菌酶協同發酵棉籽粕及其體外模擬消化研究［J］. 中國畜牧雜志，2024，60（5）：239-246

［36］METZLER-ZEBELI B U，SCHERR C，SALLAKU E，et al. Evaluation of associative effects of total mixed ration for dairy cattle using in vitro gas production and different rumen inocula［J］. Journal of the Science of Food and Agriculture，2012，92（12）：2479-2485

（責任編輯 劉婷婷）