白花玉簪組織培養快繁技術要點\t

摘 要 用白花玉簪腋芽作為外植體，篩選出適宜誘導增殖生根等不同階段的配方，以及適合移栽的基質，煉苗成活率高，為白花玉簪組織培養快繁技術提供了技術參考。

關鍵詞 白花玉簪;腋芽;組織培養

白花玉簪是百合科玉簪屬多年生宿根花卉。葉叢生，花莖從葉叢中抽出，葉片卵形或卵圓形，花朵簇生或單生，喜濕潤肥沃的土壤，耐陰，在園林綠化方面用途廣泛，主要種植在行道樹下、公園、草坡、巖石旁等。白花玉簪常用的繁殖方法有分株繁殖和種子繁殖。

近幾年來，白花玉簪種苗需求量較大，分株繁殖和種子繁殖受季節影響，繁殖速度慢，生產周期長，生產成本增加，植株還容易發生變異。利用組織培養繁育能解決以上問題，并在短期內生產出大量無菌種苗。

白花玉簪組織培養外植體主要有莖段、腋芽等。以白花玉簪腋芽為材料，通過組織培養繁殖方法生產大量無菌種苗，且煉苗成功，現將白花玉簪組織培養繁殖方法總結如下。

1 外植體的選擇及清洗

1.1 外植體選擇 4—5月，晴天上午11：00或下午3：00前進行，選擇生長旺盛、沒有病蟲害、花朵數量多的白花玉簪，用鏟子帶根挖出分糵的幼苗。挖取外植體時工具和手須消毒，防止感染。

1.2 外植體清洗 采回的幼苗先清理干凈泥土和雜物后，剪掉下部須根，保留基部鱗芽，去除葉柄，在自來水下沖洗干凈，再用洗衣粉或洗潔精仔細清洗，用流水沖洗1 h左右。

2 接種前的準備工作

2.1 超凈臺滅菌 接種前1 h打開超凈臺，讓其處于工作狀態，打開臺上紫外線燈，照射20 min，關掉紫外線燈，用75%酒精對手進行消毒，再把超凈臺從上到下、從內到外、從左到右用75%酒精擦拭1遍。

2.2 工具滅菌 先用75%酒精擦拭刀架1遍，用鑷子夾住蘸有95%酒精的脫脂棉，用酒精燈點燃后，對刀架、接種盤里外進行灼燒滅菌，滅菌好的接種盤放上濾紙。再依次對解剖刀、鑷子進行灼燒滅菌，放在刀架上冷卻，待用。

2.3 培養基及培養瓶滅菌 用蘸有75%的酒精脫脂棉擦拭培養基和無菌水瓶塞、瓶口、瓶身、瓶底，放入超凈工作臺。

3 外植體消毒

外植體清洗干凈后，放在消過毒的超凈工作臺上，用無菌脫脂棉擦拭1遍外植體表面。

用75%酒精消毒30 s，用無菌水沖洗3遍;用有效氯1%的NaClO溶液消毒15 min，用無菌水沖洗5遍;剝去芽外側的苞片，再用有效氯0.5%的NaClO溶液消毒5 min，用無菌水沖洗5遍。

4 誘導及培養條件

消毒好的外植體置于接種盤中，用濾紙吸干表面水分，用刀片切割出腋芽生長點，接種到誘導培養基。培養基配比如下：

（1）MS+1 mg/L 6-BA+0.1 g/L NAA+30 g/L糖;

（2）MS+3 mg/L 6-BA+0.2 g/L NAA+30g/L糖，瓊脂4.7 g/L，pH值5.8。

每個培養瓶接種3個，蓋上瓶塞，注明編號、日期、品種、培養基名稱、接種人員等，放到培養室進行培養。

放入培養室后暗光培養約1周， 逐漸增加光照，培養室溫度25 ℃， 光照時間12 h/d，光照強度800～1 000 lx，室內濕度40%。

經過30 d的觀察，第1種培養基出芽率高、芽品質一致、感染率低，適宜作誘導培養基。

5 增殖培養

培養30 d無菌芽長出，將健康的芽切割下來，轉接到增殖培養基：

（1）MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+50 mg/L KH2PO4+水解乳蛋白500 mg/L+30 g/L糖;

（2）MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+30 g/L糖，瓊脂4.7 g/L，pH值5.8。

增殖階段每瓶放16個芽，放置在培養室培養，溫度25 ℃，光照時間12 h/d，光照強度1 500 lx。

接種3 d后檢查芽感染情況，并及時清理。培養15 d左右，萌發出2～3片葉。1個月后，玉簪芽長到一定高度，形成多個芽簇狀。把每個芽分離出來，剪掉1/2葉片，繼續進行繼代培養。每月繼代1次，以后每月大約以10倍以上的速度繁育，半年內就可以形成大量的無菌植株。繼代階段也可以挑出健壯的芽直接進行生根培養，其余芽繼續繁殖。

增殖階段第2種培養基分化率高、感染率低、無畸形苗，繼代后芽的品質穩定， 適宜作增殖培養基。

6 生根培養

芽苗生長到一定高度時，選擇健壯無感染、3～4片葉、長約2 cm的芽，用消毒過的剪刀剪下來，轉入生根培養基。轉接時不要傷及葉片或莖部。

（1）1/4MS+0.1 mg/L NAA+30 g/L糖;

（2）MS+1 mg/L IAA+30 g/L糖，瓊脂4.7 g/L，pH值5.8。

生根階段每瓶放11個芽，放置培養室進行培養。溫度25 ℃，光照時間12 h/d，光照強度2 000 lx。

培養10 d左右，第1種培養基根長出，根長約0.5 cm，3～4條。培養30 d， 根長1.5 cm以上，根多、粗壯、有活力，適合煉苗的標準。故選擇第1種培養基做為白花玉簪的生根培養基。

7 馴化及移栽

從培養室移到溫室的瓶苗，在移栽前必須馴化15～20 d。先用遮陰網蓋住瓶苗，白天溫度23～27 ℃，晚上20～23 ℃，濕度70%左右。經過一段時間的鍛煉，幼苗葉片由嫩黃色帶有白色條紋變成純翠綠色，白色條紋消失，而且還萌發新葉，原有葉片由長形長大變成卵圓形，幼苗整體長高，并長出新根，根變粗，表明幼苗已經適應外界環境，即可移栽。

出瓶前1 d，打開瓶塞，蓋上報紙，使瓶內濕度與溫室濕度接近，用高錳酸鉀對花盆（10 cm×10 cm硬塑料盆）進行滅菌。準備好所需的基質，園土（帶細沙）、泥炭、珍珠巖、椰糠按2 ∶ 2 ∶ 1 ∶ 1比例混合，并用多菌靈消毒備用。

用鑷子從瓶里將幼苗取出時，應注意不要弄傷葉片和根部。苗取出來后，先把黃葉剪掉，清理根部雜物，1條根或無根的苗，撿出扔掉。選擇生長健壯、根系發達、根多的幼苗，用純凈水洗掉雜質和培養基，再放到10%多菌靈溶液中消毒60 s后移栽到硬塑料盆中。栽好幼苗后，按品種分類擺放在苗床上，注明品種、日期，方便以后查看。

移栽15 d左右，長出新葉片后，可以移到溫室外的樹下自然生長。

任武婷，陜西省苗木繁育中心，郵編722300（眉縣）。

收稿日期：2024-04-12