CP、Cys-C、RBP及其聯合檢測在喀什地區維吾爾族慢性腎臟疾病中的診斷價值

【摘要】 目的 分析尿外泌體銅藍蛋白（CP）、血清胱抑素C（Cys-C）、視黃醇結合蛋白（RBP）及其聯合檢測對喀什地區維吾爾族早期慢性腎臟疾病（CKD）的診斷價值。

方法 選取2019年1月—2023年1月在新疆喀什地區第一人民醫院就診的225例維吾爾族CKD患者納入CKD組，另選取同期在體檢中心接受健康檢查的186例維吾爾族體檢者納入健康對照組。收集兩組的尿外泌體CP、血清Cys-C及RBP值。采用logistic回歸分析影響早期CKD的因素，繪制受試者工作特征（ROC）曲線分析CP、Cys-C、RBP及其聯合檢測對早期CKD的臨床診斷效能。

結果 與健康對照組比較，CKD組患者的血清白蛋白、C反應蛋白、血尿素、血沉均明顯升高（P＜0.05），腎小球濾過率降低（P＜0.05）。與健康對照組比較，CKD組尿外泌體CP、血清Cys-C及RBP表達均明顯升高（P＜0.001）。Logistic回歸分析顯示，尿外泌體CP、血清Cys-C及RBP是影響早期CKD的獨立因素（P＜0.001）。ROC曲線分析顯示，與尿外泌體CP、血清Cys-C、血清RBP比較，聯合檢測（并聯）診斷早期CKD的AUC、特異度均明顯升高。

結論 早期CKD患者的尿外泌體CP、血清Cys-C、血清RBP均明顯升高，尿外泌體CP、血清Cys-C、血清RBP均可用于診斷早期CKD，但聯合檢測（并聯）的診斷效能更高，為盡早診斷CKD提供參考。

【關鍵詞】 慢性腎臟疾病；銅藍蛋白；胱抑素C；視黃醇結合蛋白；診斷價值

中圖分類號：R692 文獻標志碼：A DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2024.06.003

Study on the diagnostic value of CP， Cys-C， RBP and their combined detection in chronic kidney disease of Uygur people in Kashgar region

XIAMUXIKAMAER·Maimaitiming， LOU Zhanben， HAN Suying

（Kidney Disease Center， the First People's Hospital of Kashgar， Kashgar 844000， Xinjiang， China）

【Abstract】 Objective To analyze the diagnostic value of urinary exosome ceruloplasmin （CP）， serum cystatin C（Cys-C）， retinol binding protein （RBP） and their combined detection in early chronic kidney disease （CKD） of Uygur people in Kashgar region.

Methods 225 Uygur CKD patients who visited the First People's Hospital of Kashgar from January 2019 to January 2023 were selected and included in CKD group. In addition， 186 Uyghur examinees who underwent health examinations at the physical examination center during the same period were selected as health control group. And then， urinary exosome CP， serum Cys-C and RBP values of the 2 groups were collected. Logistic regression analysis was used to identify the factors influencing early CKD， and receiver operating characteristic （ROC） curve was drawn to analyze the clinical diagnostic efficacy of CP， Cys-C， RBP， and their combined detection for early CKD.Results Compared with the healthy control group， the serum albumin， C-reactive protein， blood urea， and erythrocyte sedimentation rate of the CKD group were significantly increased （P<0.05）， and the glomerular filtration rate was reduced （P<0.05）. Compared with the healthy control group， the expressions of urinary exosome CP， serum Cys-C and RBP in the CKD group were all significantly increased （P＜0.001）. Logistic regression analysis showed that urinary exosome CP， serum Cys-C， and RBP were independent factors affecting early CKD （P<0.001）. ROC analysis showed that， compared with urinary exosome CP， serum Cys-C， and RBP， the AUC and specificity of combined detection （parallel） in diagnosing early CKD were significantly increased.Conclusion Urinary exosome CP， serum Cys-C and RBP are significantly increased in early CKD patients. Urinary exosome CP， serum Cys-C and RBP can be used to diagnose early CKD， but their combined diagnosis （parallel） has higher efficacy， which provides a reference for early diagnosis of CKD.

【Keywords】 chronic kidney disease（CKD）; ceruloplasmin （CP）; cystatin C（Cys-C）; retinol binding protein（RBP）; diagnostic value

慢性腎臟疾病（chronic kidney disease， CKD）是非傳染性疾病發病率和病死率高的重要原因，該疾病具有多種誘發因素，導致慢性腎功能減退，食欲不振、惡心嘔吐是其典型臨床癥狀［1］。當腎臟不正常病理損傷、血液或尿液檢查成分異常等超過3個月，會加大腎臟疾病嚴重惡化的風險。因此，對CKD的及早診治可有效避免腎功能的喪失，提高患者生活質量，降低醫療和經濟負擔，并且CKD患者出現微量蛋白尿時，臨床相關指標檢測缺乏特異度，故有必要尋求能準確反映早期腎臟病變的替代指標［2］。銅藍蛋白（ceruloplasmin， CP）是一種急性反應蛋白，尿液中CP含量異常增高提示腎小球血管出現改變，其中包括血管基底膜電位變化。血清胱抑素C（cystatin C， Cys-C）是半胱氨酸蛋白酶抑制劑，可以清除Cys-C的只有腎臟，腎小球損傷加重后Cys-C含量相應升高，其含量與病情進展呈正相關。視黃醇結合蛋白（retinol-binding protein， RBP）是廣泛分布在體液內的低分子蛋白，主要合成部位是肝臟［3-4］。CP、Cys-C及RBP對腎病診斷具有一定應用價值，但在早期CKD診斷中的研究較少［5］。同時有研究亦顯示，不同種族/民族群體罹患CKD也存在病變的差異，如白種人、多種族、日本人和中國人微量白蛋白尿的風險可從22.0%降至4.5%［6］，亞裔、黑人和西班牙裔CKD患者的腎代謝功能也存在差異［7］，即使同為亞裔群體，影響CKD患者預后的因素也存在差異［8］。基于以上論述，篩選出維吾爾族人群早期CKD診斷的特異性指標，幫助臨床醫生早期識別需要積極治療的人群具有現實意義。本研究以維吾爾族CKD患者和年齡、性別相匹配的健康人群為研究對象，分析血清Cys-C、血清RBP、尿外泌體CP與CKD及微量蛋白尿的相關性，研究血清Cys-C、血清RBP、尿外泌體CP及其聯合檢測對早期CKD的診斷價值，為臨床實現對該類患者的早篩選、早判斷、早干預、早治療提供依據。

1 資料與方法

1.1 樣本量計算

目前暫無維吾爾族人群CKD的流行病學資料，中國CKD的發病率為10.8%［9］，參考發病率推算樣本量公式［10］：n=Z2P（1-P）1/E2，其中Z為置信度水平（取1.96，對應95%的置信水平）、P為發病率（10.8%）、E為所允許的誤差（取0.05），得n=149例，按失訪率5%計，至少納入157例。

1.2 研究對象

選取2019年1月至2023年1月在我院就診的維吾爾族CKD患者共225例納入CKD組，另選取同期在我院體檢中心進行體檢的維吾爾族健康體檢者共186例納入健康對照組。本研究已通過本院醫學倫理委員會審核（倫理批號：20181223）。

納入標準：（1）受試者均為喀什地區維吾爾族人；（2）配合檢測且臨床資料完整；（3）首次確診為CKD，且符合英國國家衛生與臨床優化研究所于2021年制訂的《CKD的評估和管理》中CKD的診斷標準［11］。排除標準：（1）患惡性腫瘤、血液系統疾病、自身免疫系統疾病、感染性疾病等；（2）嚴重心肺功能不全、肝功能障礙者；（3）妊娠、哺乳期婦女；（4）正在或30 d內參加過其他臨床研究；（5）研究者認為不適合參加研究的其他情況。

1.3 方法

1.3.1 尿外泌體CP

采集受試者清晨中段尿標本，通過差速超速離心法提取尿外泌體，采用Aristo全自動分析儀（上海艾思泰智能科技有限公司）以特異性夾心ELISA試劑盒檢測尿外泌體CP水平。

1.3.2 血清Cys-C、RBP檢測

采集受試者清晨空腹靜脈血8 mL，3500 r/min離心10 min（離心半徑10 cm），取上清液，采用7180型全自動生化分析儀（日本日立公司）以免疫比濁法檢測血清Cys-C、RBP水平。

1.4 統計學方法

采用SPSS 26.0軟件對本研究涉及數據展開統計學分析，針對計量資料進行驗證，數據呈正態分布使用均值±標準差（±s）表示，組間數據差異行t檢驗；涉及的計數資料采用（n，%）表示，組間數據差異采用χ2檢驗并完成有效分析。采用logistic回歸分析影響早期CKD的因素；采用受試者工作特征（receiver operating characteristic curve， ROC）曲線繪制完成并評價尿外泌體CP、血清Cys-C、RBP及三者聯合檢測（并聯、串聯）對早期CKD的診斷效能。并聯檢測，任何一項指標為陽性，診斷為陽性，所有指標均為陰性，診斷為陰性；串聯檢測要求所有指標均為陽性，診斷為陽性，所有指標均為陰性，診斷為陰性。CP、Cys-C、RBP的約登指數（Youden index， YI）是ROC曲線所有點的靈敏度+特異性－1，范圍在0～1，該值最大時，說明診斷試驗的效能最好，該值對應的點即為最佳截斷值。檢驗水準：α=0.05，雙側檢驗。

2 結 果

2.1 兩組受試者的臨床一般特征比較

CKD組和健康對照組在性別、年齡、體重指數（body mass index， BMI）、文化程度、工作強度、常住喀什地區≥5年、戶籍地為喀什地區、平均動脈壓、血肌酐、血糖、血滲透壓、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、甘油三酯、膽固醇、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、糖化血紅蛋白等差異均無統計學意義（P＞0.05）；與健康對照組比較，CKD組的血清白蛋白、C反應蛋白、血尿素、血沉、尿微量清蛋白均明顯升高（P＜0.05），腎小球濾過率降低（P＜0.05）。見表1。

2.2 兩組受試者的尿外泌體CP、血清Cys-C及RBP表達

與健康對照組比較，CKD組尿外泌體CP、血清Cys-C及RBP表達均明顯升高（P＜0.001）。見表2。

2.3 影響早期CKD的多因素分析

將表1和表2存在統計學意義的指標，血清白蛋白、C反應蛋白、血尿素、血沉、尿微量清蛋白、尿外泌體CP、血清Cys-C及RBP作為自變量納入logistic回歸分析，將是否罹患CKD作為因變量（健康對照=0、CKD患者=1），結果顯示，尿外泌體CP、血清Cys-C及RBP是影響早期CKD的獨立因素（P＜0.001）。見表3。

2.4 尿外泌體CP、血清Cys-C、RBP及其聯合檢測對早期CKD的診斷價值

與尿外泌體CP、血清Cys-C、RBP比較，聯合檢測（并聯）診斷早期CKD的AUC、特異度均明顯增加，聯合檢測（串聯）診斷早期CKD的特異度明顯增加。見表4、圖1。

3 討 論

目前CKD具體包括慢性腎炎、腎功能不全、腎病綜合征、糖尿病腎病等，若未及時治療會導致死亡風險增加［12-14］。流行病學調查顯示約有5%的CKD患者最終進展為終末期腎病（end-stage renal disease， ESKD），需要接受血液透析等腎臟替代治療以延長壽命［15］。然而昂貴的治療費用和落后的醫療條件仍然導致全球230萬～710萬的成年人得不到持續治療而過早死亡，因而明確有效的標志物，實現臨床早期診斷CKD并給予積極干預對改善患者預后，降低治療成本尤為重要。

本研究結果顯示，與健康人群相比，早期CKD患者尿外泌體CP、血清Cys-C、血清RBP均明顯增高，且經logistic回歸分析顯示，尿外泌體CP、血清Cys-C及RBP是影響早期CKD的獨立因素，提示尿外泌體CP、血清Cys-C、血清RBP可能參與了CKD發生發展過程。CP是機體在急性反應期間大量分泌的一類蛋白，若尿外泌體中CP呈高表達，提示腎小球血管內的基底膜電荷的選擇性發生顯著變化［16-17］。Cys-C是一種廣泛存在于有核細胞、體液中的蛋白質，在飲食、血脂、炎癥以及膽紅素等因素影響下不會出現明顯改變，在體內的含量維持相對穩定，在診斷方面其準確度優于血肌酐。Cys-C具有分子量小、等電點高的特點，可以自由通過腎小球濾過膜并影響腎小管的重吸收、降解過程，Cys-C水平可以直接影響腎小球濾過率（glomerular filtration rate， GFR），可作為反映GFR狀態的敏感生物標志物，其表達水平與腎小球損傷程度呈正相關［18］。陳添儒等［19］等收集611例CKD患者，檢測外周血Cys-C，結果顯示在校正性別、體重指數和空腹血糖等混雜因素后，Cys-C （OR=9.95，95% CI：2.84～34.92，P<0.01）是CKD的獨立風險因素。RBP是一種低分子蛋白，主要由肝臟合成分泌，廣泛存在于體液中。研究顯示腦脊液、視黃醇、90%RBP會形成高分子蛋白，其比例為1∶1∶1，進而降低腎小球的RBP濾過率，促進RBP釋放入血［20-21］，類似的研究如ABBASI等［22］認為RBP是腎小管損傷的潛在標志物，在患者出現蛋白尿和腎小球濾過率等腎小球標志物之前可能會增加，在CKD的早期診斷中，血清RBP可以作為蛋白尿和腎小球濾過率的必要補充指標。

此外，本研究結果顯示，尿外泌體CP、血清Cys-C、RBP均對早期CKD具有一定診斷價值，AUC均＞0.85，敏感度均≥80.00%、特異度均≥81.70%。與單一指標比較，尿外泌體CP、血清Cys-C、血清RBP聯合檢測（并聯）診斷早期CKD的AUC、特異度均明顯增高，聯合檢測（串聯）診斷早期CKD的特異度明顯增高，以上結果說明幾點：（1）尿外泌體CP、血清Cys-C、血清RBP可用于診斷早期CKD；（2）與單個指標相比，聯合檢測，尤其并聯檢測的效能更具優勢，3個指標在CKD的生理和病理過程中各自扮演重要角色的分子，聯合檢測可以提供更豐富的信息，有助于醫生更早地診斷CKD并為治療方案的制訂提供參考；（3）聯合檢測（串聯）在診斷CKD時，傾向于確保診斷的準確性，因而特異性較高，但缺點是忽略了臨床實際存在因個別指標異常而被漏診的情況，聯合檢測（并聯）盡管存在誤診的可能，但該法傾向于發現可能存在的CKD患者，有助于改善診斷靈敏度，因而與聯合檢測（串聯）相比，聯合檢測（并聯）的效能更具優勢，具體體現在AUC、特異度均較高。

本研究亦存在不足，聯合指標在CKD診斷中的應用仍面臨一些挑戰和限制，尿外泌體CP、血清Cys-C、血清RBP聯合指標的標準化和規范化也是亟待解決的問題。因此下一步有必要采用多中心研究，觀察不同民族的早期CKD患者尿外泌體CP、血清Cys-C、血清RBP是否存在差異，提高數據的可比性和可解釋性，優化聯合指標在早期CKD診斷中的應用。

綜上，早期CKD患者的尿外泌體CP、血清Cys-C、血清RBP均明顯增高，可用于診斷早期CKD，但聯合檢測（并聯）的效能更高。

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基金項目：喀什地區應用技術研究與開發計劃項目（KS2020009）

第一作者簡介：夏木西卡馬爾·買買提明，女，主任醫師，醫學學士，研究方向：腎臟病學。E-mail：X15199850595@163.com

［本文引用格式］夏木西卡馬爾·買買提明，婁占本，韓素英.CP、Cys-C、RBP及其聯合檢測在喀什地區維吾爾族慢性腎臟疾病中的診斷價值［J］.右江醫學，2024，52（6）：496-501.