辣椒中多種農藥殘留篩查能力驗證

作者簡介：楊雅雅（1990—），女，黎族，廣東潮陽人，本科，工程師。研究方向：食品安全與檢驗檢測。

通信作者：常虹（1987—），女，陜西西安人，碩士，高級工程師。研究方向：食品安全與檢驗檢測。E-mail： 375552783

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摘 要：通過分析辣椒中多種農藥殘留篩查能力驗證工作過程及其注意事項，為其他實驗室參與多種農藥殘留篩查能力驗證提供參考。依據英國分析實驗室能力驗證作業指導書及氣相色譜-串聯質譜法對辣椒中多種農藥殘留進行篩查，確定目標農藥，并進行3次測試。7種目標物質3次測定結果相比較，結果接近，且相對標準偏差均小于10%，測定數值可靠；Z值在0.0～0.6，且3次測定結果的|Z|均≤2.0，本次能力驗證結果為滿意。

關鍵詞：辣椒；農藥殘留；氣相色譜-串聯質譜法

Capability Verification for Screening Multiple Pesticide Residues in Peppers

YANG Yaya1， ZHOU Yingxue1， WANG Qiongmei1， WU Lijiao1， ZHOU Mengli1， CHANG Hong2*

（1.Danzhou Branch of Hainan Academy of Inspection and Testing， Danzhou 571700， China;

2.Institute of Food Testing， Hainan Academy of Inspection and Testing， Haikou 570314， China）

Abstract： By analyzing the process and precautions of the proficiency verification of multiple pesticide residue screening in peppers， a reference is provided for other laboratories to participate in the proficiency verification of multiple pesticide residue screening. According to the operating instructions and gas chromatography-tandem mass spectrometry Food Analysis Performance Assessment Scheme， multiple pesticide residues in peppers were screened， the target pesticides were determined， and three tests were conducted. The three determination results of the seven target substances were compared， and the results were close， and the relative standard deviations were all less than 10%， and the determination values ??were reliable; the Z value was between 0.0 and 0.6， and the |Z| of the three determination results was ≤2.0， and the results of this proficiency verification were satisfactory.

Keywords： pepper; pesticide residues; gas chromatography-tandem mass spectrometry

辣椒是一年生或多年生草本植物，原產于中南美洲，是中國和世界上消費量最大的調味作物之一，也是餐桌上常見的蔬菜[1-3]。辣椒適應性強、產業鏈長、營養豐富，在世界范圍內具有很高的商業價值。隨著辣椒病蟲草害日益嚴重，不規范使用農藥造成的辣椒農藥殘留問題已成為制約辣椒產業發展和辣椒出口的障礙[4]。《食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）[5]對辣椒中農藥殘留限量做了比較細致的規定。農藥殘留監管是保護公眾生命安全、提高農產品質量、提高農產品市場競爭力和增強農產品品牌效應的有力保障[6]。

能力驗證是采取實驗室間的檢測比較，根據事先確定的標準來評估參與者檢測能力的一種方法[7-9]。

能力驗證有利于檢驗檢測實驗室對其測定數據的可靠性與準確性進行評估和驗證，發現本身存在的問題，從而提高實驗室檢測技術和實驗室管理的水平。中國合格評定國家認可委員會（China National Accreditation Service for Conformity Assessment，CNAS）規定了尋找且參與能力驗證，是合格評定機構的責任和義務[10]。在食品檢驗領域，英國分析實驗室能力驗證（Food Analysis Performance Assessment Scheme，FAPAS）是享譽世界的國際型評價體系[11]，目前有很多檢驗檢測機構主動參與FAPAS能力驗證。本實驗室參加了FAPAS 19255辣椒農藥殘留篩查能力驗證，結合在能力驗證中所做的各項工作，為其他實驗室參與多種農藥殘留篩查能力驗證提供相關參考。

1 材料及方法

1.1 材料與試劑

19255能力驗證樣品（英國FAPAS提供的辣椒測試樣品）；19255b辣椒空白基質樣品（英國FAPAS）；乙腈、正己烷（默克，色譜級）；氯化鈉、甲苯（分析純）；馬拉硫磷、喹氧靈（100 μg·mL-1，壇墨質檢）；氟蟲腈砜、b-硫丹、丙環唑、甲氰菊酯、茚蟲威（100 μg·mL-1，農業農村部環境保護科研監測所）；Agilent鹽包（Part No：5982-0650）；Agilent凈化管（Part No：5982-5256）；石墨化碳氨基復合小柱（500 mg/500 mg/ 6mL，Agela）。

1.2 儀器與設備

GCMS-TQ8040氣相色譜-三重四極桿質譜聯用儀（島津）；SiGMA 2-16KL冷凍離心機（德國SiGMA公司）；TYXH-I旋渦混合器（上海三儀實業有限公司）；HN132樣品濃縮儀（海能品牌）；Sartorious CP225D電子天平（北京賽多利斯）；T25 digital TURRAX勻漿機（德國IKA公司）；EV322旋轉蒸發儀（萊伯泰科）。

1.3 標準溶液配制

混合儲備液：準確移取100 μg·mL-1馬拉硫磷、喹氧靈、氟蟲腈砜、b-硫丹、丙環唑、甲氰菊酯和茚蟲威各800 μL于10 mL容量瓶，40 ℃氮吹儀氮氣吹干后，用正己烷定容至10 mL，得到8 μg·mL-1混合標準儲備液。

混合使用液：準確吸取8 μg·mL-1混合標準儲備液1 000 μL，用正己烷定容至10 mL，得到0.8 μg·mL-1混合標準使用液。

基質工作溶液：按照樣品前處理方法稱取19255b辣椒空白基質樣品提取空白基質溶液作為溶劑，分別準確吸取10 μL、20 μL、40 μL、60 μL、80 μL、160 μL和240 μL混合標準使用液，用空白基質溶液定容至1 mL，得8 ng·mL-1、16 ng·mL-1、

32 ng·mL-1、48 ng·mL-1、64 ng·mL-1、128 ng·mL-1和

192 ng·mL-1基質工作溶液。

1.4 樣品前處理

1.4.1 QuEChERS法

稱取10 g辣椒盲樣于50 mL離心管中，加入

10 mL乙腈渦旋混合均勻，于冰柜中冷凍20 min，取出，加入一包Agilent鹽包（Part No：5982-0650），渦旋器上渦旋1 min，10 000 r·min-1、20 ℃離心5 min。

吸取6 mL乙腈層加入15 mL Agilent凈化離心管中（Part No：5982-5256），渦旋器上渦旋1 min，10 000 r·min-1、20 ℃離心5 min，用移液槍準確移取上層清液2 mL于10 mL離心管中，40 ℃氮吹近干，用1 mL正己烷溶劑復溶，渦旋器混合，過0.22 μm有機濾膜于進樣瓶中，待測。

1.4.2 固相萃取小柱法

稱取20 g辣椒盲樣于250 mL高型燒杯中，準確加入40 mL乙腈，用高速勻漿機15 000 r·min-1勻漿2 min，濾紙過濾，收集濾液30 mL以上到裝有

6 g左右NaCl的具塞量筒中，蓋上塞子，渦旋混合30 s，在室溫下靜置分層（靜置時間為30 min）。

準確吸取10 mL乙腈層溶液于50 mL旋轉蒸發瓶中，40 ℃真空下旋轉濃縮近干，取出。加入4 mL乙腈-甲苯（3∶1）淋洗液，渦旋混勻，過6 mL石墨化碳氨基復合小柱（先用5 mL淋洗液預洗柱），下端用新的50 mL旋轉蒸發瓶接收，用淋洗液淋洗旋轉近干的蒸發瓶2次，每次用4 mL淋洗液，防止樣品損失，最后用15 mL淋洗液淋洗柱子，合并于新的旋轉蒸發瓶中。40 ℃真空下旋轉濃縮近干，用正己烷溶劑定容到5 mL，渦旋混合均勻，過0.22 μm有機濾膜于進樣瓶中，待測。

1.5 氣相色譜-串聯質譜條件

進樣口溫度：250 ℃；不分流進樣；進樣體積：1 μL；載氣：高純氦氣；毛細管柱型號：Rxi-5Sil" MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；柱溫采用梯度升溫模式：起始溫度50 ℃保持1 min，以25 ℃·min-1升溫至125 ℃，保持0 min，再以10 ℃·min-1升溫至300 ℃，

保持15 min。流量控制模式：線速度；柱流量：

1.69 mL·min-1；溶劑延遲時間：1.5 min；離子源：EI源；離子源溫度：200 ℃；電離能量：70 eV；MS接口溫度：250 ℃。掃描方式：多反應監測（Multiple Reaction Monitoring，MRM）掃描[12]。MRM條件見表1。

2 結果與分析

2.1 目標農藥的確定

本次FAPAS辣椒測試樣品涉及的農藥及其代謝物共280種，直接購買標準品配制標準液進行篩查，成本高且費時。島津GCMS-TQ8040氣相色譜-串聯質譜儀農藥殘留庫涵蓋了約850種農藥及其代謝物，依據正構烷烴C7～C40進行定位，分組建立MRM方法，對測試盲樣處理上機后進行初篩。對疑似檢出的農藥，再采購標準物質進行定性與定量，最終確定7種目標農藥，分別是馬拉硫磷、喹氧靈、氟蟲腈砜、b-硫丹、丙環唑、甲氰菊酯和茚蟲威。

2.2 固相萃取小柱法和QuEChERS法的比較

在確定目標農藥后，采用固相萃取小柱法和QuEChERS法兩種前處理方法，對空白基質進行加標回收實驗。兩種方法的檢測結果接近，都能得到較滿意的回收效果。但石墨化碳氨基復合小柱法使用的溶劑較多，一次使用樣品量較大，耗時較長；QuEChERS法具有使用溶劑較少、簡便、高效易操作的特點，故最后采用QuEChERS法進行樣品檢測。

2.3 線性范圍及相關系數

用空白基質液配制工作曲線，濃度在0.008～

0.192 μg·mL-1時，7種農藥目標物均呈現良好的線性關系，相關系數＞0.999，可以滿足定量分析要求。

2.4 能力驗證樣品檢測結果

按1.3、1.4.1和1.5節進行樣品前處理和儀器測定，一共測定3次，每次2個平行，得到的數據見表2。由表2可知，3次檢驗的相對標準偏差（Relative Standard Deviation，RSD）＜10%，數值穩定可靠，第3次檢測結果回收率整體更接近100%，故選擇第3次的檢驗結果上報。

2.5 數值比較

FAPAS公布的能力驗證結果顯示，在樣品19255辣椒多種農藥殘留篩查中，馬拉硫磷、氟蟲腈砜、b-硫丹、丙環唑、喹氧靈、甲氰菊酯和茚蟲威的通過率分別為72%、74%、79%、78%、68%、86%和73%。如表3所示，上報的測定結果與FAPAS賦值接近，Z值在0.0～0.6，且3次測定結果的|Z|均≤2.0，本次能力驗證比對取得滿意結果。

3 結論與討論

本次FAPAS能力驗證填報的項目均取得滿意結果。此次FAPAS能力驗證的難點在于農藥覆蓋范圍廣，涵蓋280種農藥，實驗室一般只儲備日常檢驗用到的標準品，不會儲備這么多種農藥標準物質。雖然通過儀器農藥殘留庫建立初篩方法能較好地完成篩查，鎖定目標物質，但也存在個別農藥殘留在氣相色譜-質譜聯用儀上響應不好，無法確定的情況。參加FAPAS的農藥篩查能力驗證，未要求參加測試的實驗室把所有農藥殘留項目都檢測出來，只要求上報的項目定量準確。

通過參加這次能力驗證，筆者總結出一些檢驗注意事項：①建議購買FAPAS對應能力驗證的空白樣品，節約篩選空白基質的時間；②實驗室收到樣品后要確認樣品完整無損壞，以及樣品到達實驗室是否超過運輸期限；③在正式實驗前先取少量樣品進行預實驗，確定目標農藥及農藥的大概濃度范圍；④采用QuEChERS法進行前處理，加入鹽包后會產熱，因此在加入鹽包前，可先加乙腈混勻后冷凍

20 min，避免目標物質受熱分解，影響檢測結果；⑤安排不同檢驗人員進行檢測，避免因人員操作失誤導致的檢測結果誤差；⑥填報結果時，核對清楚目標物質，其他未檢驗的農藥選擇未測試，避免填報錯誤造成結果“不滿意”。

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