一例豬瘟的鑒別診斷及防控建議

摘要：豬瘟病毒（CSFV）是影響生豬養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要疾病之一，是一種高度傳染性、致死性的接觸性、病毒性豬傳染病，給養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。本文通過對(duì)某養(yǎng)豬大戶豬瘟的診斷分析，針對(duì)性提出當(dāng)?shù)刎i瘟疫病的防控建議。

關(guān)鍵詞：豬瘟；高度傳染性；傳染病；診斷；防控建議

豬瘟（classical swine fever，CSF）是由豬瘟病毒引起的一種具有高度傳染性、致死性、接觸性、病毒性豬傳染性疫病，該病的發(fā)病特征是體溫升高，肢體末端淤血、發(fā)紺，嘔吐及糞便帶血等癥狀，懷孕母豬感染可導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎及木乃伊胎等。該病發(fā)生時(shí)易導(dǎo)致其他疾病的繼發(fā)感染，如豬繁殖與呼吸綜合征、副豬嗜血桿菌及豬支原體病等，與非洲豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征臨床癥狀相似，需進(jìn)行鑒別診斷。目前為止尚未研究出可以抑制或清除豬瘟病毒（CSFV）的特異性藥物，加強(qiáng)養(yǎng)殖場(chǎng)生物安全防控和對(duì)健康豬群疫苗免疫是預(yù)防該病的主要手段。

1 基本情況

水城區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心于2018年9月12日接到鄉(xiāng)鎮(zhèn)報(bào)告存欄生豬198頭某養(yǎng)豬大戶豬群出現(xiàn)大面積發(fā)病，癥狀典型。該養(yǎng)豬場(chǎng)位于村莊中間，未遠(yuǎn)離居住區(qū)，在500 m內(nèi)有零星住戶，500 m以外有養(yǎng)豬大戶1戶，距離通組公路700 m，為家庭養(yǎng)殖場(chǎng)，自繁自養(yǎng)模式，基礎(chǔ)設(shè)施差，功能區(qū)劃分不清晰，無《動(dòng)物防疫條件合格證》，養(yǎng)殖場(chǎng)負(fù)責(zé)人自學(xué)養(yǎng)殖技術(shù)，自行管理，負(fù)責(zé)養(yǎng)殖場(chǎng)疫病防控及治療等相關(guān)技術(shù)。該養(yǎng)殖大戶的生豬從2018年8月26日起開始發(fā)病，表現(xiàn)為精神沉郁、體溫升高、全身發(fā)紅、呼吸困難等癥狀，使用磺胺間甲氧嘧啶、恩諾沙星及清熱解毒中藥等進(jìn)行治療無效，開始出現(xiàn)零星死亡，于9月11日開始，出現(xiàn)大量發(fā)病及死亡情況，9月11日死亡6頭，自行進(jìn)行無害化處理，截止到2018年9月12日，共死亡豬94頭，死亡率為39.83%。

2 流行病學(xué)調(diào)查

該養(yǎng)殖場(chǎng)自養(yǎng)殖以來，未發(fā)生過大量豬死亡，零星死亡病豬均進(jìn)行深埋處理。該養(yǎng)殖場(chǎng)為自繁自養(yǎng)場(chǎng)，家庭養(yǎng)殖，自行開展飼養(yǎng)管理，未使用政府提供的豬瘟疫苗，該場(chǎng)于2018年4月25日自購豬瘟疫苗進(jìn)行全群豬瘟疫苗注射。縣級(jí)主管部門接到報(bào)告一小時(shí)即到達(dá)現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行疾病診斷及流行病學(xué)調(diào)查，對(duì)該場(chǎng)周邊養(yǎng)殖戶養(yǎng)殖情況及豬只健康狀況、豬只購入情況等進(jìn)行緊急流行病學(xué)調(diào)查。經(jīng)排查，周邊農(nóng)戶共11戶，其中5戶共養(yǎng)殖生豬398頭且近期健康狀況良好，近一個(gè)月內(nèi)無購入及銷售豬只情況，未飼喂泔水，6戶未養(yǎng)殖生豬。

3 臨床癥狀

通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)，剩余存欄104頭中73頭可見發(fā)病癥狀，31頭無癥狀。發(fā)病豬群臨床表現(xiàn)為食欲廢絕，呈腹式呼吸，鼻鏡干燥，糞便干硬，有血便，體表出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)、耳發(fā)紫，發(fā)病前期豬腹瀉便秘交替，病豬死前下腹部、下頜和臀部發(fā)紺（見圖1），體表發(fā)紅氣喘死亡，平均體溫41.6 ℃。

結(jié)合臨床癥狀與流行病學(xué)調(diào)查情況，現(xiàn)場(chǎng)診斷疑似豬瘟疫情。按豬瘟疫情逐級(jí)上報(bào)，并對(duì)該場(chǎng)進(jìn)行封鎖隔離，全場(chǎng)消毒，禁止場(chǎng)內(nèi)物品流出。

4 剖檢病理變化

現(xiàn)場(chǎng)對(duì)病豬進(jìn)行解剖，剖檢顯示病豬肺腫大，沉入水底，呈胰樣變；心肌出血；肺門淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)、腹股溝淋巴結(jié)均腫大出血，呈大理石狀；肝臟腫大出血；脾臟腫大，有針尖狀出血點(diǎn)，邊緣鈍圓；腎臟腫大，腎表面可見針尖狀出血，腎盂出血；胃底部有出血點(diǎn)；回盲瓣發(fā)生潰瘍，呈紐扣狀；膀胱有針尖狀出血點(diǎn)（圖2）。

5 實(shí)驗(yàn)室診斷

根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查以及臨床癥狀、解剖病變分析，初診疑似豬瘟或豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室鑒別診斷確診。

5.1 材料與方法

1）樣品的采集與制備。在確保無過度污染的情況下，官方獸醫(yī)對(duì)發(fā)病豬進(jìn)行樣品采集，采集發(fā)病豬的病料，即病豬全血，解剖并采集肝臟、腎臟、淋巴結(jié)、脾臟等病變組織，冷藏后送實(shí)驗(yàn)室待檢。分別將肝臟、腎臟、淋巴結(jié)、脾臟等病變組織取出適量，置于1.5 mL離心管中，加入生理適量生理鹽水及不同規(guī)格的研磨磁珠，放置于組織研磨儀中進(jìn)行研磨后，取出，于4 ℃離心機(jī)中8 000rpm離心2 min，再將研磨后的勻漿液或全血（全血不需要研磨處理）取出后吸取上清液，移至核酸提取試劑盒中，根據(jù)使用說明在加有樣品的提取孔中加入蛋白酶k，振蕩混均勻后，按照核酸提取儀要求進(jìn)行核酸提取，提取病料核酸備用。

2）檢測(cè)方法。采用熒光定量RT-PCR和熒光定量PCR檢測(cè)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室鑒別確診，按照GB/T 16551—2008 豬瘟診斷技術(shù)和GB/T 35912—2018 豬繁殖與呼吸綜合征病毒熒光RT-PCR檢測(cè)方法執(zhí)行。

5.2 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)樣品 Ct 值的大小及擴(kuò)增曲線的形成情況判定結(jié)果。豬瘟病毒檢測(cè)陽性對(duì)照CT值≤30，出現(xiàn)特異性擴(kuò)增曲線，陰性對(duì)照無CT值并且無特異性擴(kuò)增曲線，實(shí)驗(yàn)結(jié)果成立，CT值≤30為陽性，CT值≧30為陰性。豬繁殖與呼吸綜合征病毒陽性對(duì)照CT值≤30并出現(xiàn)特異性擴(kuò)增曲線，陰性對(duì)照無CT值并且無特異性擴(kuò)增曲線，實(shí)驗(yàn)結(jié)果成立，CT值≤30為陽性，CT值≧30為陰性。

5.3 熒光定量RT-PCR和熒光定量PCR檢測(cè)

將提取的核酸（RNA）取出，按照北京世紀(jì)元亨豬瘟病毒通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒（生產(chǎn)批號(hào)：CSFV20181002P）說明書，進(jìn)行豬瘟病毒（CSFV）檢測(cè)：將提取的核酸（DNA），按照北京世紀(jì)元亨豬繁殖與呼吸綜合征病毒實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒（生產(chǎn)批號(hào)：HPRRSV20181002P）說明書，進(jìn)行豬繁殖與呼吸綜合征（PRRSV）檢測(cè)。嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作進(jìn)行。

6 鑒別診斷結(jié)果

根據(jù)臨床癥狀及解剖病變，對(duì)送檢樣品進(jìn)行豬瘟病毒（CSFV）及豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）實(shí)驗(yàn)室鑒別診斷。

6.1 豬瘟病毒（CSFV）檢測(cè)結(jié)果

豬瘟病毒檢測(cè)陽性對(duì)照CT值≤30，出現(xiàn)特異性擴(kuò)增曲線，陰性對(duì)照無CT值并且無特異性擴(kuò)增曲線，實(shí)驗(yàn)結(jié)果成立。所有被檢樣品進(jìn)行豬瘟病毒檢測(cè)時(shí)CT值≤30并出現(xiàn)特異性擴(kuò)增曲線，表明所有樣品為豬瘟病毒（CSFV）陽性（見圖3）。

6.2 豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）檢測(cè)結(jié)果

豬繁殖與呼吸綜合征病毒陽性對(duì)照CT值≤30并出現(xiàn)特異性擴(kuò)增曲線，陰性對(duì)照無CT值并且無特異性擴(kuò)增曲線，實(shí)驗(yàn)結(jié)果成立。所有被檢樣品無CT值且無特異性擴(kuò)增曲線，表明所有樣品豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）陰性（見圖4）。

7 結(jié)果分析

該養(yǎng)殖場(chǎng)因疾病防控意識(shí)不足，生物安全意識(shí)缺乏；養(yǎng)殖場(chǎng)選址及布局不合理；養(yǎng)殖水平相對(duì)較差，營養(yǎng)不均衡，豬群免疫力低下；免疫疫苗獲取途徑不正規(guī)等，疫苗免疫失?。灰陨弦蛩鼐C合導(dǎo)致了本次場(chǎng)內(nèi)大規(guī)模疫情的發(fā)生。

通過對(duì)該場(chǎng)病豬的流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀及解剖病理變化等進(jìn)行調(diào)查，以及結(jié)合對(duì)送檢樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室豬瘟病毒及豬繁殖與呼吸綜合征病毒鑒別診斷確認(rèn)，送檢病料均檢測(cè)出豬瘟病毒，豬繁殖與呼吸綜合征病毒未檢出。確診該豬群為豬瘟病毒感染。

8 防控建議

8.1 加強(qiáng)生物安全管理

該養(yǎng)殖選址不符合動(dòng)物防疫要求，周邊養(yǎng)殖戶情況復(fù)雜，養(yǎng)殖場(chǎng)位于村莊及道路周邊，人員物資流動(dòng)性大，疾病傳播風(fēng)險(xiǎn)存在較大隱患，建議養(yǎng)殖場(chǎng)重新選址，選擇符合動(dòng)物防疫合格條件的養(yǎng)殖地點(diǎn)，或加強(qiáng)該場(chǎng)生物安全管理，嚴(yán)格控制人員及物品的流動(dòng)，對(duì)進(jìn)場(chǎng)物品及人員進(jìn)行嚴(yán)格的消毒及生物安全隔離；養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行嚴(yán)格的消毒，加強(qiáng)場(chǎng)內(nèi)衛(wèi)生管理，減少“四害”滋生，制定消毒制度，定期更換消毒藥；設(shè)置防護(hù)網(wǎng)，防治飛禽傳播疾病。

8.2 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

提高豬群飼料營養(yǎng)水平，增加豬群的抵抗力；科學(xué)合理地進(jìn)行飼養(yǎng)管理，分群飼養(yǎng)，滿足不同階段的營養(yǎng)需求；對(duì)豬群采取全進(jìn)全出制度，減少豬只的流動(dòng)導(dǎo)致應(yīng)激的產(chǎn)生及疫病的傳播；結(jié)合本場(chǎng)實(shí)際，制定適合本場(chǎng)的免疫制度，通過正規(guī)途徑獲取防疫疫苗，科學(xué)進(jìn)行動(dòng)物疫病防疫；聘請(qǐng)專業(yè)技術(shù)人員對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行技術(shù)指導(dǎo)，或提高家庭飼養(yǎng)人員的防疫意識(shí)和防控技術(shù)，科學(xué)有效地進(jìn)行場(chǎng)內(nèi)疫病防控，增強(qiáng)疾病預(yù)防能力。

9 防控建議及體會(huì)

通過本次疫情，各級(jí)對(duì)該起疫情的快速反應(yīng)和處置，疫情得到有效的控制，有效阻止了疫病的蔓延，對(duì)該場(chǎng)發(fā)病豬群實(shí)施強(qiáng)制撲殺，將疫病控制在源頭。積極快速地開展疫病調(diào)查、消毒、強(qiáng)制撲殺、無害化處理等，快速有效的撲滅疫情。

疾病防控的關(guān)鍵在于預(yù)防“防重于治”。山區(qū)基層動(dòng)物疫病的發(fā)生，一方面是養(yǎng)殖戶疫病防控意識(shí)薄弱，動(dòng)物防疫等相關(guān)知識(shí)獲取途徑匱乏，導(dǎo)致疫苗獲取途徑規(guī)范；另一方面是養(yǎng)殖戶拒絕使用政府采購疫苗，盲目采購疫苗，導(dǎo)致免疫失敗。地方相關(guān)部門需加強(qiáng)動(dòng)物疫病防控知識(shí)的宣傳，強(qiáng)化對(duì)養(yǎng)殖戶的服務(wù)力度，提高與養(yǎng)殖場(chǎng)戶的聯(lián)系及信任度的建立，實(shí)現(xiàn)動(dòng)物疫病群防群控，有效減少動(dòng)物疫病的發(fā)生。