中國(guó)鱟人工繁育系列裝置設(shè)計(jì)和養(yǎng)殖效果分析

摘 要：為提高中國(guó)鱟人工繁育養(yǎng)殖效率，針對(duì)中國(guó)鱟人工繁殖和幼體培育過程中的養(yǎng)殖裝置進(jìn)行了優(yōu)化設(shè)計(jì)、改進(jìn)，并比較了新舊裝置的養(yǎng)殖效果。結(jié)果表明：新型親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)平均每只雌鱟產(chǎn)卵量為3530粒，顯著高于常規(guī)親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)（2320粒）（P＜0.05），過濾桶清洗頻率顯著低于常規(guī)親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)（P＜0.05）；新型幼體培育裝置獲得2齡幼體比率（93.33%）和3齡幼體比率（35.33%）顯著高于常規(guī)幼體培育裝置（2齡83.33%和3齡10.33%）（ P＜0.05）；新型幼體培育裝置1齡幼體平均死亡率（6.67%）和2齡幼體平均死亡率（6.33%）均顯著低于常規(guī)幼體培育裝置（16.67%和30.67%）（P＜0.05）；新型幼體培育裝置養(yǎng)殖第11～12 d 開始2齡蛻殼、21～30d 開始3齡蛻殼，常規(guī)幼體培育裝置2、3齡蛻殼均從第31～40d 開始，新型幼體培育裝置所需蛻殼時(shí)間顯著降低（P＜0.05）。以上結(jié)果顯示，新型親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)可增強(qiáng)水體凈化能力，提高親鱟產(chǎn)卵量，顯著加快2齡和3齡幼鱟蛻皮速度，降低2齡幼鱟死亡率。研究結(jié)果可為后續(xù)大規(guī)模鱟人工繁育和幼體培育提供重要技術(shù)參考。

關(guān)鍵詞：中國(guó)鱟；人工繁殖；幼體培育；養(yǎng)殖裝置；孵化率；蛻皮速度

中圖分類號(hào)：S969.2" 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A" 文章編號(hào)：0253?2301（2024）03?0008?07

DOI：10.13651/j.cnki.fjnykj.2024.03.002

Design of the Artificial Breeding Series Device for Chinese Horseshoe Craband Analysis of Its Cultivation Effect

WENG Zhao-hong1 ， HE Ze-ji1 ， ZHONG Yun-min1 ， CHEN Zhi2 ， XIE Yang-jie1＊， GAO Rui1 ， ZHOU Hong-lei3

（1. Fisheries College， Key Laboratory of Healthy Mariculture for the East China Sea of Ministry of Agriculture andRural Affairs， Jimei University， Xiamen， Fujian 361021， China;2. Fujian Institute of Freshwater Fisheries， Fuzhou，F(xiàn)ujian 350005， China;3. Fujian Yangze Marine Biological Technology Co. Ltd.， Fuzhou， Fujian 350005， China）

Abstract： In order to improve the efficiency of artificial breeding and aquaculture efficiency of Chinese horseshoe crab， the breeding equipment used in the process of artificial breeding and larval cultivation of Chinese horseshoe crab was optimized and improved， and the breeding effects of the old and new equipments were compared. The results showed that the average egg-production amount per female Chinese horseshoe crab in the new temporarily rearing system of Chinese horseshoe crab was 3530， which was significantly higher than that in the conventional temporarily rearing system （2320）（P＜0.05）， and the cleaning frequency of the filter vat was significantly lower than that in the conventional system （P＜0.05）. The ratios of 2nd instar larvae （93.33%） and 3rd instar larvae （35.33%） obtained bythe new larval rearing device were significantly higher than those obtained by the conventional larval rearing device （being 83.33% at 2nd instar and 10.33% at 3rd instar）（P＜0.05）. The average mortality rates of 1st instar larvae （6.67%） and 2nd instar larvae （6.33%） in the new larval rearing device were significantly lower than those in the conventional larval rearing device （16.67% and 30.67%）（P＜0.05）. The 2nd instar molting began from the 11th to 12th day and the 3rd instar molting began from the 21st to 30th day in the new larval rearing device， while the 2nd and 3rd instar molting began from the 31st to 40th day in the conventional larval rearing device. It could be seen that the molting time required for the new larval rearing device was significantly reduced （P＜0.05）. The above results showed that the new temporarily rearing system of horseshoe crab could enhance the purification capacity of waters， increase the egg laying amount of horseshoe crab， significantly accelerate the molting speed of the 2nd instar and 3rd instar juvenile Chinese horseshoe crab， and reduce the mortality rate of the 2nd instar juvenile Chinese horseshoe crab. The research results could provide important technical reference for the subsequent large-scale artificial breeding and larval cultivation of horseshoe crab.

Keywords： Chinese horseshoe crab；Artificial breeding；Larvae culture；Cultivation devices；Hatchability；Motingrate

中國(guó)鱟 Tachypleus tridentatus 曾經(jīng)是廣布我國(guó)東南沿海的大型海洋底棲節(jié)肢動(dòng)物[1?2]，其血細(xì)胞溶解液制備的鱟試劑為目前各國(guó)藥典規(guī)定的用于檢測(cè)內(nèi)毒素的標(biāo)準(zhǔn)試劑，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、臨床和食品等行業(yè)[3?5]。近幾十年來，由于濱海社會(huì)和經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展，大量海岸帶被填海造地或建設(shè)港口，中國(guó)鱟棲息地受到嚴(yán)重破壞，加上過度捕撈，中國(guó)沿岸鱟資源急劇下降，瀕臨滅絕[1，6]，其資源的衰竭將嚴(yán)重影響到我國(guó)醫(yī)藥安全檢測(cè)。中國(guó)鱟已于2021年被列為國(guó)家二級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物[7]，其資源保護(hù)和恢復(fù)極為迫切。

中國(guó)鱟人工繁育和放流是增加其野外資源的重要途徑。中國(guó)鱟生長(zhǎng)發(fā)育周期慢長(zhǎng)，需要十幾年時(shí)間，且對(duì)潮間帶幼鱟生活習(xí)性和生理特點(diǎn)不甚了解，人工繁育目前困難重重。中國(guó)鱟通過自然受精或人工授精獲得受精卵，受精卵孵化成1齡幼鱟的人工育苗過程已有較多人研究[8?10]，有關(guān)受精卵的胚胎發(fā)育有較多文獻(xiàn)報(bào)道[11?14]，且大規(guī)模工廠化育苗技術(shù)也有探索和研究[15]，鱟卵孵化和幼體適宜環(huán)境條件，如溫度[16?18]、鹽度[16，19?21]、溶氧[22?23]、底質(zhì)[24?25]、光照周期[26]、重金屬離子[16，27]的影響等有較多學(xué)者研究，這為幼體培育提供了技術(shù)支持和理論基礎(chǔ)，但目前大部分研究止步于1齡 幼鱟，而1齡幼鱟放流野外，成活率不高。為了提高放流效果，6齡以上幼鱟用于放流比較合適[28?29]。因此中國(guó)鱟室內(nèi)人工繁殖和1齡以上幼鱟培育技術(shù)提高和成熟凸顯重要。構(gòu)建科學(xué)的室內(nèi)繁育系統(tǒng)、提高幼鱟孵化率和成活率是目前中國(guó)鱟人工繁育的關(guān)鍵。

有關(guān)中國(guó)鱟人工繁育相關(guān)裝置的研究較少，當(dāng)前親鱟暫養(yǎng)、鱟卵收集的裝置還存在缺陷，如底沙差易缺氧發(fā)黑，影響親鱟產(chǎn)卵和埋棲；鱟卵收集方法較為原始，需要下池打撈[30?31]，耗時(shí)費(fèi)力且收集率低。目前中國(guó)鱟幼體大規(guī)模培育少有研究，有關(guān)幼體培育過程中養(yǎng)殖裝置構(gòu)建的研究報(bào)道較少。常規(guī)幼鱟培育裝置多為單層水體，結(jié)構(gòu)較為簡(jiǎn)單、水質(zhì)凈化能力差，不利于長(zhǎng)期培育[32]。養(yǎng)殖裝置設(shè)計(jì)存在缺陷會(huì)影響幼體發(fā)育并導(dǎo)致幼鱟死亡率較高[26]。因而幼鱟培育裝置設(shè)計(jì)應(yīng)重點(diǎn)考慮水質(zhì)凈化能力。本研究開展中國(guó)鱟親鱟自然配對(duì)產(chǎn)卵和幼體培育等養(yǎng)殖試驗(yàn)，針對(duì)人工繁殖和幼體培育過程中的養(yǎng)殖裝置進(jìn)行設(shè)計(jì)、效果評(píng)估和養(yǎng)殖管理技術(shù)研究，為中國(guó)鱟大規(guī)模苗種生產(chǎn)提供重要技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 生物材料

2021年9月至2022年12月，試驗(yàn)用親鱟經(jīng)相關(guān)主管部門審批，捕撈于福建海域（有捕撈許可證和繁育許可證）。沙蠶活餌料由福建羅源沙蠶科技小院提供，其他活餌料購于海鮮市場(chǎng)。親鱟暫養(yǎng)前用淡水或含0.002%次氯酸的淡水浸泡10 min 左右，以殺死、洗脫寄生動(dòng)物，之后用海水沖洗。測(cè)量親鱟頭胸甲寬度和體重，雄鱟頭胸甲寬為19.8～26.7 cm，體重為1412.1～1660.7 g；雌鱟頭胸甲寬為28.2～32.3 cm，體重為2728.7～3237.7 g。

1齡和2齡幼鱟為本試驗(yàn)親鱟自然產(chǎn)卵后獲得的受精卵經(jīng)孵化后獲得。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 新型親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)和養(yǎng)殖效果比較 新型親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)的主要設(shè)計(jì)思路是使海水能持續(xù)透過底沙，及時(shí)清除底沙中過量氨氮及硫化物等污染物，使底沙保持干凈和避免缺氧。親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)由親鱟養(yǎng)殖桶和循環(huán)過濾裝置組成。親鱟養(yǎng)殖桶分為內(nèi)桶和外桶，內(nèi)桶為下底直徑1.35 m 、高0.82 m、容量800 L 的圓形塑料桶（圖1，1），底部用支架墊高，置放于外桶（下底直徑1.53 m 、高0.82 m、容量1000 L ）內(nèi)（圖1，2）。內(nèi)桶底部每隔1 cm 鉆直徑0.5 cm 的小孔，然后在桶底鋪上60目篩絹網(wǎng)，并在網(wǎng)上鋪設(shè)10 cm厚底沙。親鱟暫養(yǎng)于內(nèi)桶（圖1，1-2）。桶內(nèi)放置散氣石連續(xù)充氣（圖1，1-1）；外桶內(nèi)放置加熱棒進(jìn)行控溫（圖1，2-1），桶底排水管排水（圖1，2-2）。養(yǎng)殖桶連接過濾桶（圖1，3）用于凈化水質(zhì)和提供循環(huán)水。過濾桶進(jìn)水來自外桶（圖1，3-2），出水進(jìn)入養(yǎng)殖內(nèi)桶（圖1，3-1），由此內(nèi)桶內(nèi)的海水可持續(xù)透過 底沙，通過桶底部小孔流入外桶，達(dá)到循環(huán)過濾目的。

新型親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)與常規(guī)親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)養(yǎng)殖效 果比較。常規(guī)親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)僅有單一養(yǎng)殖桶，過濾 桶的進(jìn)水口和出水口都在同一養(yǎng)殖桶內(nèi)的底沙之 上。兩種親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)內(nèi)各隨機(jī)放入1對(duì)親鱟進(jìn)行 暫養(yǎng)和繁殖試驗(yàn)，設(shè)置2個(gè)平行組，水溫控制為 28～30℃ ， 除養(yǎng)殖裝置差異外，其余養(yǎng)殖條件均一 致（海水鹽度28～33，pH7.8～8.2，溶氧≥6 mg·L?1，10 cm 厚底沙，光周期為12 h 光照和12 h 黑暗，每日下午5：00～6：00均投喂占各親鱟體重3%～5% 的花蛤肉和牡蠣），試驗(yàn)周期為8個(gè)月。在暫養(yǎng)過 程中，當(dāng)水體渾濁看不清底部（透明度≤40 cm）時(shí)，需要清洗過濾桶濾芯。試驗(yàn)結(jié)束后，計(jì)算親鱟存活率、產(chǎn)卵量和過濾桶清洗頻率（過濾桶清洗次數(shù)/實(shí)驗(yàn)天數(shù)）。

1.2.2 鱟卵收集裝置設(shè)計(jì) 中國(guó)鱟受精卵為沉性卵，埋于底沙中，收集時(shí)需要攪動(dòng)沙層再打撈和分揀。常規(guī)收集方法是先排水再由工作人員下池?fù)烊『褪占c卵，這種方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力，還可能因收集鱟卵時(shí)由于反復(fù)操作摩擦鱟卵，對(duì)卵膜造成損傷。

設(shè)計(jì)的新型鱟卵收集裝置（圖2）包括吸卵部分（圖2，1）、管道部分（圖2，2）和集卵部分（圖2，3）。吸卵部分主要為吸卵瓶（圖2，1-1、1-2），前端開口較大，后端狹長(zhǎng)，開口小，通過管道連接集卵部分。因鱟卵比重小于沙粒，通過虹吸作用將底沙中的鱟卵虹吸入收集袋，而沙粒不被吸出。

1.2.3 新型幼體培育裝置設(shè)計(jì)和應(yīng)用效果 常規(guī)幼鱟培育裝置比較簡(jiǎn)單，為帶底沙的玻璃缸或塑料筐，由于底沙不流動(dòng)易發(fā)黑敗壞，不利于幼鱟埋棲，幼鱟死亡率高。本研究設(shè)計(jì)一種新型幼鱟培育裝置（圖3），設(shè)計(jì)原理類似親鱟培養(yǎng)裝置，分內(nèi)外兩層，外層為200 L 水槽（圖3，1），內(nèi)層為40 cm ×30 cm×20 cm 的塑料箱（圖3，2）。塑料箱底部鉆孔（孔徑5 mm ，孔間距10 mm），粘上60目篩絹網(wǎng)（圖3，4），再鋪上5 cm厚的粒徑0.5～1.0 mm 的沙層（圖3，5）。塑料箱放置于水槽中，底部用過濾裝置（圖3，3）墊高。設(shè)置氣提泵（圖3，6）使水槽中的海水流入塑料箱，塑料箱的海水再透過沙層流向底下的過濾裝置，過濾裝置內(nèi)的濾料包（圖3，8）含硝化細(xì)菌，用于分解水體中氨氮、凈化水質(zhì)。

應(yīng)用新型幼鱟培育裝置進(jìn)行幼鱟培育，并與常規(guī)幼鱟培育裝置比較培育效果。每組放置1齡幼體100只，3個(gè)平行組，待出現(xiàn)2齡幼體時(shí)開始投喂新鮮鹵蟲幼體或橈足類，水溫控制在28℃ ， 試驗(yàn)周期90 d，試驗(yàn)結(jié)束后，計(jì)算2齡和3齡幼體比率和死亡率。試驗(yàn)期間對(duì)照組持續(xù)充氣增氧，每天補(bǔ)充淡水以彌補(bǔ)蒸發(fā)的水分，維持水位恒定。及時(shí)取出鱟殼和死亡的幼體并作記錄。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析 計(jì)算以下指標(biāo)：孵化率（%）=100×F/Ns ，感染率（%）=100×G/Ns ，蛻殼率（%）=100×T/N0，死亡率（%）=100×S/N0。

式中：F 為孵出的1齡幼體數(shù)，G 表示感染病菌的卵數(shù)，Ns 為孵化開始時(shí)的總卵數(shù)，T 為某一齡期的蛻殼數(shù)（以鱟殼數(shù)計(jì)），S 表示死亡的卵數(shù)或某一齡期幼體的死亡數(shù)，N0表示初始鱟卵或該齡期幼體數(shù)。

用 SPSS 25.0進(jìn)行數(shù)據(jù)的單因素方差分析（ One- Way ANOVA ），P＜0.05表示差異顯著，P＞0.05表示差異不顯著。用 Origin 2021和 Draw.io 作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)養(yǎng)殖效果

新型親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)與常規(guī)親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)效果比較，在試驗(yàn)期內(nèi)，新型暫養(yǎng)系統(tǒng)平均每只雌鱟產(chǎn)卵量為3530粒，顯著高于常規(guī)親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)（2320粒）（ P＜0.05），而過濾桶清洗頻率顯著低于常規(guī)親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)（P＜0.05）（表1）。結(jié)果表明新型暫養(yǎng)系統(tǒng)的養(yǎng)殖條件更有利于親鱟產(chǎn)卵和棲息，過濾桶清洗頻率更低，水質(zhì)凈化能力更強(qiáng)。此外，本試驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)新裝置的底沙不易發(fā)黑，親鱟埋棲率更高，而常規(guī)親鱟暫養(yǎng)系統(tǒng)中則經(jīng)常出現(xiàn)親鱟翻身“仰躺”的現(xiàn)象，腹面朝上，且底沙發(fā)黑發(fā)臭。

2.2 幼體培育系統(tǒng)應(yīng)用效果

用新型幼體培育裝置（試驗(yàn)組）進(jìn)行1齡幼體持續(xù)90 d 的培育試驗(yàn)，并與常規(guī)幼體培育裝置（對(duì)照組）相比結(jié)果（表2）顯示，試驗(yàn)組獲得 2齡幼體比率（93.33%）和3齡幼體比率（35.33%）顯著多于對(duì)照組（2齡83.33%和3齡10.33%）（Plt;0.05）；試驗(yàn)組1齡幼體平均死亡率（6.67%）和2齡死亡率（6.33%）均顯著低于對(duì)照組（16.67%和30.67%）（ r＜0.05），3齡幼體死亡率分別為10.67%和10.00%，無顯著差異（ r＞0.05）。可見，新型幼體培育裝置對(duì)幼鱟培育效果比常規(guī)幼體培育裝置效果好。

試驗(yàn)期間（90 d）每隔10d 統(tǒng)計(jì)2齡或3齡幼體形成個(gè)體數(shù)，并把新發(fā)育的2齡或3齡幼體挑出，單獨(dú)培育。結(jié)果表明，試驗(yàn)組和對(duì)照組1齡幼體蛻殼成2齡、3齡幼體數(shù)均呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)，試驗(yàn)組2齡幼體第11～20 d 開始出現(xiàn)，第31～40 d 獲得的幼體數(shù)最多（33.30±0.57）只，而對(duì)照組2齡幼體第31～40 d 才開始出現(xiàn)，第41～50 d 獲得的幼體數(shù)最多（41.33±3.51）只（圖4a ）。試驗(yàn)組3齡幼體在第21～30 d 開始出現(xiàn)，第31～40 d 達(dá)最大值（9.33±3.21）只，而對(duì)照組3齡幼體第31～40 d 才開始出現(xiàn)，第61～70 d 達(dá)峰值（8.00±1.00）只（圖4b ）。可見新型幼體培育裝置中2齡、3齡幼體蛻皮速率加快，可縮短幼體發(fā)育周期。

3 討論

3.1 親鱟暫養(yǎng)和人工繁殖設(shè)施和技術(shù)探討

中國(guó)鱟人工育苗或鱟試劑采血過程都需要親鱟暫養(yǎng)[33?34]。親鱟暫養(yǎng)裝置一般為鋪設(shè)底沙的養(yǎng)殖桶或養(yǎng)殖池，由于較厚底沙堆積在桶底，缺少底質(zhì)清潔和過濾能力，易缺氧發(fā)黑發(fā)臭，氨氮和亞硝酸含量較快升高，水質(zhì)較快惡化，不利于親鱟埋棲和鱟卵孵化。本研究構(gòu)建雙層水體暫養(yǎng)系統(tǒng)，加強(qiáng)底沙流水通過，既增加底沙中的溶解氧也可清潔底沙，加強(qiáng)水質(zhì)凈化能力，提高親鱟產(chǎn)卵量，且清洗頻率低，可推廣使用。

中國(guó)鱟有晝伏夜出的習(xí)性，在夜晚和凌晨活動(dòng)比較活躍[35?37]，因此本研究中投喂時(shí)間在傍晚5：00～6：00，此時(shí)親鱟較為活躍，能夠及時(shí)攝食新鮮餌料，防止餌料泡水太久鮮味降低甚至腐敗變質(zhì)。投餌時(shí)要注意將餌料均勻撒落，保證每只鱟均能攝食到一定量的餌料。投餌量視親鱟攝食量而定，一般為親鱟總重3%～5%[38]，投喂0.5～1h 后未攝食的餌料和糞便要及時(shí)清理，因?yàn)轺c糞便氨氮含量較高，殘餌容易腐爛污染水質(zhì)，待親鱟攝食完畢后及時(shí)換水，防止水質(zhì)變差。

3.2 鱟卵收集方法探討

有關(guān)鱟卵收集方法研究較少，李瓊珍等[30]研究了一種收集鱟卵方法，即在養(yǎng)殖池底部鋪設(shè)木板架，并在其上鋪上60目篩絹網(wǎng)再鋪沙，木板架下放置充氣管；收集鱟卵時(shí)用直徑2 mm 的網(wǎng)篩從底沙中分離鱟卵。本研究設(shè)計(jì)的鱟卵收集裝置，可不用下池，較之省時(shí)省力，只需將收集口對(duì)準(zhǔn)鱟卵即可快速收集。其優(yōu)點(diǎn)是水流的緩沖下減少了鱟卵間碰撞，不會(huì)對(duì)鱟卵造成損傷，省時(shí)省力。其局限是較適合養(yǎng)殖桶或小型養(yǎng)殖池，且由于采用虹吸原理，需要內(nèi)外存在壓力差才能順利收集，因此后續(xù)將研究采用電力驅(qū)動(dòng)的改進(jìn)版本來克服這些問題，實(shí)現(xiàn)收集鱟卵的自動(dòng)化。

3.3 幼體培育設(shè)施和技術(shù)探討

人工幼鱟培育水體中，如果底沙堆積不流動(dòng)，易缺氧發(fā)黑，水質(zhì)惡化，導(dǎo)致幼鱟大量死亡。為了解決此問題，關(guān)杰耀等[39]曾設(shè)計(jì)了一種幼鱟仿生態(tài)養(yǎng)殖裝置，取得良好的幼體培育效果。本研究設(shè)計(jì)的仿生態(tài)雙層水體新型幼體培育裝置無須蛋白分離器和復(fù)雜生化箱，結(jié)構(gòu)較之更為簡(jiǎn)單、成本更低、占地面積更小、維護(hù)更方便、更省力、復(fù)制性更強(qiáng)，而且能夠?yàn)閷?shí)驗(yàn)室內(nèi)或大規(guī)模化培育幼體提供養(yǎng)殖設(shè)施思路，為進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)幼體培育進(jìn)行了探索和實(shí)踐。

本研究設(shè)計(jì)的新型幼體培育裝置相較于常規(guī)培育裝置，不但幼體死亡率更低、蛻殼率更高，而且幼鱟發(fā)育速度更快，2齡幼體在第20 d 就開始出現(xiàn)，3齡在第30 d 開始出現(xiàn)，獲得2齡、3齡幼體時(shí)間大大縮短，比常規(guī)培育裝置快10～30 d 。新型裝置能夠提供充足的溶氧、較好的水質(zhì)，加上足夠的營(yíng)養(yǎng)能夠提高幼鱟蛻殼速率，驗(yàn)證了 Carmichael 等[40]認(rèn)為水循環(huán)的增加或溶解氧濃度的增加可提高幼鱟發(fā)育速度的觀點(diǎn)。

本研究開展幼鱟培育裝置的設(shè)計(jì)和改進(jìn)，雖然幼鱟存活率有較大提高，但2齡發(fā)育至3齡，幼體存活率仍明顯下降。Botton 等[41]研究美洲鱟幼體發(fā)育也發(fā)現(xiàn)，從2齡至4齡幼體，其成活率會(huì)急劇下降，從1齡幼體發(fā)育到成體最終存活率僅能達(dá)到2.5%。Carmichael 等[42]認(rèn)為死亡率劇增是因?yàn)椴贿m當(dāng)?shù)酿D料引起的。長(zhǎng)期營(yíng)養(yǎng)不良使幼鱟在長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)后大量死亡。有研究表明低齡幼鱟偏雜食性，一定齡期后轉(zhuǎn)為肉食性[35]。后續(xù)研究在改善的養(yǎng)殖條件下，繼續(xù)開展幼體餌料試驗(yàn)。

參考文獻(xiàn)：

[1]翁朝紅，謝仰杰，肖志群，等.福建及中國(guó)其他沿岸海域中國(guó)鱟資源分布現(xiàn)狀調(diào)查[J].動(dòng)物學(xué)雜志，2012，47（3）：40?48.

[2] KWAN K Y ， SHIN P K ，CHEUNG S G. Preliminary home range study of juvenile Chinese horseshoe crabs ， Tachypleustridentatus （Xiphosura），using passive tracking methods[C]//Carmichael R H ，Botton M L ，Shin P KS ，et al. Changing Global Perspectives on Horseshoe Crab Biology ，Conservation and Management ，New York ：Springer，2015：149?166.

[3]顏明艷，王月，顧華鑫，等.鱟試劑產(chǎn)業(yè)在中國(guó)的發(fā)展現(xiàn)狀及相關(guān)建議[J].生物學(xué)雜志，2018，35（2）：88?91.

[4] XIE Z ，YAN M ，WANG Y ，et al. Spirulina platensis powder is an applicable feed additive for Chinese horseshoe crab Tachy- pleustridentatus[J]. Aquaculture Research ，2021，52（5）：2121?2129.

[5] YING Z W ，BAO Y Y ，LI Y K ，et al. Impact of Different Diets on Adult Tri-Spine Horseshoe Crab ， Tachypleustridentatus[J]. Journal of Ocean University of China，2022，21（3）：541?548.

[6] KWAN K Y ， FU Y ， ZHONG M. Spatiotemporal distribution of Asian horseshoe crab eggs are highly intermingled with anthropogenic structures in Northern Beibu Gulf， China[J]. Journal of Ocean University of China，2022，21（3）：531?540.

[7]應(yīng)紫薇，李銀康，鮑虞園，等.不同流速下中國(guó)鱟稚鱟游泳模式研究[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)，2023，30（2）：169?177.

[8]梁廣耀.中國(guó)鱟人工育苗的初步研究[J].海洋科學(xué)，1987，10（1）：40?47.

[9] SEKIGUCHI K ， SESHIMO H ， SUGITA H. Post-embryonic development of the horseshoe crab[J]. The Biological Bulletin，1988，174（3）：337?345.

[10] CHEN Y ，LAU C W ，CHEUNG S G ，et al. Enhanced growth of juvenile Tachypleustridentatus （Chelicerata： Xiphosura） in the laboratory：a step towards population restocking for conservation of the species[J]. Aquatic Biology，2010，11（1）：37?46.

[11]蔡心一，林瓊武，黃健裕.中國(guó)鱟的生殖習(xí)性和早期胚胎發(fā)育[J].海洋學(xué)報(bào)（中文版），1984，6（5）：663?671.

[12]王淵源，鄭金寶.幼鱟發(fā)育的初步報(bào)告[J].海洋科學(xué)，1984，8（3）：47?48.

[13]王軍，王德祥，蘇永全，等.中國(guó)鱟的胚胎發(fā)育[J].動(dòng)物學(xué)雜志，2001，36（4）：9?14.

[14]洪水根，李祺福，陳美華，等.中國(guó)鱟胚胎發(fā)育研究[J].廈門大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2002，41（2）：239?246.

[15]謝葉.中國(guó)鱟工廠化育苗及關(guān)鍵生態(tài)與鱟河豚毒素研究[D].湛江：廣東海洋大學(xué)，2012.

[16]王德祥，蘇永全，王軍，等.幾種因子對(duì)中國(guó)鱟胚胎和幼體發(fā)育的影響[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)，2001，8（3）：10?14.

[17] LEE C N ，MORTON B. Experimentally derived estimates of growth by juvenile Tachypleustridentatus and Carcinoscorpiusrotundicauda （Xiphosura） from nursery beaches in HongKong[J]. Journal of Experimental Marine Biology and Ecology ，2005，318（1）：39?49.

[18] LIAO Y Y ，LIU K ，WU H P ，et al. How survival and food intake of tri-spine horseshoe crabs ， Tachypleustridentatus respond to thermal variation： implications for understanding its distribution limit[J]. Journal of Natural History ，2019，53（31-32）：1951?1960.

[19]李鋒，廖永巖，董學(xué)興.鹽度對(duì)中國(guó)鱟（Tachypleustridentatus）胚胎發(fā)育的影響[J].湛江海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，19（3）：4?8.

[20] CHATTERJI A ，KOTNALA S ，MATHEW R. Effect of salinity on larval growth of horseshoe crab ，Tachypleus gigas（ Müller ）[J]. Current Science，2004，15：248?250.

[21]董蘭芳，許明珠，劉海娟，等.鹽度對(duì)中國(guó)鱟幼鱟生長(zhǎng)、蛻殼、 Na+-K+-ATP 酶活性、免疫指標(biāo)和抗氧化能力的影響[J].熱帶海洋學(xué)報(bào)，2022，41（3）：156?163.

[22] SHIN P K ， CHAN C S ， CHEUNG S. Physiological energetics of the fourth instar of Chinese horseshoe crabs （ Tachypleu- stridentatus） in response to hypoxic stress and re-oxygenation[J]. Marine Pollution Bulletin，2014，85（2）：522?525.

[23]董蘭芳，許明珠，李世才，等.鹽度和溫度對(duì)中國(guó)鱟幼鱟耗氧率和排氨率的影響[J].廣西科學(xué)，2022，29（3）：577?583.

[24] HONG S G ，ZHANG X ，ZHAO Y J ，et al. Effect of sediment type on growth and survival of juvenile horseshoe crabs （Tachypleu-stridentatus）[C]//Biology and Conservation of Horseshoe Crabs， New York ：Springer，2009：535?540.

[25]程鵬，周愛娜，霍淑芳，等.中國(guó)鱟人工培育的幼體對(duì)不同環(huán)境適應(yīng)性的研究[J].廈門大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2006，45（3）：404?408.

[26] KWAN K Y ， CHAN A K ， CHEUNG S G ， et al. Hemolymph quality as indicator of health status in juvenile Chinese horseshoe crab Tachypleustridentatus（Xiphosura） under laboratory culture[J]. Journal of Experimental Marine Biology and Ecology ，2014，457：135?142.

[27]梁君榮，王軍，蘇永全，等.四種重金屬對(duì)中國(guó)鱟（Tachypleu- stridentatus）胚胎發(fā)育的影響[J].生態(tài)學(xué)報(bào)，2001，20（6）：1009?1012.

[28] CARMICHAEL R H ，RUTECKI D ，VALIELA I. Abundance and population structure of the Atlantic horseshoe crab Limulus polyphemus in Pleasant Bay ， Cape Cod[J]. Marine Ecology Progress Series，2003，246：225?239.

[29]關(guān)杰耀，頡曉勇，周海超，等.一種中國(guó)鱟苗種的科學(xué)放流方法.中國(guó)：CN109042418B[P].2021-03-30.

[30]李瓊珍，藍(lán)嘉，龔竹林，等.一種采用池底架空鋪沙分區(qū)來獲得鱟天然受精卵的方法.中國(guó)：CN104255594B[P].2016-10-05.

[31]陳瑞芳，廖永巖，劉海娟，等.一種用于孵化中國(guó)鱟卵的懸浮孵化筐.中國(guó)：CN207531670U[P].2018-06-26.

[32] TSUCHIYA K. The history of horseshoe crab research and conservation in Japan[C]//Biology and Conservation of Horseshoe Crabs，New York ：Springer，2009：559?570.

[33]陳波，夏昊.東方鱟及其人工繁育技術(shù)[J].中國(guó)水產(chǎn)，2002，9（6）：55?56.

[34] TINKER-KULBERG R ， DELLINGER K ， BRADY T E ， et al. Horseshoe crab aquaculture as a sustainable endotoxin testingsource[J]. Frontiers in Marine Science，2020（7）：153.

[35]鐘赟民，翁朝紅，王志婷，等.中國(guó)鱟室內(nèi)人工繁育和鱟卵、幼體常見病原鑒定及其防治[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)，2023，30（6）：799?811.

[36] HU M H ， WANG Y J ， TSANG S T ， et al. Effect of prolonged starvation on body weight and blood-chemistry in two horseshoe crab species： Tachypleustridentatus" and" Carcinoscorpiusrotundi- cauda（Chelicerata： Xiphosura）[J]. Journal of Experimental Marine Biology and Ecology，2010，395（1-2）：112?119.

[37]應(yīng)紫薇，李銀康，頡曉勇.中華鱟（Tachypleustridentatus）稚鱟對(duì)不同比例泥沙類型選擇行為特征[J].海洋與湖沼，2022，53（5）：1242?1249.

[38] XU Z，WANG Y J ，GUL Y ，et al. Effects of copper supplement on the immune function and blood-chemistry in adult Chinese horseshoe crab Tachypleustridentatus[J]. Aquaculture，2020，515：734576.

[39]關(guān)杰耀，符益健，廖永巖，等.中國(guó)鱟幼體仿生態(tài)養(yǎng)殖裝置.中國(guó)：CN208783574U[P].2019-04-26.

[40] CARMICHAEL R H ，BRUSH E. Three decades of horseshoe crab rearing：a review of conditions for captive growth and survival[J]. Reviews in Aquaculture，2012，4（1）：32?43.

[41] BOTTON M L ， LOVELAND R E ， TIWARI A. Distribution， abundance ，and survivorship of young-of-the-year in a commercially exploited population of horseshoe crabs Limulus polyphemus[J]. Marine Ecology Progress Series，2003，265：175?184.

[42] CARMICHAEL R H ， GAINES E ， SHELLER Z ， et al. Diet composition of juvenile horseshoe crabs：implications for growth andsurvival of natural and cultured stocks[C]//Biology and conser- vation of horseshoe crabs，New York ：Springer，2009：521?534.

（責(zé)任編輯：柯文輝）