細菌鑒定藥敏分析系統在院內獲得性肺炎患者下呼吸道感染細菌分離鑒定中的應用

徐普輝 李細琴 黃志杰

1 撫州市臨川區第一人民醫院重癥醫學科 （江西 撫州 344000）

2 臨川區連城鄉衛生院檢驗科 （江西 撫州 344000）

內容提要： 目的：應用細菌鑒定藥敏分析系統明確某醫院院內獲得性肺炎下呼吸道感染患者的病原菌分布，驗證病原菌的耐藥性，在現有常規抗菌藥物情況下，為臨床前期治療合理使用抗菌藥物提供參考。方法：將某醫院2020年1月～2022年12月院內患者中肺炎合并下呼吸道感染患者135例作為研究對象，首先收集患有此病患者的痰液標本，之后再對標本進行普通培養及藥敏試驗分析。流程上需要對采集的患者痰液樣本進行病原菌的分離，并且及時地觀測病原菌的分布狀況，之后則對從患者痰液內檢測到的病原菌進行耐藥性測試。結果：在收集到的135例患者的135份痰樣本中共分離檢測出了288株病原菌，有革蘭陽性球菌、革蘭陰性桿菌以及真菌，其中數目最多的病原菌就是革蘭陰性桿菌，共鑒定出231株，占80.21%，革蘭陽性球菌位列第二，共有31株病原菌，占10.76%，真菌占比最少。在革蘭陰性桿菌類群中，分布最為廣泛的是肺炎克雷伯菌，共分離鑒定出98株，占42.42%；而在革蘭陽性球菌中，所占比例最多的病原菌是金黃色葡萄球菌，共鑒定出17株，占54.84%；在本試驗中進行的病原菌耐藥性試驗中，革蘭陰性桿菌中的銅綠假單胞菌對本次試驗中選取的抗菌藥物的耐藥性比較強，對臨床常用藥復方新諾明的耐藥率為80.85%；革蘭陽性球菌中數量最多的金黃色葡萄球菌對青霉素的耐藥性表現得也比較高，為82.35%。結論：應用細菌鑒定藥敏分析系統可發現在本院院內獲得性肺炎下呼吸道感染常見的病原菌主要是革蘭陰性桿菌，細菌對抗菌藥物的耐藥性比較高，在臨床上對患者進行治療時，需要考慮到病原菌的耐藥性，合理選擇現有常規抗菌藥物，提高患者的治療療效。

醫院獲得性肺炎的發生率在15.6%～38.9%[1]。如果肺炎患者出現下呼吸道感染，需要及時地對患者開展抗感染治療，否則會危害患者的健康[2]。隨著醫藥行業的發展，各種抗菌藥物的濫用已經使病原菌耐藥性問題不斷嚴重，而醫院內的感染正在逐漸增多，增加了醫生在臨床合理選擇抗菌藥物的難度[3]。及時監測醫院獲得性肺炎患者體內的病原菌分布以及其耐藥性情況，對指導臨床醫生前期合理使用抗菌藥物具有很重要的作用。康泰生物細菌鑒定藥敏分析系統是根據在細菌代謝作用下物質產生pH變化，能釋放色源產生顏色變化或經加入顯色劑產生顏色變化，將反應結果按照說明書進行判讀，通過鑒定軟件檢索得到細菌鑒定結果[4]。本文對2020年1月～2022年12月于某醫院院內肺炎并伴有下呼吸道感染的患者應用細菌鑒定藥敏分析系統，分析患者痰液標本中病原菌分布和耐藥性情況，為臨床治療提供依據。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

收集2020年1月～2022年12月在某醫院院內獲得性肺炎下呼吸道感染的患者135例作為研究對象，收集此類患者的痰液標本進行鑒定分析，患者中男性72例，女性63例；患者年齡4～81歲，平均（44.19±5.92）歲；患者病程1～6d，平均（8.48±1.39）d；左肺感染患者21例，右肺感染患者23例，雙肺感染患者91例。

納入標準：①患者經過臨床醫生診斷患有肺炎，同時伴隨有下呼吸道感染癥狀；②患者以及其家屬均同意采集其痰液標本；③患者沒有其他方面的感染性疾病或者精神類疾病。排除標準：①不能配合此次研究；②中途退出者。

1.2 方法

將收集到患者的痰液樣本及時接種于血平板、巧克力平板及麥康凱平板中，將溫箱溫度調至（35±2）°C進行18～24h孵育，采集到的痰液樣本先進行病原菌的培養，之后再對菌株進行分離鑒定。本實驗采用溫州康泰公司細菌生化板及鑒定系統及配套試劑對患者的痰液病原菌進行細菌鑒定。將本研究菌株接種于血平板上，培養后根據革蘭染色和氧化酶及觸酶等結果來選擇檢測板，挑取數個純菌落，將其放置于無菌蒸餾水中制成2或4麥氏濃度的菌懸液。在細菌鑒定板鑒定孔中加入100μL菌懸液，以石蠟油封閉后，再培養，得到的反應結果按照說明書進行判讀，通過鑒定軟件檢索得到細菌鑒定結果。本次藥敏試驗采用的是溫州康泰公司藥敏紙片，使用紙片擴散法。首先將肉湯菌液接種在M-H平板內，之后在肉湯菌液上面貼藥敏紙片，放置在恒溫箱中孵育16～24h，溫箱的溫度保持在（35±2）°C，測量出病原菌抑菌圈的直徑，從而可以計算出細菌的敏感程度和耐藥性。

1.3 觀察指標

觀察135例患者痰液標本的病原菌分布情況，統計檢測到的病原菌株數，并對其進行整理分類，對比不同的病原菌的耐藥性。

1.4 統計學分析

以SPSS 22.0統計學軟件進行數據處理統計分析，計量資料以±s表示，采用t檢驗，計數資料以%表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2.結果

2.1 患者下呼吸道病原菌分布

本次研究經過對獲得性肺炎患者的痰液樣本進行鑒定，一共檢出288株病原菌，類型分別為革蘭陰性桿菌、革蘭陽性球菌以及真菌，革蘭陰性桿菌所占比例為80.21%，革蘭陽性球菌為10.76%，真菌占比為9.03%。在革蘭陰性桿菌中，分布最廣的是肺炎克雷伯菌，所占比例為42.42%；在革蘭陽性球菌中占比最大的是金黃色葡萄球菌，分布比例為54.84%；真菌中白念球菌分布最廣泛，所占比例為53.85%，見表1。

表1.下呼吸道感染病原菌分布

2.2 病原菌的耐藥性分析

耐藥性試驗中結果表明，在此次獲得性肺炎患者痰液中鑒定出來的病原菌菌株對常見的抗菌藥物都存在著一些或多或少的耐藥性。在革蘭陰性桿菌株種類中，銅綠假單胞菌對本次試驗中使用的抗菌藥物都存在著一定的耐藥性，其中它對復方新諾明的耐藥性為80.85%；肺炎克伯菌對頭孢噻肟的耐藥性為63.27%，見表2。在革蘭陽性球菌病原菌種類中，金黃色葡萄球菌對青霉素的耐藥性為82.35%；實驗結果中肺炎鏈球菌在本次試驗中，對青霉素的耐藥性達到100%，見表3。

表2.革蘭陰性桿菌耐藥性統計(n/%)

表3.革蘭陽性桿菌耐藥性統計(n/%)

3.討論

近年來，臨床中存在著抗菌藥過度使用甚至濫用的現象，這種問題發展加劇造成了臨床中許多病原菌對藥物產生耐藥性，許多抗生素藥物對患者的治療效果逐漸變低[5]。有研究表明，盡管全國常見細菌的耐藥趨勢基本一致，但是在不同時期、不同的地區或者不同等級的醫院，病原菌的耐藥性都會存在一定的差異，此次研究選擇某醫院院內的肺炎下呼吸道感染患者進行研究在于了解本地區的細菌耐藥風險[6]。目前，臨床對細菌鑒定和藥敏分析的要求不斷提高，各種細菌鑒定方法及技術也得到了發展，傳統手工操作受人的主觀影響較大，過程復雜，技術水平和經驗的不同會影響鑒定結果。近年來，隨著臨床微生物檢測技術不斷發展，國內外逐漸出現各種商品化細菌鑒定系統，可以縮短鑒定時間，具有簡單化、規范化、自動化和智能化的特點[7]。康泰公司細菌鑒定藥敏分析系統是借鑒國外微生物檢驗分析系統基礎上結合國內實際情況，自主研發生產，采用中文菜單對話，用戶界面友好，該系統4～6h快速試條鑒定結合18～24h藥敏試驗。通過細菌生化反應和耐藥性結果人工判讀，輸入微機自動處理，系統處理能力強大，并按照不同的數據類型進行統計，強大的細菌數據庫國際最新細菌分類方案保證細菌編碼鑒定結果準確性，具有科學的藥敏專家分析系統，不僅能全面報告定性、定量完成藥敏試驗分析，而且可以MRS、HLAR、PRSP、VRE、ESBIS并報告合理的用藥方案，可以自動打印完美的實驗報告。全套系統具有結果準確、可靠，流程標準化、操作簡易、快速檢測的優點，并且與進口儀器試劑相比更為經濟高效。

本次試驗的結果表明，在本院院內獲得性肺炎下呼吸道感染的患者，其痰液內存在3種病原菌類型，分別為革蘭陽性球菌、革蘭陰性桿菌和真菌。而革蘭陰性桿菌分布最廣，它在鑒定到的全部病原菌占80.21%，革蘭陽性球菌排在第二位，占到總病原菌的10.25%，而真菌的占比為9.03%。本次研究的結果與熊雪芳等[8]研究的結果基本保持一致，更加驗證了本次試驗的準確性。

本次研究的病原菌耐藥性試驗結果表明，基本上所有的病原菌都對抗菌藥表現出了耐藥性。在本次實驗中，對抗菌劑藥物表現的耐藥性最高的就是肺炎鏈球菌對青霉素，可能是因為青霉素是生活中最常用的一類抗菌藥物，與臨床使用時間長久有關；其次是金黃色葡萄球菌對青霉素的耐藥，銅綠假單胞桿菌對復方新諾明的耐藥率高達80.85%；在臨床合理選用抗菌藥物上，臨床醫生應當根據患者的實際情況考慮是否可以對患者采用多種抗菌藥聯合用藥，聯合用藥能否達到更好的治療效果。

綜上所述，細菌鑒定藥敏分析軟件操作簡單，成本較低，適合基層醫院。通過細菌鑒定藥敏分析系統可以明確本院院內獲得性肺炎下呼吸道感染患者的病原菌分布，驗證病原菌的耐藥性，提醒在進行臨床治療的過程中，醫院應該加強對患者的耐藥監測，確保臨床抗生素用藥的合理性，提高對患者的治療效率。