巰基丙酮酸硫基轉移酶介導PI3K/AKT信號對急性胰腺炎細胞模型凋亡和自噬的影響

王小紅,錢 晶,翁文俊,周國雄,朱順星,祁小鳴,劉 春,程睿智

(南京鼓樓醫院集團儀征醫院 1.消化內科,2.普通外科,3.心胸外科,江蘇 儀征 211900;4.南通大學附屬醫院 消化內科,江蘇 南通226006;5.南通大學 實驗動物中心,江蘇 南通 226001)

急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是需要緊急入院的常見消化系統疾病,其中約20%的病人會發展成重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)。SAP具有發病急、進展快等特征,病死率高達30%,甚至可出現全身炎癥反應綜合征,影響預后并可并發多器官功能不全綜合征,嚴重威脅病人生活質量和生命安全[1],明確AP的發病機制并探索治療靶點具有重要意義。巰基丙酮酸硫基轉移酶(mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST)是一種廣泛存在于多種組織器官中的硫基轉移酶,可催化線粒體內源性硫化氫(hydrogen sulfide,H2S)生成,是調控H2S生成的關鍵酶,廣泛參與炎癥、細胞凋亡和血管松弛等病理生理過程[2]。H2S是一種功能相關介質,其異常產生與哺乳動物組織的炎癥有關[3]。我們的前期動物實驗結果表明,MPST可通過NF-κB信號誘導胰腺組織自噬和炎癥反應,進而加重大鼠SAP病情;抑制MPST對SAP大鼠具有保護作用。然而,MPST在AP中的靶向作用細胞仍不明確。本研究將小鼠胰腺腺泡細胞266-6作為研究對象,構建AP體外細胞模型,探討MPST對AP的具體作用及可能機制,為臨床AP治療提供新方向。

1 材料與方法

1.1 細胞株

小鼠胰腺腺泡細胞株266-6購自ATCC細胞庫。

1.2 儀器

正置顯微鏡(UB203i-POL,重慶澳浦光電技術有限公司,中國);凝膠電泳儀(EPS300,Tanon,中國);流式細胞儀(FACSCelesta,BD,美國);凝膠成像儀(5200/5200R,Tanon,中國);酶標儀(Multiskan FC,ThermoFisher,美國)。

1.3 主要藥品及試劑

腸促胰酶肽(cholecystokinin,CCK)(產品……