肺結核患者痰中結核分枝桿菌檢驗的應用及陽性率評估

韋柳曼，夏益貴，梁慧娜

河池市人民醫院，廣西河池 547000

肺結核作為最常見的傳染病之一，該病可引起各種癥狀，包括長期咳嗽、咳痰伴有血絲、胸悶、乏力、發熱、盜汗、食欲不振和體質量減輕等[1-2]。若未及時給予診治，可影響肺部及其周圍組織，并在嚴重情況下擴散到其他器官，危及生命[3]。因此，臨床及時診斷，盡早治療對于優化預后具有重要意義。臨床診斷肺結核的金標準方法是痰液固體培養，具有較高的診斷準確性，但流程繁瑣，時間長，難以作為首選篩查診斷方法[4]。痰涂片在診斷肺結核中具有一定的應用價值，操作簡單便捷，但受多重因素影響，假陰性概率較高，存在一定局限性。Xpert 檢測法用于結核分枝桿菌檢驗是肺結核的生物學診斷方法。但不同方法的診斷效能在學術界仍然存在爭議[5]?；诖?，本研究選取2022 年1月—2023 年6 月河池市人民醫院收治的200 例疑似肺結核患者為研究對象，旨在探索結核分枝桿菌檢驗的應用效能，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的200 例疑似肺結核患者為研究對象，男103 例，女97 例；年齡34～72 歲，平均（52.61±3.54）歲。本研究經醫學倫理委員會批準，患者簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標準

納入標準：年齡≥18 歲；存在與肺結核相似的癥狀；符合《肺結核診斷標準（WS 288—2017）》對疑似肺結核病例的診斷[6]。

排除標準：精神疾病患者；肺部腫瘤患者；中途退出研究者。

1.3 方法

樣品采集：采樣前為患者提供溫開水漱口，指導其將咽喉部位的痰液咳出，裝載于一次性干凈痰瓶中，作為檢測樣品。

Xpert 法檢測：取1 mL 痰標本加入2 mL 樣本處理液，渦旋震蕩10 s，室溫放置10 min，重復震蕩步驟，室溫放置5 min 后，取2 mL 經過處理的標本加入試劑盒，上機檢測。反應結束后，在檢測系統窗口下可直接觀察測試結果。結核分枝桿菌數量分為高、中、低、極低和未檢出進行報告，利福平檢測結果為敏感和耐藥。

羅氏固體培養：挑取約5 mL 痰液至已標記的50 mL 離心試管中，加等量的2%N-乙酰半胱氨酸－氫氧化鈉前處理液（去污染），旋渦振蕩20 s，靜置15 min，加無菌磷酸緩沖鹽溶液（pH 6.8）至約50 mL，蓋緊蓋子，3 000 r/min 離心15 min，倒掉上清液，添加1～3 mL 磷酸緩沖鹽溶液（pH 6.8）以中和pH 至6.8。用無菌毛細管吸取消化后標本0.1 mL，滴于中性羅氏培養基，將接種過的斜面來回晃動，使菌液均勻鋪于斜面上，斜面朝上放37℃恒溫箱內培養。每一標本同時接種2 支。接種后第3、7 d 觀察，此后，1 次/周。陽性結果經涂片證實隨即報告。＜7 d 報陽，則為快速生長菌，＞7 d 則為緩慢生長菌。陰性結果至8 周報告，必要時可延長。

1.4 觀察指標

①以痰液固體培養檢測為金標準，匯總Xpert法檢測對肺結核的檢出情況；②分析不同方法對肺結核的診斷效能：靈敏性=真陽性例數/（真陽性例數+假陰性例數）×100%；特異性=真陰性例數/（真陰性例數+假陽性例數）×100%；準確性=（真陽性例數+真陰性例數）/（真陽性例數+假陰性例數+真陰性例數+假陽性例數）×100%；陽性預測值=真陽性例數/（真陽性例數+假陽性例數）×100%；陰性預測值=真陰性例數/（真陰性例數+假陰性例數）×100%。

1.5 統計方法

采用SPSS 23.0 統計學軟件進行數據分析，診斷結果、診斷效能為計數資料，用例數（n）和率（%）表示，一致性行Kappa檢驗。

2 結果

2.1 不同診斷方法診斷結果對比

金標準共檢出陽性17 例，陰性183 例，陽性檢出率為8.50%；Xpert 法共檢出陽性24 例，陰性176例，陽性檢出率為12.00%。見表1。

表1 不同診斷方法診斷結果對比（n）

2.2 不同檢測方法診斷效能對比

Xpert 法診斷的靈敏性為94.12%（16/17），特異性為95.63%（175/183），準確性為95.50%（191/200），陽性預測值為66.67%（16/24），陰性預測值為99.43%（175/176），與金標準之間具有良好的一致性（Kappa值為0.756）。

3 討論

肺結核為我國乙類傳染病之一，是一種由結核分枝桿菌感染引起的慢性傳染病[7]。主要通過空氣飛沫傳播，當患者咳嗽、打噴嚏或說話時，釋放出含有的病原體經過感染的空氣飛沫，進入他人的呼吸道，從而導致感染[8]。從癥狀方面分析，該病癥狀并無明顯典型性，易與其他肺部疾病混淆。然而隨著病情進展，將對多臟器功能帶來不同程度損傷，甚至危及生命[9]。因此，探索出準確、可靠且操作便捷的肺結核檢測方法，對于及時診治，優化預后的意義重大。

痰液培養是肺結核的金標準檢測方法，但培養過程長，難以作為臨床快速篩查診斷方法[10]。痰涂片是將痰液樣品置于玻片上，予以流程處理后，在鏡下觀察結核分枝桿菌，具有一定診斷檢出率，但假陰性概率較高[11]，且涂陽率比較低。本研究對200 例疑似患者，將痰液羅氏固體培養方法的結果作為金標準，同時用Xpert 法檢測患者結核分枝桿菌。結果顯示，金標準檢出17 例確診病例，陽性率為8.50%，Xpert 法檢測出24 例確診病例，陽性率為12.00%。該研究中Xpert 法在診斷肺結核的靈敏性、特異性、準確性、陽性預測值、陰性預測值分別是94.12%、95.63%、95.50%、66.67%、99.43%，和金標準檢驗的結果之間具有良好的一致性（Kappa值為0.756）。與趙麗麗等[12]的研究結論一致，其Xpert檢測方法的敏感度（98.58%）、特異度（100.00%）、準確性（99.66%）、陽性預測值（100.00%）、陰性預測值（99.56%），與金標準間具有良好的一致性（Kappa值為0.991）。分析原因，Xpert 法檢測使用聚合酶鏈式反應技術，特異性地擴增結核分枝桿菌的目標片段。引入熒光標記的探針以特異地與擴增產物結合，并通過實時熒光定量聚合酶鏈式反應檢測熒光信號的增加情況[13]。若樣品中存在結核分枝桿菌，其靶標序列將被擴增并與探針結合，導致熒光信號增加，能夠快速、準確地檢測肺結核感染[14]。該方法可直接檢測結核分枝桿菌DNA，能夠準確確認是否存在結核分枝桿菌感染，可避免其他細菌引起的誤診，具有更高的靈敏性、特異性。此外，Xpert 法檢測依托生物學檢測技術，能夠檢測到非常低水平的結核分枝桿菌DNA，減少假陰性和假陽性結果的可能性[15-16]。

綜上所述，臨床對于疑似肺結核患者可優先通過Xpert 法檢測進行篩查診斷，該方法具有較高的診斷效能。